新学期Abbkine利器助你细胞培养游刃有余

干货分享|超全重组蛋白使用指南关键词：重组蛋白、细胞因子、溶解方式、储存条件、常见问答近期Abbkine上新一批经过严格验证的活性细胞因子重组蛋白，很多小伙伴在咨询重组蛋白的使用注意事项和保存方法。这不，它来咯~Abbkine重组蛋白均为冻干粉形式，-20℃或-80℃可以保存数年。蛋白冻干粉在使用前需溶解，部分重组蛋白产品带有复溶buffer，优先推荐使用配套的复溶buffer。不同重组蛋白复溶及储存条件可能会存在差异，详细参考说明书推荐方法。溶解方式打开试管前务必对产品进行离心。10000-12000rpm离心30s或3000-3500rpm离心5min。建议将冻干后的蛋白在无菌无内毒素的ddH2O中复溶至0.1-1mg/mL，期间可用枪轻轻吹打混匀，室温静置至少20min，使其完全溶解。注意避免剧烈涡旋。如何使用建议首先按照说明书指导对冻干粉按照一定的浓度进行复溶，完全复溶后，再根据实际实验所需浓度，使用特定的稀释液进行稀释。如何保存冻干粉形式：冻干粉形式的重组蛋白通常较为稳定，-20℃或-80℃可以长期保存。复溶后液体形式：复溶后的重组蛋白4℃可以保存1周。复溶液的长期保存：由于Abbkine重组蛋白冻干液成分及复溶buffer均不含蛋白保护剂，溶解后的蛋白溶液如需长期保存，建议添加载体蛋白（5%HSA,10%FBS或0.1%BSA)后，分装保存，避免反复冻融。常见问答Q:为何一定要开盖前离心？A:打开试管前务必进行离心，Abbkine重组蛋白不含载体蛋白或其他添加剂（如HSA、BSA或蔗糖、甘露醇、海藻糖等），通常以最少量的盐溶液冻干处理后盛放于无菌管内。微量的蛋白在冻干过程中会沉积在管壁内，形成很薄或不可见的蛋白膜，冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而飘散并粘附于管壁或管盖上，因此开盖前需离心将冻干粉收集到管底，以减少冻干粉的开盖损失，确保溶解蛋白的正确浓度。Q:为何不能直接将蛋白稀释至实验所需浓度，还要先复溶？A:说明书建议的复溶buffer是溶解冻干粉的最佳条件，直接稀释可能会存在不溶的情况。蛋白在一定的浓度范围内可以保持良好的活性及稳定性。低于或高于该浓度范围，可能会导致蛋白无法完全溶解，甚至出现蛋白质聚集现象，或是活性减弱甚至丧失。Q:为何有时冻干粉不易溶解？A:蛋白的溶解性与很多因素有关，如pH值和离子强度等，说明书上推荐的复溶buffer均经过严格测试，是能够将该活性蛋白完全溶解的液体。若难以立即溶解，可以室温静置20min，使其完全溶解，或将其放置于水平摇床上低速摇一段时间，或是将重悬液在4℃静置2小时以上。Q:能否使用涡旋仪剧烈震荡，帮助蛋白快速溶解呢？A:切忌使用涡旋仪进行快速振荡。一般用移液枪的枪头轻吹几下，即可使重组蛋白完全溶解。如不易溶解，应考虑其它因素，尝试使用其它方式促进溶解。Q:重组蛋白种是否含有防腐剂？A:Abbkine重组蛋白均为无菌级别且不含防腐剂，使用过程中注意避免微生物污染。建议使用灭菌溶液复溶，使用无菌管子进行分装保存，避免多次使用交叉污染。新品推荐货号中文名称规格PRP1048重组人转化生长因子-β（TGF-β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049重组人表皮生长因子（EGF）100μg/500μg/1mg/10mgPRP1050重组人干扰素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1151重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051重组人白介素-13（IL-13)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1135重组小鼠白介素17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1052重组人白介素-17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136重组小鼠巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF5μg/20μg/100μg/10mgPRP1053重组人干扰素-β1a（IFN-β1a）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054重组人血管内皮生长因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055重组人白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056重组人核因子κB受体活化因子配体（RANKL）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1057重组人骨形态发生蛋白-2（BMP-2)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1137重组小鼠白介素-4（IL-4)5μg/20μg/100μg/10mgPRP1138重组小鼠干扰素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/10mgPRP1058重组人促血小板生成素（TPO）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1059重组人Noggin蛋白（Noggin）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1060重组人白介素-1β（IL-1β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1061重组人神经生长因子-β（β-NGF）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1062重组人Fms相关酪氨酸激酶3配体(Flt-3Ligand)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1063重组人白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1064重组人骨形态发生蛋白-4（BMP-4）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1065重组人胰岛素样生长因子-I（IGF-I)100μg/500μg/1mg/10mgPRP1140睫状神经营养因子（CNTF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1141重组小鼠白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1142重组小鼠表皮生长因子（EGF）100μg/500μg/1mg/1mgPRP1143重组小鼠神经生长因子-β（β-NGF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1144重组小鼠白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1145重组小鼠/大鼠血管内皮生长因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1146重组小鼠胰岛素样生长因子-I（IGF-I)20μg/100μg/500μg/1mgPRP1147重组小鼠骨形态发生蛋白-4（BMP-4)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1148重组小鼠趋化因子配体2（CCL2）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1149重组小鼠Fms相关酪氨酸激酶3配体（Flt-3Ligand）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1066重组人/小鼠/大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1067重组人胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1068重组人成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1150重组小鼠/大鼠成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1069重组人转化生长因子-β3（TGF-β3）5μg/20μg/100μg/1mg欢迎广大“蝌蚪”们多多关注Abbkine公众号，还会有更多科研惊喜等着大家哟。同时，Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台，经过不懈努力，将多种高端生物实验的干货整理出来，后期陆续在微信公众号中刊登，请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。Abbkine致力于为广大科研用户提供高品质，高性价比的科研试剂！想要了解更多实验干货，敬请关注Abbkine微信公众号及视频号！我们将持续更新更多技术前沿资讯，敬请期待！Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台，经过不懈努力，将多种高端生物实验的干货整理出来，后期陆续在微信公众号中刊登，请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域，致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试