脑出血治疗新策略及理论依据课件

脑出血治疗新策略及理论依据脑出血治疗新策略及其理论依据脑出血治疗新策略及理论依据脑出血治疗现状：脱水降颅压调控血压清除血肿抢救生命脑出血治疗新策略及理论依据

二、脑出血治疗新策略的理论依据（一）脑出血后继发病理改变

1、脑出血继续出血

2、继发脑干出血

3、继发脑室出血

4、丘脑下部损伤

5、脑疝后四点均由出血量过多，继发出血或占位效应压迫所致脑出血治疗新策略及理论依据（二）脑出血后灶周组织损伤

1、灶周组织缺血性损伤（不是半暗带）

2、灶周组织水肿

3、炎性反应

4、细胞凋亡

5、细胞骨架蛋白损伤

6、信号转导系统改变脑出血治疗新策略及理论依据一、脑血流量测定脑出血治疗新策略及理论依据(一)动物实验：模型：犬，注血3ml，相当人类60ml

方法：14C－iodoantipyrine微示踪技术结果：注血6h、24h血肿周围白质的rCBF与对照组相比稍有下降，但无统计学差异；证明脑出血早期的脑损伤非缺血所致；注血72h血肿周围白质的CBF较对照组降低了19.8％（P<0.05)。脑出血治疗新策略及理论依据实验性脑出血后6h、24h、72h的血流量变化血肿周围白质

血肿周围皮质

血肿对侧相应部位白质

血肿对侧相应部位皮质

假手术组

2.07±0.014

2.04±0.354

1.96±0.099

1.81±0.120

6h组

1.91±0.247

2.25±0.382

2.23±0.021

2.10±0.580

24h组1.99±0.035

2.21±0.050

2.00±0.078

1.68±0.078

72h组

1.66±0.014*

2.53±0.212

2.25±0.141*

1.93±0.092

“*”表示与对照组相比P<0.05,有统计学差异。脑出血治疗新策略及理论依据结论：出血3天内血肿周围有轻度CBF降低，第7天较明显，第15天最低，约下降50%，以后逐渐恢复，至第28天仍较低。(二)临床检测：Xe-CT对脑出血患者灶周组织血流量测定（ml/100g·min）

发病天数（例数）血肿区镜像区血肿周围区镜像区1d(14)8.339.9532.0141.102d(2)6.637.531.5373d(2)8.3542.733.7457d(2)744.821.545.215d(14)7.7140.517.5541.721d(2)8.4535.32333.828d(2)8.1543.726.343.9脑出血治疗新策略及理论依据二、脑水肿脑出血治疗新策略及理论依据血肿周围脑组织含水量在ICH不同时期的变化情况6h

12h24h

2d

3d5d生理盐水组

79.5±0.479.3±0.379.2±0.3

79.2±0.379.1±0.379.3±0.4

动脉血组

80.4±0.4

81.8±0.3

82.3±0.383.5±0.4

82.9±0.4

80.8±0.3

水蛭素干预组

80.1±0.380.5±0.4**

81.7±0.3**

82.6±0.5**

82.4±0.2*

80.4±0.3

各时间点动脉血组、水蛭素干预组与生理盐水组相比较P<0.01

；*组与动脉血组相应时相比较P<0.05;**组与动脉血组相应时相比较P<0.01脑出血治疗新策略及理论依据结论：各时间点均有水肿，以2d~3d最明显，水蛭素可减轻脑水肿。脑出血治疗新策略及理论依据6h

12h24h

2d

3d5d生理盐水组

13.89±1.812.15±2.0

12.76±2.2

13.67±2.212.96±1.912.73±2.3动脉血组

16.41±2.219.84±2.2

20.59±2.5

20.23±2.3

19.12±2.217.65±3.2水蛭素干预组

15.98±2.2

16.72±2.1*

17.03±2.4*

19.25±2.2

19.10±2.817.62±3.2血肿周围脑组织EB在ICH不同时期的变化情况各时间点动脉血组、水蛭素干预组与生理盐水组相比P<0.01；*组与动脉血组相应时相比较P<0.05;**组与动脉血组相应时相比较P<0.01

脑出血治疗新策略及理论依据结论：各时间点均有水肿，以2d~3d最明显，水蛭素可减轻脑水肿。脑出血治疗新策略及理论依据三、炎性反应脑出血治疗新策略及理论依据TNF-α相对含量变化(WesternBlot法)TNF-alpha相对含量结论：自6h~7d均有高水平表达，与对照组相比，

p<0.001。脑出血治疗新策略及理论依据IL-6相对含量变化(WesternBlot法)IL-6相对含量结论：自6h~7d均有高水平表达，第2天达高峰。脑出血治疗新策略及理论依据IL-1β相对含量变化(免疫组化染色法)组别阳性细胞数Sham4.20±0.293h4.30±0.326h18.10±1.76﹡12h25.12±1.97﹡24h56.18±4.32﹡2d74.52±4.00﹡3d45.31±4.35﹡5d31.08±3.53﹡*与对照组比较，P<0.016h开始升高，2d达高峰，5d仍较高。（神经元和胶质细胞均高表达）脑出血治疗新策略及理论依据四、细胞凋亡及其相关基因脑出血治疗新策略及理论依据时间TUNEL6h11.4±3.3612h19.8±3.701d22.4±4.282d26.2±3.113d28.8±5.595d31.8±4.157d25.0±4.85血肿周围TUNEL阳性细胞数3d～5d达高峰脑出血治疗新策略及理论依据流式细胞仪检测结果流式细胞仪测定各组凋亡细胞的百分率

时间凋亡细胞的百分率（％）6h9.61±2.2512h13.38±3.621d17.29±5.232d20.3±5.663d31.43±3.035d45.2±4.887d28.21±4.003d～5d达高峰脑出血治疗新策略及理论依据7d5d3d2d24h12h6hmarkerDNA电泳图谱，2d-7d可见DNA断裂形成的不典型梯带

脑出血治疗新策略及理论依据时间Bcl-2BaxCaspase-36h23.4±5.32#6.2±1.64#4.8±1.48#*12h19.4±6.8811.4±3.8412.2±3.11#1d11.8±4.26*15.2±5.17*17.8±4.212d16.8±5.9316.0±5.00*22.4±4.77*3d20.8±5.4510.8±3.4225.2±3.83*5d21.4±3.915.8±1.4819.6±4.787d22.0±4.066.6±1.95#18.0±3.93血肿周围bcl-2、bax、caspase-3阳性细胞数Bcl-2组：F=2.79，p<0.05；bax组：F=7.30，p<0.001；caspase-3组：F=15.3，p<0.001；TUNEL组：F=12.5，p<0.001；*，#，^与本组内无相同符号的数据比：p<0.05

脑出血治疗新策略及理论依据血肿周围组织caspase-3mRNA的表达时间caspase-3mRNA6h0.38±0.1312h0.67±0.141d1.04±0.242d1.74±0.393d0.90±0.155d0.70±0.207d0.35±0.16脑出血治疗新策略及理论依据五、细胞骨架蛋白脑出血治疗新策略及理论依据MAP-2(免疫组化法)*与对照组比较，P<0.05。△水蛭素组与脑出血组比较，P<0.01。

组别脑出血组（n=5）水蛭素干预组（n=5）对照组96.5±0.3396.5±0.336h78.60±0.42﹡24h60.56±0.74﹡2d44.60±0.26﹡3d25.45±0.85﹡37.69±0.76△7d32.55±0.64﹡41.75±0.68△MAP-2阳性细胞百分数脑出血治疗新策略及理论依据GFAP(免疫组化法)*与对照组比较，P<0.05。△水蛭素组与脑出血组比较，P<0.05。

组别脑出血组（n=5）水蛭素干预组（n=5）对照组17.30±0.9417.30±0.946h18.6±0.56﹡24h20.6±0.74﹡2d22.56±1.01﹡3d31.26±0.67﹡29.48±0.66△7d44.28±0.95﹡42.42±0.82△GFAP阳性细胞百分数脑出血治疗新策略及理论依据六、信号传导通路脑出血治疗新策略及理论依据血肿周围组织中NF-кB阳性细胞数NF-кB(免疫组化法，主要见于神经元及胶质细胞)时间对照组脑出血组3h5.0±0.1417.86±2.746h5.24±0.3128.42±3.24﹡Δ12h6.36±0.3434.04±2.69﹡Δ24h6.51±0.5265.53±3.50﹡Δ2d9.06±0.7488.14±6.34﹡Δ3d9.05±0.70100.13±4.88﹡Δ5d7.89±0.9645.30±4.48﹡Δ*与假手术组比较，P<0.01；Δ与3h组组间比较，P<0.013h表达增高，3d达高峰。脑出血治疗新策略及理论依据（一）

NF-кB(Westernblot法，检测灰度值)*与假手术组比较，P<0.01。3h表达增高，3d达高峰。组别灰度值对照组7.13±0.613h15.7±1.47﹡6h27.21±2.62﹡12h34.99±2.02﹡24h62.39±2.88﹡2d81.53±3.29﹡3d95.32±2.16﹡5d56.64±3.21﹡脑出血治疗新策略及理论依据

应用吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）阻断脑出血后NF-кB的活化（脑出血模型成功后，立即腹腔注射PDCT150mg/kg），分别在术后24h、48h、3d和5d观察脑含水量、IL-1β、ICAM-1、MMP-9及细胞凋亡的变化。结果：上述指标均减低，即抑制NF-кB后可减轻脑水肿、减轻炎性反应、抑制细胞凋亡。脑出血治疗新策略及理论依据（二）p38MAPK（免疫组化法，见于小胶质细胞、星形胶质细胞和神经元，细胞核及胞浆内均有表达）p38MAPK阳性细胞数

时间对照组脑出血组3h5.00±1.4228.16±2.45*6h7.50±1.2974.64±7.22﹡Δ12h6.75±2.2286.00±4.45﹡Δ24h6.00±1.83110.93±6.95﹡Δ2d4.25±2.0691.42±8.73﹡Δ3d4.75±1.2688.57±6.21﹡Δ5d4.50±1.2979.64±5.21﹡Δ*与假手术组比较，P<0.01；Δ与3h组组间比较，P<0.0013h表达增高，24h达高峰。脑出血治疗新策略及理论依据组别灰度值Sham8.18±1.203h24.19±6.91﹡6h35.91±2.43﹡12h54.14±3.60﹡24h90.36±6.05﹡2d83.35±3.09﹡3d70.39±3.06﹡5d45.72±3.41﹡p