碘量法测定蔬菜中维生素c含量

碘量法测定蔬菜中维生素c含量

维生素c被称为维生素c，具有预防和治疗伤口疾病的功能，也被称为抗伤口酸。是含有6个碳原子的酸性多羟基化合物。分子中第2及第3位碳原子上的2个烯醇式羟基极易释放出H+,具有很强的还原性。在氧化剂存在时,抗坏血酸可脱氢形成脱氢抗坏血酸,反应可逆,脱氢抗坏血酸具有和维生素C相同的生理活性。脱氢抗坏血酸继续被氧化生成2,3-二酮古洛糖酸完全失去生理活性,反应不可逆。维生素C具有多种生理功能,如能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态,起解毒等作用;可促进胶原蛋白的形成,胶原蛋白可包围癌细胞,从而表现出抗癌作用;促进人体内抗体的生成,增加免疫力;可将胆固醇转化为胆汁酸,使高胆固醇血症患者的胆固醇下降;维生素C在对抗消化性溃疡、协助戒烟、降低血铅水平、预防或减轻疾病及预防女性胆结石等方面也具有重要功效;在生理条件下,维生素C参与了机体内正常代谢而产生的自由基的泯灭。维生素C也是畜禽日粮中不可缺少的重要的维生素之一,并且在生产实践中也有应用。维生素C易被光及空气氧化,微量金属离子(铜、铁等)可加速其氧化,实验操作要迅速。维生素C在酸性溶液中比在碱性溶液中稳定,实验在酸性条件下进行。维生素C广泛分布于动物界和植物界,仅几种脊椎动物(人类和其他灵长类、豚鼠、一些鸟类和某些鱼类)不能合成,这些动物体的肝脏中缺乏L-古洛糖酸-γ-内酯氧化酶。所有绿色植物都能合成维生素C,新鲜水果和蔬菜中含量丰富,是重要的维生素C源。测定蔬菜中维生素C含量的常用方法有2,6-二氯酚靛酚法、碘量法、2,4-二硝基苯肼法、分光光度法、间接光度法、荧光分析法、紫外光度法、光电比浊法、高效液相色谱法等。这些方法各有特点,依据不同的实验材料和要求选择不同的测定方法。1材料和方法1.1维生素c试验材料:邢台市产的黄瓜(Cucumber);白萝卜(Bailuobu);冬瓜(Fatmelon)和土豆(Solanumtuberosum)。试剂:1%草酸溶液;维生素C标准溶液(浓度为1mg/mL,即CVC=0.00568mol/L);1%淀粉溶液;0.01055762mol/L碘标准溶液(I2见光易分解或配置碘溶液时未能将其完全溶解都会使碘溶液的浓度发生变化,所以在每次滴定样品之前,都应先用标准维生素C溶液重新标定碘溶液的浓度)。1.2主体材料的滴定碘量法。原理:维生素C是强还原性物质,其分子中的二烯醇基可被I2氧化成二酮基。利用其还原性,以I2做氧化剂,用淀粉作指示剂,采用I2作标准溶液进行滴定。其滴定原理:当维生素C被I2完全氧化后,则碘与淀粉指示剂作用,使溶液变蓝,当滴定到溶液出现蓝色且15s内不褪色为终点。2结果与分析2.1u3000i2溶液体积测定分别准确吸取抗坏血酸标准溶液(1mg/mL)5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100mL,稀释至100mL,各取10mL,加入1%草酸溶液20mL和1%淀粉溶液1mL,用已标定的I2溶液进行滴定,记录所消耗的I2溶液的体积,滴定3次,取平均值,并扣去空白值(表1)。根据维生素C标准溶液浓度与所消耗的碘溶液的体积线性回归(图1)。线性回归方程得y=1.0181x-0.0693,R2=0.9986(n=11),结果表明,用碘量法测定维生素C的含量在5~100mg的范围内呈良好的线性关系,符合线性回归方程。2.2抽滤单元的制备将新鲜的样品洗净、沥干,准确称取可食用部分10g于研钵中,加入1%的草酸溶液10mL,充分研磨成糊状,确保维生素C最大程度的溶于提取液中,然后转入抽滤装置中抽滤,用1%草酸溶液冲洗研钵并转入抽滤装置中。并将抽滤瓶用1%草酸冲洗。2次冲洗共用草酸40mL。每种样品做3份滤液。有色样品提取液的颜色影响滴定终点的观察,可用活性炭或白陶土脱色。如果提取物泡沫较多,可加数滴丁醇。2.3维生素c含量取1份滤液,加入1%淀粉溶液1mL,用已标定的碘溶液进行滴定,记录所消耗的碘溶液的体积V,并扣除空白值。每份样品重复上述操作。根据下列公式计算维生素C的含量,100g样品中维生素C的毫克数(R),见表2。式中,Mvc=176.13;V=消耗I2的体积;标准碘溶液浓度(C12)=0.01055762mol/L。由表2看出,4种蔬菜中白萝卜中维生素C含量最丰富,冬瓜中维生素C含量较多,黄瓜中维生素C含量的最少。2.4维生素c回收率测定方法精确称取10g已知含量的样品3份,用研钵充分研碎成糊状,加入1%草酸溶液10mL,然后转入抽滤装置中抽滤,用1%草酸冲洗研钵,转入锥形瓶内,抽滤瓶也用1%草酸冲洗。两次冲洗共用草酸40mL。每种样品重复上述过程3次,每种样品得3份滤液。每份加入10mL维生素C标准液,即含10mg维生素C,测定所消耗的已标定的I2的体积,计算维生素C的回收率,见表3及表4。式中,A:加入纯维生素C后测得的总量;B:样品中所含维生素C的量;C:加入纯维生素C的量。由表4可以看出,平均回收率为104.5%,说明碘量法测得维生素C含量具有较高的准确性。3维生素c含量碘量法对4种蔬菜维生素C含量进行测定,4种蔬菜中,白萝卜中维生素C含量最高,为22.50mg/100g,黄瓜中最低为10.60mg/100g。同时采用2,6-二氯酚靛酚法对4种蔬菜中维生素C含量进行了测定,结果为:黄瓜10.04mg/100g,白萝卜21.62mg/100g,冬瓜14.84mg/100g,土豆11.86mg/100g。两种方法测定的结果接近。了解4种蔬菜维生素C含量,对日常膳食获取维生素C提供理论依据。植物体内的维生素C往