麻黄中总黄酮和多糖的超声提取与含量测定

1、    麻黄中总黄酮和多糖的超声提取与含量测定【关键词】 超声技术；,麻黄；,总黄酮；,多糖；,提取；,含量测定摘要：目的：从麻黄中提取总黄酮和多糖，并测定其含量。 方法 ：运用超声技术提取麻黄总黄酮和多糖，用比色法测定总黄酮和多糖含量。结果：测得麻黄中总黄酮含量为6.64%，平均回收率为100.6%，相对标准偏差(RSD)为1.34%(n=5)；多糖含量为4.83%，平均回收率为99.58%，相对标准偏差(RSD)为1.02%(n=5)。结论：运用超声技术从麻黄中联合提取总黄酮和多糖，反应速度加快，提高了提取效率。关键词：超声技术； 麻黄； 总黄酮；

2、多糖； 提取； 含量测定Ultrasonic Extraction and Determination of Total Flavonoids and Polysaccharides in Ephedra sinicaAbstract:Objective:To extract and determine total flavonoids and polysaccharides in Ephedra sinica.Methods:Total flavonoids and polysaccharides in Ephedra sinica were extracted by ultrasonic

3、technology and determined by colorimetry;Results:Total flavonoids in Ephedra sinica was 6.64%,and recovery rate was 100.6%,RSD was 1.34%(n=5)；Polysaccharides in Ephedra sinica was 4.83%,and recovery rate was 99.58%,RSD was 1.02%(n=5).Conclusion:Ultrasonic techology is applied to extracting total fla

4、vonoids and polysaccharides in Ephedra sinica,the reaction speed is faster and the result is satisfactory.Key words:Ultrasonic technology; Ephedra sinica; Total flavonoids; Polysaccharide; Extraction; Determination麻黄为麻黄种植物草麻黄Ephedra sinica Stapf、中麻黄Ephedra intermedia Schrenket C.A.Meg.或木贼麻黄Ephedra e

5、quisetina Bge.的干燥草质茎，是临床常用的发汗解表药。其性温,味辛、微苦，具有发汗散寒、宣肺平喘、利水消肿之功效，主要用于风寒感冒、胸闷喘咳、风水浮肿、支气管哮喘等症1。据报道麻黄水溶性多糖具有清除O-2的作用2。超声技术的 应用 ，近年来得到很大 发展 。超声具有穿透力强、选择性高等特点。超声技术可以大大加快反应速度，缩短反应时间3。超声技术应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率4。我们运用超声技术联合提取麻黄中总黄酮和多糖，以芦丁为对照品测定麻黄中总黄酮含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成配合物在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。运用超声技术水提醇沉法制

6、得麻黄粗多糖，并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定5。反应速度加快，实验结果令人满意，为麻黄总黄酮和多糖的 研究 和开发利用奠定了基础。1 仪器、样品及试剂-2401型分光光度计(日本岛津)，DL-360超声波仪(35kHz,浙江宁波市象山县石浦海天 电子 仪器厂)。对照品芦丁购自 中国 药品生物制品检定所，其余试剂均为 分析 纯。麻黄购自石河子中药店，粉碎后备用。2 方法与结果ml-1标准葡萄糖溶液备用。2.3.2 5%苯酚试剂的配制取苯酚100 ，加铝片0.1 和NaHCO3 0.05 ，蒸馏。收集182馏份，称取7.5 ，加水150 l溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。2.3.3 标准曲线

7、制备精密量取100.0 gml-1标准葡萄糖溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7 l置于干燥试管中，分别加水使成1.0 ml，再分别加入5%苯酚溶液1.6 ml，摇匀，然后加浓H2SO47.0 ml，充分摇匀，室温放置25 min，在490 nm处测定其最大吸收度，同时做一空白。结果浓度在10.0575.56 gml-1范围内呈线形关系,实验数据做回归处理得回归方程:=0.069 1+0.003,=0.999 05。2.3.4 换算因素测定麻黄粉碎后，称取100 ，置于锥形瓶中，依次用250 ml石油醚(6090)、乙醚和80%乙醇超声提取两次，反应时间40 min。减压

8、抽滤，残渣挥干溶剂后，继续以水超声提取两次，40 min/次。减压过滤，合并滤液。将滤液减压浓缩至一半体积，加入0.1%活性炭，脱色两次，过滤，滤液加5倍量95%乙醇，放置过夜，抽滤后的沉淀以100 ml水溶解重复醇沉1次。过滤，残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，60干燥，即得麻黄多糖。精确称取60干燥恒重的麻黄多糖20.00 mg，水溶解后定容到100 ml容量瓶中，摇匀，做为多糖储备液。精确量取多糖储备液0.2 ml，加水至1 ml，按测定标准曲线同样的 方法 测其吸收度。按下式 计算 换算因素:=W/CD式中：W为多糖重量(g)，C为多糖液中葡萄糖的浓度(gml-1)，D为多糖的稀释因素。测

9、得=2.865。2.3.5 样品含量测定精确吸取样品液1 ml，按标准曲线制备项下方法测定其吸收度值，按下式计算多糖含量，多糖含量=CDf/W×100(C为样品溶液的葡萄糖的质量，D为样品溶液的稀释倍数，f为换算因素)，结果见表1。2.3.6 稳定性实验用硫酸-苯酚法测定同一样品液在不同时间的吸收度，吸收度值至少在48 h内不变。2.3.7 回收率测定精密称取麻黄适量，加入精制麻黄多糖适量，按样品液制备和多糖含量测定方法操作，测得多糖平均回收率为99.58%，RSD=1.02%(=5)。3 讨论黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多种生理活性6。多糖广泛存在于 自然 界，是多

10、种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性，是理想的免疫增强剂。它能提高机体免疫系统的功能，而对正常细胞没有毒副作用，在抗肿瘤、抗病毒、抗衰老等药物 研究 中，多糖类药物的研制已成为当今世界新药的 发展 方向之一7。我们运用超声技术从麻黄中联合提取出麻黄总黄酮和多糖，并对其含量进行了测定，反应时间缩短。结果显示麻黄中黄酮和多糖含量分别是：6.64，4.83，有较高的开发价值。麻黄黄酮和多糖的结构组成和生理活性有待进一步研究和探讨。 参考  文献 ：1 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中国 药典，部S.广州:广东 科技 出版社,1995：286286.2 张连茹，邹国林，杨天鸣.麻黄水溶性多糖的提取及其清除氧自由基作用的研究J.氨基酸和生物资源，2000，22（3）：2426.3 应崇福.超声学M.北京: 科学 出版社,1990：511511.4 赵 兵,王玉春,欧阳藩,等.超声波在植物提取中的 应用 J.中草药,1999,30(9):458458.5 席先蓉，李寿星.蒲黄