2025年粤教新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.甲是从已免疫的小鼠脾脏细胞中获得的致敏T淋巴细胞B.①表示将骨髓瘤细胞去核后进行细胞融合C.乙为融合细胞，同时具有细胞甲和骨髓瘤细胞的特性D.②表示筛选能产生特异性抗体的细胞2、某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料，通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为A.小鼠体内只有一种抗体B.小鼠体内只有一种B淋巴细胞C.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞D.可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞3、影印培养法是工程菌筛选的一种常用方法，基本过程是：把长有许多菌落的培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木圆柱（直径略小于培养皿）上，然后把“印章”上的细菌接种到不同的选择性培养基平板上培养，对各皿相同位置上的菌落作对比，就可选出适当的工程菌。图1是将人生长激素基因导入细菌B制造工程菌示意图，影印培养法筛选结果如图2所示，其中数字表示不同的菌落。下列说法错误的是（）

A.培养基甲中必须含有氨苄青霉素B.培养基乙中必须含有四环素C.切割质粒A和人生长激素基因的限制酶必须是同种酶D.继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲中的菌落1和44、动物细胞培养是动物细胞工程常用的技术手段。下列相关叙述正确的是（）A.CO2培养箱中95%的氧气可保证细胞进行正常呼吸B.原代培养的贴壁细胞需经胰蛋白酶处理后再进行传代培养C.传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞发生分化所致D.对杂交瘤细胞进行克隆培养即可获得所需的单克隆抗体5、科学家培育了一种可以生产人血红蛋白的转基因烟草。下列叙述正确的是（）A.要获得该转基因烟草，首先要从人的成熟红细胞内获取目的基因B.人血红蛋白基因导入烟草细胞可采用农杆菌转化法C.PCR不能用于鉴定受体细胞中是否转入了目的基因D.该基因转到烟草染色体上使烟草发生染色体畸变评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)6、大肠杆菌的质粒常被用来做基因工程中的载体，这与它的哪项优点有关()A.具有黏性末端B.分子呈环状，便于限制酶切割C.对宿主细胞的生存没有决定性作用D.分子小，能自主复制，有标记基因7、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充8、将单克隆抗体与前体药物的专一性活化酶藕联（简称抗体导向酶偶联）是特异性治疗肿瘤并减少对正常细胞伤害的最新研究方向。碱性磷酸酶是抗肿瘤药物多柔比星前体的专一性活化酶，医学研究中利用抗体导向酶偶联机理将碱性磷酸酶与单克隆抗体制成“生物导弹”，通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤，进而抑制以DNA为模板进行的生理活动，达到治疗肿瘤的目的。下列说法正确的是（）A.为获得单克隆抗体应首先给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，得到能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程C.生物导弹综合利用了碱性磷酸酶的定向制导作用和单克隆抗体的特异性杀伤能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的细胞9、抗菌肽又名多肽抗生素，广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内，具有广谱抗菌活性。其作用原理是在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽对癌细胞甚至感染了病毒的宿主细胞均具有杀伤作用。下列相关叙述正确的是（）A.从免疫调节的方式分析，抗菌肽参与特异性免疫过程B.抗菌肽改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡C.利用转基因技术生产抗菌肽时，常选用大肠杆菌作为受体菌D.对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路10、据统计，从20世纪90年代至今，全世界包括基因制药在内的生物技术药物的销售额以年均30%的速度增长，生物制药已成为21世纪的朝阳产业。下列有关说法正确的是（）A.利用转基因技术还可以进行基因治疗，现在技术已经完全成熟B.对于基因制药，我们应该科学地认识和评估，保障公众的知情权C.由于转基因产品的安全问题，国家应建立相应的评估及预警机制D.我们可以利用转基因工程技术使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)11、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？________12、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。13、_______mol/L浓度下，DNA溶解度最大。14、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。15、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。16、不同国家的政府对待生殖性克隆人的态度是不同的｡我们认同我国政府对待生殖性克隆人研究的态度吗？为什么？_____。17、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、实验题(共3题，共27分)18、物质W是一种含氮有机物；会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回答下列问题。

（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。

（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。

（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌；使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________；三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明___________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。19、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。20、微生物因具有体积小；易培养，繁殖快，且自身遗传物质结构简单，经人工处理或自然突变可获得新性状等特点，在发酵工程中应用广泛。回答下列问题：

(1)大肠杆菌是发酵工程中应用较为广泛的菌种之一。培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至____性，再利用_________________法灭菌后进行接种。

(2)在发酵工程中，常常需要对菌种数目进行统计。相对真菌来说，细菌的体积较小，因此对细菌数目进行统计时，适合使用_________________（填“细菌计数板”或“血细胞计数板”）进行计数，且统计的细菌数目往往比实际活菌数目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工处理或自然突变往往会使菌种成为营养缺陷型菌株；现欲设计实验证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，可获得组氨酸缺陷型突变菌株，请简单描述实验思路并预计实验结果：

实验思路：_____________________________；

实验结果：_____________________________。评卷人得分五、综合题(共2题，共16分)21、世界卫生组织解释克隆为“遗传上同一的机体或细胞系（株）的无性繁殖”。相对于植物克隆而言；动物尤其是高等动物的克隆比较困难，下图表示哺乳动物克隆的几种方法的主要步骤，据图回答下列问题。

（1）方法2获得的小牛的遗传物质来源于________，方法3中得到的胚①、②中的遗传物质是否完全相同？________。

（2）细胞B取自囊胚的________细胞，具有全能性；细胞C应取自供体3的________细胞。

（3）细胞A、B、C在进行D过程之前需要进行细胞体外培养，培养时需要满足的条件是____________________________________________________________________。

（4）克隆也可以理解为复制、拷贝，结合世界卫生组织的定义，你认为还有哪些现代生物技术也属于克隆？________________________________________________________________。

（5）你是否支持进行胚胎干细胞的研究；为什么？

_________________________________________________________________22、医学界对于人类衰老的研究大多围绕人体内在功能性衰退展开。某研究团队发现当T淋巴细胞的数目减少和功能减退时；体内积累的炎症会让动物未老先衰，出现各种“老年病”。这一成果表明T淋巴细胞在动物衰老进程中具有重要作用。请回答问题：

(1)T淋巴细胞起源于____________细胞，在____________中分化发育成熟，在____________免疫中起重要作用。

(2)科学家提出可利用人体细胞培养出T淋巴细胞；再通过向人体内适当输入T淋巴细胞来延缓衰老。他们参考多利羊的培养过程，设计了以下流程图：

图中A表示___________细胞。要把重组细胞培养成为早期胚胎，需要利用B技术诱导，B技术是指___________。培养液中除各种营养成分外，还需添加___________等天然成分。

从早期胚胎中可以获得___________细胞，可以利用它定向诱导成为T淋巴细胞，诱导的实质是发生了___________。

(3)若要改变重组细胞的遗传特性，可以通过基因工程技术外源导入目的基因，该技术的核心是___________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

1；单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

2；题中①表示细胞融合；②表示筛选过程。

【详解】

A；甲是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞；A错误；

B；①是完整骨髓瘤细胞与免疫的B淋巴细胞融合的过程；B错误；

C；融合细胞不一定同时具有细胞甲和骨髓瘤细胞的特性；也可能是瘤瘤细胞或B细胞，C错误；

D；②是经筛选获得的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞；D正确。

故选D。2、D【分析】【分析】

【详解】

A；根据题干信息“小鼠生活过程中被多种病原体感染过”；由于一种抗体只能与一种抗原发生特异性结合，则小鼠体内产生多种抗体，故A错误；

B；每种抗体由相应的效应B细胞产生；所以小鼠体内有多种效应B细胞，故B错误；

C；B淋巴细胞与骨髓瘤细胞如两两融合；产生三种杂交细胞，即B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞，故C错误；

D；通过抗体检测阳性筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞；再进行体外或体内培养，提取大量的单克隆抗体，故D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

图1表示将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的过程。质粒A上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因；构建基因表达载体后，破环了质粒A的四环素抗性基因，但氨苄青霉素抗性基因正常，所以导入重组质粒或普通质粒的细菌都能抗氨苄青霉素，但导入重组质粒的细菌不能抗四环素。

【详解】

A；重组质粒时抗氨苄青霉素基因未破坏；而抗四环素基因被破坏。因此可在培养细菌B的培养基中加入氨苄青霉素，若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落，表明该细菌已经导入了外源质粒，故培养基甲中必须含有氨苄青霉素，A正确；

B；在甲培养基（氨苄青霉素）上观察到大量的细菌B的菌落；表明该细菌已经导入了外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因，重组质粒中四环素抗性基因插入了目的基因，不能表达，细菌对四环素无抗性，故培养基乙必须含四环素，用来说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒，起到筛选作用。

C；质粒作为载体必须具备标记基因；所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，为了避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可以使用不同的限制酶来切割，C错误；

D；在甲培养基（氨苄青霉素）上能生长的是导入重组质粒的细菌和导入普通质粒的细菌；能在培养基乙上生长的是导入普通质粒A的细菌，重组质粒不能生长。培养基甲和乙对比，消失的是菌落1和4，故继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲中的菌落1和4，D正确。

故选D。

【点睛】4、B【分析】【分析】

动物细胞培养的条件。

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；定期更换培养液；以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）适宜的温度和pH。

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A、CO2培养箱中的混合气体是95%的空气和5%的CO2（维持pH）；A错误；

B；原代培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制；从而保证细胞的增殖过程，B正确；

C；正常细胞的细胞分裂次数是有限的；据此可知，传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞衰老或遗传物质发生改变所致，C错误；

D；对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测；将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞再在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中获得所需的单克隆抗体，D错误。

故选B。5、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤目的基因的获取:方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。目的基因的检测与鉴定∶分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；人的细胞都含有控制血红蛋白合成的基因；故要获得该转基因烟草，不一定要从人的成熟红细胞内获取目的基因，A错误；

B；为使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达；应将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，再采用农杆菌转化法使目的基因插入到烟草细胞中的染色体DNA上，B正确；

C；鉴定筛选时；通过PCR技术可以检测目的基因是否插入了受体细胞染色体DNA上，也可以检测目的基因是否转录出了mRNA，C错误；

D；该基因转到烟草染色体上；使控制不同性状的基因重新组合，属于基因重组，D错误。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)6、C:D【分析】【分析】

1；作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）；以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来；

2；大肠杆菌的质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

【详解】

A；质粒是一种独立于细菌拟核外的环状DNA分子；没有切割时不含具有黏性末端，A错误；

B；基因工程的运载体必须要有一个或多个限制酶切点；便于与目的基因连接形成重组DNA分子，B错误；

C；质粒对宿主细胞的生存没有决定性作用；C正确；

D；作为载体的质粒分子小；能自主复制，且常含有抗生素抗性基因，可以作为标记基因，对重组后重组子进行筛选，D正确。

故选CD。

【点睛】7、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】8、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体制备过程中；需要给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，刺激小鼠产生体液免疫，才能得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；

B；制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程；第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；生物导弹综合利用了单克隆抗体的定向制导作用和碱性磷酸酶的特异性杀伤能力；C错误；

D；根据题干信息“通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤；进而抑制以DNA为模板进行的生理活动”，说明多柔比星还可以抑制细胞的转录过程，而不增殖的细胞也具有转录过程，D错误。

故选AB。9、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一样；具有繁殖、遗传、变异、进化的特点，病毒是一种体积非常微小，结构极其简单的生物，仅由蛋白质外壳和内部的遗传物质组成，没有细胞结构。不能独立生活，只能寄生在活细胞内，并在寄主细胞内进行繁殖。一旦离开了活细胞，病毒就无法生存，就会变成结晶体。

2；真菌较细菌作为受体细胞的优势是真菌为真核微生物；含有内质网和高尔基体可对蛋白进行加工和修饰。

【详解】

A；通过题干信息可知；抗菌肽具有广谱抗菌活性，抗菌肽不参与特异性免疫过程，A错误；

B；根据题干信息；抗菌肽“在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细胞死亡”，即改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡，B正确；

C；抗菌肽“是广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内的抗菌活性物质”；即来源于真核细胞，如利用转基因技术提高抗菌肽的产量，但最好选择真菌作为受体菌，因为真菌是真核细胞，繁殖速度快，遗传物质少，C错误；

D；根据题干信息；“某些抗菌肽对癌细胞甚至病毒等均具有强有力的杀伤作用”，则对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路，D正确。

故选BD。

【点睛】10、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物中基因来源是药用蛋白基因和乳腺组织特异性表达的启动子；成果是乳腺生物反应器。基因治疗是把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，目前还处于初期的临床试验阶段。转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因技术可以进行基因治疗；但现在技术还不成熟，A错误；

B；由于人们对基因药物持不同观点；所以应科学地认识和评估，保障公众的知情权，B正确；

C；转基因生物的安全性包括食物安全、生物安全和环境安全问题；国家应该设立多环节、严谨的安全性评价机制，C正确；

D；利用转基因工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”；如有人将α-抗胰蛋白酶基因转到羊体内生产α-抗胰蛋白酶，D正确；

故选BCD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)11、略

【解析】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快挥发12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－213、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】0．1414、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。16、略

【分析】【详解】

对待生殖性克隆人的研究，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。【解析】认同。因为生殖性克隆（也就是克隆人），违反人类繁衍的自然法则，损害人类作为自然人的尊严，会引起严重的道德、伦理、社会和法律问题。所以，现阶段生殖性克隆绝对不可以应用于人类本身。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、实验题(共3题，共27分)18、略

【分析】【分析】

筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学；物理因素的抗性而设计的；能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。

【详解】

（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌；而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。

（2）研究小组的目标菌；是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。

（3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源；故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲；乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。

（4）①C处作为空白对照；要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同；②培养基中的透明圈表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A；B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。

【点睛】

本题考查筛选培养基的配置和使用，针对不同要求的目标菌种，选择不同物质配制不同筛选作用的培养基。并且要求学生理解识别目标菌种筛选的现象，判断筛选结果。【解析】①.W②.乙③.乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W④.将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源⑤.缓冲液⑥.缓冲液不能降解W⑦.酶E与天然酶降解W的能力相近19、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染20、略

【分析】【分析】

1；利用显微镜进行直接计数；也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。

2；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。湿热灭菌：高压蒸汽灭菌（压力为100kPa、温度为121℃、15~30min）；干热灭菌：160~170℃热空气维持2~3h。耐高温的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金属用具等；灼烧灭菌：接种工具。接种过程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位。

【详解】

（1）大肠杆菌是细菌；培养培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至中性或弱碱性，对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（2）细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚；常用于相对较大的酵母菌细胞；霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。该方法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，所以统计的细菌数目往往比实际活菌数目多。

（3）本实验为了证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后；可获得组氨酸缺陷型突变菌株，可将野生型大肠杆菌经紫外线照射后接种于不含组氨酸的完全培养基上，适宜条件下培养一段时间后观察大肠杆菌是否生长，如果在培养基上无大肠杆菌生长，说明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，获得了组氨酸缺陷型突变菌株。具体实验思路及结果如下：

实验思路：使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上；标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为乙组；将未接种的不含组氨酸的完全培养基标记为丙组；将甲；乙、丙组培养基放于相同且适宜的环境中培养，一段时间后观察并统计培养基上的菌落数。

实验结果：乙组培养基出现较多菌落；甲组培养基没有出现菌落或出现菌落、但菌落数少于乙组；丙组培养基无菌落。【解析】(1)中性或弱碱高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）

(2)细菌计数板多。

(3)使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接