农产品中农药残留的测定课件

农产品中农药残留的测定农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）农药研究分析，高人云集杭州，出自浙江国家环保局南京环境科学研究所——蔡道基院士中国农科院茶叶科学研究所——陈宗懋研究员浙江农业大学植保系环境毒理研究所——樊德方、刘乾开教授浙江省农科院——叶兴祥、于志光研究员中国农科院水稻研究所——梁天锡研究员浙江大学环资学院副院长——刘维屏教授副院长——朱利中教授副院长——徐建明教授浙江大学农学院植保系——朱国念教授中国农科院副院长——王运浩研究员安徽农业大学副校长——岳永德教授吉林农大食品系分析中心主任——范志先教授浙江省现在的几家从事农残检测的部门（杭州市）农业部农产品质量监督检验测试检中心（杭州）农业部农药质量与残留检测中心（杭州）农业部稻米及制品质量监督检验测中心农业部茶叶质量监督检验测试中心中国农科院茶叶研究所浙江省出入境检验检疫局浙江省技术监督局中国土畜产浙江茶叶进出口公司农药残留测定面临的挑战农药的多残留分析

———一个样品中要求检测40-80种不同的农药残留组份快速

———尽量缩短分析时间，快速告知检测结果灵敏度高

———随着国内外“食品安全性”检测标准的提高，要求的检测限愈来愈低，要求检测仪器及方法有足够高的灵敏度。准确度

———要求方法的准确度能符合标准的要求检测实例样品名称：乌龙茶，普洱茶样品编号：2002-F-357-358背景材料2002年5月底，广州某单位一批出口茶叶，依照日本客户要求检测有机氯，有机磷及菊酯类共33种农残组份，由农业部介绍，承担该项任务。农残检测中的几个基本概念灵敏度准确度精确度最低检测量CCTB/T5009.1-1996）

最小检出量（ng）×样本 溶液定容体积（ml）最低的检出浓度（mg/kg）＝样本溶液进样体积（ul）×称样重量（g）色谱仪最低响应值为S=3N准确度-回收率测得的试样中农药残留量与试样中实际含量的符合度在农药残留量检测工作中待测试样中农药残留量真实值是未知的，因此，无法判断所采用方法的准确度，通常采用模拟的方法，在空白样本中添加一定量的待测农药标准样品，制成已知含量的样本，然后按拟定的方法对样本进行提取、净化和测定，所得到的实测值与已知值比较，实测值对已知值的百分率即为方法添加回收率。它是衡量农药残留量检测方法准确度的重要指标。添加回收率应以接近100％为最佳，但是，由于试样种类和农药品种多，以及杂质干扰、操作误差等原因，则要求添加回收率为70－110％，平均回收率＞80％，即符合要求。精密度－变异系数同一种检测方法对同一组试样进行多次重复测定，其测定结果之间的偏差程度即为方法的精确度或精密度。不同添加回收率浓度范围，要求允许变异系数大致如下：添加浓度（mg/kg)变异系数1-1010-250.1-125-500.01-0.150-1000.001-0.01100-2001、茶叶2、水果3、甘蓝类蔬菜4、茄果类蔬菜5、白菜类蔬菜7、稻米浙江省绿色农产品认定产品安全性检测收费标准浙江水产品上海推荐会和绿色产品检测项目农业部农产品监督检验测试中心（杭州）兽药检测项目磺胺甲恶唑、甲氧苄啶、磺胺嘧啶、已烯雌酚、甲睾酮、氯霉素、链霉素、庆大霉素、甲砜霉素、土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、磺胺嘧啶、诺氟沙星、盐酸克伦特罗、呋喃唑酮、伊维菌素、喹乙醇2002年8-9月农业部“省会城市-杭州市蔬菜定点有机磷农药残留和硝酸盐污染情况监督抽查”总经费：16万总样品数：约200个抽样：基地、批发市场、农贸市场有机磷品种：敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、乐果、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷本实验室完成情况1、采用方法：美国加州食品农业部农药多残留快速扫描方法（MRSM）2、方法概述：

30克样品于250ml锥形瓶中，加入50ml乙腈（视样品量加适量水），匀浆机中高速匀浆2分钟。布氏漏斗抽滤

100ml具塞量筒内放入5-7.5克NaCl,倒人滤液，盖上塞子，剧烈震荡1分钟，在室温下静置约10分钟，分层。取出25ml于平底烧瓶中，旋转浓缩蒸发器上浓缩近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800气相色谱PFPD测定30克样品于250ml锥形瓶中，加入50ml乙腈（视样品量加适量水），匀浆机中高速匀浆2分钟。布氏漏斗抽滤。100ml具塞量筒内放入5-7.5克NaC1，倒入滤液，盖上塞子，剧烈振荡1分钟，在室温下静置约10分钟，分层。取出25ml于平底烧瓶中，旋转浓缩蒸发器上浓缩近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800气相色谱PFPD测定仪器配置

1.瓦里安CP3800全气路电子流量控制独立三通道的气相色谱仪2.2个1177分流/不分流毛细柱进样口3.1个1079程序升温PTV进样口4.脉冲火焰光度检测器PFPD5.电子捕俘检测器ECD6.氮磷检测器TSD7.CP841021位自动进样器8.化学工作站回收率说明：敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、乐果、毒死蜱，马拉硫磷、对硫磷、9个有机磷农残混合标样PFPD测定结果，标样浓度0.1－0.2ppm说明：上述9种有机磷农残标样（0.1-0.2ppm），加入黄瓜基质中，PFPD的测定结果。（样品编号：1050-1）说明：浓度为0.1-0.2ppm的敌敌畏，甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、乐果、毒死蜱，马拉硫磷、对硫磷等9种农残标样加入黄瓜基质中后PFPD测定结果。样品编号：1111-1色谱柱型号

VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umSPB-608:30mx0.25mmIDx0.25umSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25um程序升温TRateHoldTotal(C0)(ml/min)(min)(min)801.001.0013050.02.004.0018050.03.008.002205.08.0024.0026020.04.0030.00国家标准与国际组织和部分国家、地区标准比较2003年蔬菜农药残留定点监测1.抽检时间：1、4、7、9、11月2.抽检项目：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、毒死蜱、对硫磷、甲基对硫磷、克百威、抗蚜威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰酯3.抽检地点：杭州市集贸市场及主要蔬菜生产基地采用方法1。NY/T448-2001“蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法”2。有机磷、氨基甲酸酯农药残留按GB/T5009.20方法规定的程序进行操作。3。拟除虫菊酯类农药残留按GB/T14929.4方法规定的程序进行操作。用农残快速测定仪进行快速筛选，再用气相色谱方法进行分析有机磷、氨基甲酸酯农药快速检测原理有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，用在对农药残留的检测中。加入反应试剂后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化值，计算出抑制率，判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。即乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药——酶活性被抑制活性被抑制样本中含有机磷或氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酯酶+样本提取液活性正常，中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药如以乙酰硫代胆碱（AsCh)为底物，在乙酰胆碱酯酶（AChE)的作用下乙酰硫代胆碱（AsCh)水解成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱和二硫双对硝基苯甲酸（DTNB）产生显色反应，使反应液呈黄色，在分光光度计410nm处有最大吸收峰，用分光光度计可测得酶活性被抑制程度。（用抑制率表示）优点：快速缺点：不够灵敏农药残留快速检测最低检出浓度国家标准与国际组织和部分国家标准比较表注：如果没有限量值，参见CAC标准。其它蔬菜按最低限量值判定。检测条件VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umTSDSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25umPFPD自动进样器：8410甲胺磷检出样品的确证TSD：11只TSD-MSD2/11=18.2%TSD-PFPD3 只TSD-PFPD-MSD2/3=66.7%StagesofPFPDOperationPFPDEmissionReactions:SandPvs.HydrocarbonsHCemission(gatedat1-3ms)OH*+C2

®CH*+CO

Sulfuremission(gatedat6-26ms)H+H+S2

®S2*+H2S+S®S2*(second-orderorquadraticresponse)Phosphorusemission(gatedat4-14ms)H+PO®HPO*(firstorderorlinearresponse)PFPDSelectivitybyEmissionDelay(Gating)HydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionoftimeSemissionoccurs6msafterignitionandlastsover20ms,whereasHCrelatedemissionoccursquicklyandisoverwithin4msPFPDSelectivitybyWavelength(Filters)Hydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionofwavelength.

VarianPFPDusesa340-460nmfilter.SulfurComponentsinDieselFuel1077Injector,200:1Split,1µLinjection,DB-1,30m,0.32mmID,1µmdf,HeCarrierGasat50cm/secat230°C,Detector:200°C,Range10,Attn400PFPDFPD样品：普洱茶，正已烷提取检测器：ECD分析方法的质量控制1、分析方法必须经过认可或周密的验证。2、分析程序作出明确的规定，经考核核准的人员才能进行分析、测试，分析结果计算和记录、校核等工作。3、使用质量控制样品。包括经用有证标准物质或其它国际上公认的标准物质校准的实验室参考物质。推荐以下几种质量控制样品：a.不含有待测物质的空白样品b.待测物含量等于最高残留限量或略大于检测限或分析方法测定低限的实际样品。c.待测物含量高于最高残留限量或高检测限或分析方法测定低限的实际样品4、每一次测试应同时检测质量控制样品，包括上述的a.b.c三个样品，在条件不允许的情况下，可以只包括a.b样或a.c样品。5、用添加样品检查回收率、响应线性和制作校正曲线。6、主要仪器设备，应能满足检测方法的要求，并要经常进行校准和维护。7、计算结果必须详细说明，其结果必须符合统计分析的质量要求。农药残留实验室规范农药残留量检测是较复杂的检测技术。由于待测样本中农药含量往往很低，帮要求各检测步骤者应科学、严密，方法灵敏度要高；由于待测农药品种和样本种类多，故需要采用不同的样本前处理和测定方法；由于检测步骤多，流程长，故要求操作人员应具有熟练的技术和丰富的经验。农药残留量检测工作特点决定了农药残留实验室的特点：具在较丰富经验和较高技术水平的专家；具有先进的检测仪器和配套设备；具在最大安全性和最小污染机会的条件。技术人员必须是经过严格培训的分析化学家，不但要有该领域的专业知识，还要具有能胜任该项工作的技能和经验，经考核合格。1.明确采用的检测方法原理及进行每一