GB/T 18643-2021鸡马立克氏病诊断技术

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T18643—2021

代替

GB/T18643—2002

鸡马立克氏病诊断技术

DianostictechniuesforMareksdisease

gq’

2021-04-30发布2021-11-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T18643—2021

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范围

1………………………1

缩略语

2……………………1

临床诊断

3…………………1

病毒分离

4…………………3

琼脂免疫扩散试验检测

5…………………4

检测

6PCR…………………6

荧光定量检测

7PCR(q-PCR)……………7

综合判定

8…………………8

附录规范性附录病毒分离用溶液配制

A()……………9

附录规范性附录琼脂免疫扩散试验用溶液配制

B()…………………11

附录规范性附录检测用引物反应条件及溶液配制

C()PCR、………12

附录规范性附录检测用引物探针和反应条件

D()q-PCR、…………15

GB/T18643—2021

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准代替鸡马立克氏病诊断技术本标准与相比主

GB/T18643—2002《》。GB/T18643—2002

要技术变化如下

:

修改了鉴别诊断部分的描述见年版的

———(3.4,20023.4);

增加了病毒分离检测方法见第章附录

———(4,A);

增加了检测方法见第章附录

———PCR(6,B);

增加了荧光定量检测方法见第章附录

———PCR(7,C)。

本标准的修订参考了陆生动物诊断实验和疫苗标准手册版并结合国内外技术研究

OIE《》(2017),

新成果与国际先进技术保持一致

,。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任

。。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心

:、。

本标准主要起草人刘长军龚振华张艳萍路平王笑梅李阳高玉龙祁小乐李凯王志亮

:、、、、、、、、、。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为

:

———GB/T18643—2002。

Ⅰ

GB/T18643—2021

引言

鸡马立克氏病是一种鸡的高度传染性以淋巴细胞增生为特征的肿瘤性疾

(Marek’sdisease,MD)、

病由鸡疱疹病毒型即鸡马立克氏病病毒

,2(Gallidherpesvirus2,GaHV-2),(Marek’sdiseasevirus,

引起一般发生于周龄以上的禽只多发生于周龄周龄可引起多种严重的

MDV)。MD3,12~30。MD

病症其中淋巴组织增生是最常见也是最重要的一种经典型主要侵害神经组织死亡率很少超

,。MD,

过可持续数周至数月急性型可使发病鸡内脏器官产生淋巴瘤发病率一般为

10%~15%,。MD,10%~

暴发流行时发病率可高达死亡率可能在数周内迅速增加然后死亡停止也可能在数月内

30%,70%。,,

保持稳定的死亡率并逐渐下降目前最常见的是产生广泛内脏器官淋巴瘤的急性型

,。,MD。

在临床诊断上容易与鸡的其他肿瘤性疾病禽白血病和禽网状内皮组织

MD,(Avianleukosis,AL)

增生病发生混淆一般需要通过流行病学和病理组织学进行鉴别诊断

(Reticuloendotheliosis,RE),。。

可通过活疫苗免疫预防免疫属于非清除性免疫不能清除病原也不能阻止环境中野毒的

MD,,,MDV

感染和感染鸡排毒由于疫苗普遍应用以及疫苗的自身特点临床上疫苗毒株的接种和野

。MD,,MD

毒株的感染情况复杂需要实验室诊断技术进行确诊

,。

从感染鸡组织中分离可用于该病的检测通常选用从抗凝血样中分离的淋巴细胞肾细胞

MDV。、

或脾细胞悬液作为分离病毒用的材料也可以用羽髓组织浆液作为分离材料细胞悬液或羽髓

,MDV。

组织浆液可接种鸡肾细胞鸭胚成纤维细胞

(Chickenkidneycells,CKC)、(Duckembryofibroblast,

或鸡胚成纤维细胞进行病毒分离应用琼脂免疫扩散试验

DEF)(Chickenembryofibroblast,CEF)。

对羽髓抗原进行血清学检测可以确定感染

(Agargelimmunodiffusion,AGID)MDV,MDV。AGID

是检测抗体最常用的方法然而由于疫苗毒株也可以刺激机体产生相应的抗体抗体的检测对于

,MD,

的临床诊断仅具有参考价值方法可以用于检测

MD。PCR(Polymerasechainreaction,PCR)MDV,

法还可以鉴别血清型野毒株和疫苗毒株

PCRMDVⅠ。

Ⅱ

GB/T18643—2021

鸡马立克氏病诊断技术

1范围

本标准规定了鸡马立克氏病临床诊断以及病毒分离琼脂免疫扩散试验检测和荧光定量

,、、PCR

检测等实验室检测的技术要求和综合判定

PCR。

本标准适用于鸡马立克氏病的检测诊断检疫和流行病学调查等

、、。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

琼脂免疫扩散试验

AGID:(Agargelimmunodiffusion)

禽白血病

AL:(Avianleukosis)

鸡胚成纤维细胞

CEF:(Chickenembryofibroblast)

鸡肾细胞

CKC:(Chickenkidneycells)

鸭胚成纤维细胞

DEF:(Duckembryofibroblast)

致细胞病变效应

CPE:(Cytopathiceffect)

鸭胚成纤维细胞

DEF:(Duckembryofibroblast)

脱氧核糖核酸

DNA:(Deoxyribonucleicacid)

溴化乙锭

EB:(Ethidiumbromide)

胎牛血清

FBS:(Fetalbovineserum)

禽淋巴性白血病

LL:(Lymphoidleukosis)

培养基

M199:M199(M199Medium)

鸡马立克氏病

MD: