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XIAOLIFEIDAO县人民医院同源性

分析标准操作预案方案及程序［键入文档副标题］李生晓梦［选取日期］县人民医院同源性分析标准操作预案方案及程序制定本方案是指当医院发生各类突发意外事件或情况时,各科室能及时采取的行动措施，为了让全体医务人员不断提高处置各种突发事件的水平和能力，熟悉和掌握应急处置的工作程序，建立统一指挥，职责明确、运转有序、反响迅速、处置有力的运行体系，结合我院实际，特制定本方案。一、同源性分析的应用包括感染爆发的判断，感染病原菌确实定及感染源的寻找。二、基本方法1、细菌的表型特征分型技术（如血清型、耐药表型等）。2、基因分型技术（如、PFGE、Rep—PCR、AFLP等）。三、操作步骤（一）表型分型（血清型、耐药表型）1、标本孵育：从患者感染部位采集标本，并接种于相应培养基（培养瓶）中孵育。2、别离菌种：别离病原菌（细菌或真菌），并鉴定细菌（真菌）种类。3、血清分型：如可能那么对同种细菌进行血清分型，如军团菌等。4、药敏试验：根据细菌（真菌）种类选择药敏卡（纸片），进行药敏试验。5、结果分析：分析血清型和药敏谱，如结果相同或药敏相差不大那么提示有同源性。（二）基因分型（PFGE）1、菌栓制备：将细菌悬液与2%低熔点琼脂糖凝胶混合,制备菌栓。2、细菌消化：分别用含溶菌酶和（或）蛋白酶K的裂解液对菌栓进行消化。3、洗涤菌栓：可用无菌水反复清洗或PMSF中和多余的蛋白酶Ko4、酶切：按照各种不同限制性内切酶的说明进行酶切。5、制胶：用PFG巨电泳凝胶模具制备：PF（逼级琼脂糖凝胶。6、电泳：根据不同细菌酶切片段的大小选择适当的脉冲参数，进行电泳。7、凝胶成像：胶块染色后在凝胶成像仪下成像。8、结果分析：根据Tenover等制定的标准对凝胶图像进行分析，判断菌株之间的同源性。四、考前须知1、不同的分型方法，在分型能力、重复性、分辨能力、操作和本钱等方面都不尽相同，可根据情况进行选择。2、表型分型方法的分辨能力普遍比基因分型方法低，但简便、快速，适用于对感染爆发的初筛。3、基因分型方法需要特殊实验器材

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