第三章色谱法在精细化学品分析中的应用课件

第三章色谱法在精细化学品

分析中的应用.第三章色谱法在精细化学品

分析中的应用.13.1概述在纸色谱基础上发展起来的，高效薄层色谱法的产生与应用，使薄层色谱的分离效率显著提高。TLC适用于多种不同性质化合物的分离，反应监控，定性分析GC用于可挥发性、热稳定性好的精细化学品HPLC用于不易气化、热敏性化合物.3.1概述.23.2薄层色谱在精细化学品中的应用3.2.1TCL制备、分析过程载板：涂布薄层用的有玻璃板、铝箔及塑料板薄层制备：1g硅胶HF254+1%CMC水溶液4mL，用涂布器涂布在载体上点样：用毛细管点样，0.3mm和0.5mm展开：选择合适展开剂展开显色：UV、物理法和化学法.3.2薄层色谱在精细化学品中的应用3.2.1TCL制备、33.2.2TLC在合成反应控制及中间体中的应用1、硝基苯还原制备苯胺的TLC分析（P124）.3.2.2TLC在合成反应控制及中间体中的应用1、硝基苯还4..5展开剂，环己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）显色方法：UV，N,N-二甲氨基苯甲醛（Ehrlich试剂）Rf值，为什么苯胺比硝基苯的Rf值小？.展开剂，环己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）.62、反式-α-苯基邻硝基肉桂酸展开剂，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：苯=4.55:2.73:0.91:1.82,含0.12mL36%乙酸碘熏法显色为什么加入乙酸？Perkin反应P124.2、反式-α-苯基邻硝基肉桂酸展开剂，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：7..83、间苯氧基苯甲醛（P125）展开剂，氯仿：石油醚=3：7（V：V）Rf值大小区分确定？.3、间苯氧基苯甲醛（P125）展开剂，氯仿：石油醚=3：79通过薄层色谱图可以看出间苯氧基甲苯逐渐氧化成间苯氧基苯甲醛，随着时间的加长，间苯氧基苯甲酸开始产生。.通过薄层色谱图可以看出间苯氧基甲苯逐渐氧化成间苯氧基苯甲醛，104、二甲基喹啉展开剂：乙醚P125原料苯胺4-氯-2-丁酮.4、二甲基喹啉展开剂：乙醚P125.115、TLC作用监控原料消失，主产物、副产物生成状况有效地控制反应终点及选择适宜的反应条件TLC特点，简便易行，快速、微量灵敏.5、TLC作用监控原料消失，主产物、副产物生成状况.123.2.3TLC在表面活性剂中的应用1、单一类型表面活性剂的TLC分析1）阴离子表面活性剂展开剂，二氯甲烷：甲醇=8：1碘蒸气显色P125.3.2.3TLC在表面活性剂中的应用1、单一类型表面活性剂132）阳离子表面活性剂P126展开剂，二氯甲烷：甲醇：乙酸=8：1：0.75碘熏显色.2）阳离子表面活性剂P126.143）非离子表面活性剂的TLC分析反相硅胶板，硅烷化处理？？展开剂，乙醇：2%四苯基硼酸钠=8：2碘熏显色.3）非离子表面活性剂的TLC分析反相硅胶板，硅烷化处理？？.15TLC分析在中药中的应用薄层色谱指纹图谱在丹参药材质量评价中的应用样品制备随机取10株丹参根部药材洗净，自然风干10d后60℃烘干，粉碎过60目筛水溶性供试液：取待测药材粉末1.0g，2%氨水超声提取60min，提取液于沸水浴中加热45min(冰醋酸调pH至3～4)后过滤．以乙酸乙酯萃取滤液，萃取液用氮气挥干，所得水溶性成分以1.0mL甲醇溶解．脂溶性供试液：取待测药材粉末0.5g，加甲醇／二氯甲烷(8／2，体积比)混合溶液10mL，置具塞试管中超声提取30min后过滤.TLC分析在中药中的应用薄层色谱指纹图谱在丹参药材质量评价中16..173.2.5TLC法在助剂中的应用P130显色剂：0.2%2，6-二氯醌氯亚胺的乙醇溶液.3.2.5TLC法在助剂中的应用P130显色剂：0.183.2.6TLC法在药物及其它产品中的应用布洛芬中应用复方乙酰水杨酸药片中阿司匹林、非那西丁和咖啡因的含量，可采用薄层扫描法测定.3.2.6TLC法在药物及其它产品中的应用布洛芬中应用.193.3HPLC在精细化学品中的应用柱子：全多孔硅胶柱流动相，二氯甲烷：正己烷=1：9检测波长，UV254nm正相？反相色谱？固定相、流动相保留时间相对大小？.3.3HPLC在精细化学品中的应用柱子：全多孔硅胶柱.20..213.3.1HPLC在助剂中的应用1、HPLC在化妆品中防晒剂中应用P108标准溶液配制，防晒剂标准品用流动相（甲醇：THF：水：高氯酸=200：200：160：0.1）标样预处理：超声、过滤、过柱子和萃取等HPLC分析条件选择：柱子型号、流动相、流速、检测器（UV选择波长）线性关系实验回收率测定和重现性考察未知样品测定.3.3.1HPLC在助剂中的应用1、HPLC在化妆品中防晒22P109..23..242、HPLC在化妆品中防腐剂分析中的应用柱子：C18柱流动相：甲醇：乙酸铵（0.02mol/L）=70:30检测器：UV254nm正相？反相体系？保留时间相对大小原因？固定相、流动相特点？P110.2、HPLC在化妆品中防腐剂分析中的应用柱子：C18柱P11253、离子对反相HPLC法的应用分离苯甲酸钠、山梨酸钾等防腐剂离子对试剂：柠檬酸三铵反相柱：C18为什么添加离子对试剂？苯甲酸钠、山梨酸钾等可发生解离，在柱子上保留时间较小，不利于组分的分离。加入离子对试剂后，柠檬酸三铵与样品中的组分分别结合成离子对，增加了各组分的保留时间而获得较好的分离。.3、离子对反相HPLC法的应用分离苯甲酸钠、山梨酸钾等防腐剂264、离子抑制色谱法应用离子型化合物在反相色谱柱上不保留改变流动相的pH值，抑制样品离子的电离主要适用于弱酸性化合物的分离降低流动相的pH值，使样品降低离子化使用硅胶基质C18填料使用条件应在填料基质的范围内硅胶柱的pH在2-8（较保险值3-7）内.4、离子抑制色谱法应用离子型化合物在反相色谱柱上不保留.27下列情况下不能使用离子抑制方法，如果：一些酸在pH低于2时还保持离子化一些碱在pH高于7时还保持离子化可以有以下的选择离子交换色谱使用聚合物或其他耐碱性流动相的反相柱，在pH高于7时用离子抑制法使用“离子对色谱法”.下列情况下不能使用离子抑制方法，如果：.28离子抑制色谱实例而在乙腈/水并且pH=7时，多数组份保留时间很短，无法完全分离。.离子抑制色谱实例而在乙腈/水并且pH=7时，多数组份保留时间295、HPLC在聚合物助剂中的应用P112.5、HPLC在聚合物助剂中的应用P112.303.3.2HPLC在表面活性剂中的应用固定相为烷基硅烷化流动相,甲醇：NaH2PO4（0.015mol/L水溶液）=35：65，pH=3～4分析烷基磺酸用电导检测器分析烷基苯磺酸用UV检测器不同碳数出峰顺序？检测方式？正相？反相？为什么加入NaH2PO4水溶液.3.3.2HPLC在表面活性剂中的应用固定相为烷基硅烷化.313.3.3HPLC在药物中的应用P117固定相，LiChrosorbC18流动相，0.01mol/L醋酸缓冲液（pH4.75）：乙腈=85：15乙酸作用，离子抑制正相？反相？为何用UV检测？.3.3.3HPLC在药物中的应用P117固定相，Li32P118

.P118.333.3.4HPLC在其它精细化学品中的应用间羟基苯甲酸的HPLC分析P123柱子，LiChrosorbC18检测方式，UV正相，反相？保留时间相对大小固定相，流动相流动相，甲醇：水=35：65，高氯酸调pH=2.5？.3.3.4HPLC在其它精细化学品中的应用间羟基苯甲酸的H34在食品研究中的分析应用食品中的天然成分碳水化合物类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂颜料和染料（色素〕维生素污染物霉菌（黄曲霉毒素〕农药和兽药残留多环芳烃（PAHS〕和亚硝酸.在食品研究中的分析应用.35在兽药研究中分析应用在医药研究中分析应用药物分析有USP、BP、CP等标准常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。.在兽药研究中分析应用.36在生物化学和生物工程中的应用氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（儿茶酚胺类)在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析.在生物化学和生物工程中的应用.37在公安、刑警破案工作需要毒品分析等在环境污染分析中的应用废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留、酚类和胺类的检测.在公安、刑警破案工作需要.383.3.5柱前衍生法在HPLC中的应用为什么要柱前衍生？一是由于待测物质在HPLC条件下不能分离，比如用RP-HPLC分离氨基酸，由于氨基酸在极性流动相中解离，不能保留，所以用柱前衍生使其成为弱极性的衍生物，就可以分离了。二是由于待测物质在常用的检测器（比如：UV-VIS）上响应比较弱，用柱前衍生加上发色团，使其产生紫外吸收。.3.3.5柱前衍生法在HPLC中的应用为什么要柱前衍生？.391、用于紫外检测的柱前衍生试剂标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm羧酸类260羧酸类265醇、胺和酚类254.1、用于紫外检测的柱前衍生试剂标记试剂样品类型衍生物检测波长40标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm苯酰氯醇类230对硝基苯甲酰氯醇类254对甲氧基苯甲酰氯胺类254O-对硝基苄基羟胺盐酸盐醛、酮类265.标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm苯酰氯醇类230对硝基苯412、柱前衍生物HPLC在药分中应用胺类（氨基酸、多胺和肽等）抗生素类（新霉素、氨基糖苷、苯巴比妥）羧酸类（胆汁酸）羟基化合物（胆酸）甾族化合物甘氨胆酸牛磺胆酸脱氧胆酸鹅脱氧胆酸.2、柱前衍生物HPLC在药分中应用胺类（氨基酸、多胺和肽等）423.3.6HPLC-MS联用技术的应用特点广泛性检测器，MS几乎可以检测所有的化合物分离能力强，即使色谱没分开，通过MS特征离子峰也能定量定性分析检测限低，MS灵敏度高，10-12g，特别是没有UV吸收的样品，MS可以检测准确的化合物分子量信息未知化合物碎片结构信息一套完整的图谱和多种扫描方式充分提供定性、定量和峰纯度信息可用于无共价键、无官能团的化合物.3.3.6HPLC-MS联用技术的应用特点.43应用药物代谢研究在天然药物中的应用生物大分子分析（肽谱）兴奋剂/毒品检测药物降解产物和不纯物的结构鉴定.应用.443.4GC在精细化学品分析中的应用3.4.1GC在中间体及有机化工原料中的应用1、GC在1，1，2，3-四氯丙烯合成中的应用SE-30玻璃毛细管柱子

P90.3.4GC在精细化学品分析中的应用3.4.1GC在中间体45..462、GC在芳香族中间体中的应用3，5-二叔丁基甲苯粗产品GC图P95固定液15%FFAP（改性聚乙二醇）SE-30固定液，拖尾严重OV-17固定液分离也不好.2、GC在芳香族中间体中的应用3，5-二叔丁基甲苯粗产品GC47..483.4.2GC在表面活性剂中的应用表面活性剂疏水基分布的气相色谱分析P98固定液，丁二酸二乙二醇酯DEGS.3.4.2GC在表面活性剂中的应用表面活性剂疏水基分布的气49油酸：顺十八碳-9-烯酸亚油酸：顺，顺-9，12-十八碳二烯酸.油酸：顺十八碳-9-烯酸.502、表面活性剂的主要成分GC分析SE-30柱子P100.2、表面活性剂的主要成分GC分析SE-30柱子.513.4.3GC在其它精细化学品中的应用山梨酸和苯甲酸的GC分析SE-30柱子碘丁烷衍生成丁酯？.3.4.3GC在其它精细化学品中的应用山梨酸和苯甲酸的GC523.4.4GC-MS联用技术始于20世纪50年代，1965年出现商品化仪器体内药物的分析测定兴奋剂的检测治疗药物监测与药代动力学研究药物代谢研究中药成分的分离鉴定与含量测定药物对映体的拆分药品的质量控制.3.4.4GC-MS联用技术始于20世纪50年代，196553..54第三章色谱法在精细化学品

分析中的应用.第三章色谱法在精细化学品

分析中的应用.553.1概述在纸色谱基础上发展起来的，高效薄层色谱法的产生与应用，使薄层色谱的分离效率显著提高。TLC适用于多种不同性质化合物的分离，反应监控，定性分析GC用于可挥发性、热稳定性好的精细化学品HPLC用于不易气化、热敏性化合物.3.1概述.563.2薄层色谱在精细化学品中的应用3.2.1TCL制备、分析过程载板：涂布薄层用的有玻璃板、铝箔及塑料板薄层制备：1g硅胶HF254+1%CMC水溶液4mL，用涂布器涂布在载体上点样：用毛细管点样，0.3mm和0.5mm展开：选择合适展开剂展开显色：UV、物理法和化学法.3.2薄层色谱在精细化学品中的应用3.2.1TCL制备、573.2.2TLC在合成反应控制及中间体中的应用1、硝基苯还原制备苯胺的TLC分析（P124）.3.2.2TLC在合成反应控制及中间体中的应用1、硝基苯还58..59展开剂，环己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）显色方法：UV，N,N-二甲氨基苯甲醛（Ehrlich试剂）Rf值，为什么苯胺比硝基苯的Rf值小？.展开剂，环己烷：乙酸乙酯=9：2（V：V）.602、反式-α-苯基邻硝基肉桂酸展开剂，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：苯=4.55:2.73:0.91:1.82,含0.12mL36%乙酸碘熏法显色为什么加入乙酸？Perkin反应P124.2、反式-α-苯基邻硝基肉桂酸展开剂，乙醚：乙酸乙酯：甲醇：61..623、间苯氧基苯甲醛（P125）展开剂，氯仿：石油醚=3：7（V：V）Rf值大小区分确定？.3、间苯氧基苯甲醛（P125）展开剂，氯仿：石油醚=3：763通过薄层色谱图可以看出间苯氧基甲苯逐渐氧化成间苯氧基苯甲醛，随着时间的加长，间苯氧基苯甲酸开始产生。.通过薄层色谱图可以看出间苯氧基甲苯逐渐氧化成间苯氧基苯甲醛，644、二甲基喹啉展开剂：乙醚P125原料苯胺4-氯-2-丁酮.4、二甲基喹啉展开剂：乙醚P125.655、TLC作用监控原料消失，主产物、副产物生成状况有效地控制反应终点及选择适宜的反应条件TLC特点，简便易行，快速、微量灵敏.5、TLC作用监控原料消失，主产物、副产物生成状况.663.2.3TLC在表面活性剂中的应用1、单一类型表面活性剂的TLC分析1）阴离子表面活性剂展开剂，二氯甲烷：甲醇=8：1碘蒸气显色P125.3.2.3TLC在表面活性剂中的应用1、单一类型表面活性剂672）阳离子表面活性剂P126展开剂，二氯甲烷：甲醇：乙酸=8：1：0.75碘熏显色.2）阳离子表面活性剂P126.683）非离子表面活性剂的TLC分析反相硅胶板，硅烷化处理？？展开剂，乙醇：2%四苯基硼酸钠=8：2碘熏显色.3）非离子表面活性剂的TLC分析反相硅胶板，硅烷化处理？？.69TLC分析在中药中的应用薄层色谱指纹图谱在丹参药材质量评价中的应用样品制备随机取10株丹参根部药材洗净，自然风干10d后60℃烘干，粉碎过60目筛水溶性供试液：取待测药材粉末1.0g，2%氨水超声提取60min，提取液于沸水浴中加热45min(冰醋酸调pH至3～4)后过滤．以乙酸乙酯萃取滤液，萃取液用氮气挥干，所得水溶性成分以1.0mL甲醇溶解．脂溶性供试液：取待测药材粉末0.5g，加甲醇／二氯甲烷(8／2，体积比)混合溶液10mL，置具塞试管中超声提取30min后过滤.TLC分析在中药中的应用薄层色谱指纹图谱在丹参药材质量评价中70..713.2.5TLC法在助剂中的应用P130显色剂：0.2%2，6-二氯醌氯亚胺的乙醇溶液.3.2.5TLC法在助剂中的应用P130显色剂：0.723.2.6TLC法在药物及其它产品中的应用布洛芬中应用复方乙酰水杨酸药片中阿司匹林、非那西丁和咖啡因的含量，可采用薄层扫描法测定.3.2.6TLC法在药物及其它产品中的应用布洛芬中应用.733.3HPLC在精细化学品中的应用柱子：全多孔硅胶柱流动相，二氯甲烷：正己烷=1：9检测波长，UV254nm正相？反相色谱？固定相、流动相保留时间相对大小？.3.3HPLC在精细化学品中的应用柱子：全多孔硅胶柱.74..753.3.1HPLC在助剂中的应用1、HPLC在化妆品中防晒剂中应用P108标准溶液配制，防晒剂标准品用流动相（甲醇：THF：水：高氯酸=200：200：160：0.1）标样预处理：超声、过滤、过柱子和萃取等HPLC分析条件选择：柱子型号、流动相、流速、检测器（UV选择波长）线性关系实验回收率测定和重现性考察未知样品测定.3.3.1HPLC在助剂中的应用1、HPLC在化妆品中防晒76P109..77..782、HPLC在化妆品中防腐剂分析中的应用柱子：C18柱流动相：甲醇：乙酸铵（0.02mol/L）=70:30检测器：UV254nm正相？反相体系？保留时间相对大小原因？固定相、流动相特点？P110.2、HPLC在化妆品中防腐剂分析中的应用柱子：C18柱P11793、离子对反相HPLC法的应用分离苯甲酸钠、山梨酸钾等防腐剂离子对试剂：柠檬酸三铵反相柱：C18为什么添加离子对试剂？苯甲酸钠、山梨酸钾等可发生解离，在柱子上保留时间较小，不利于组分的分离。加入离子对试剂后，柠檬酸三铵与样品中的组分分别结合成离子对，增加了各组分的保留时间而获得较好的分离。.3、离子对反相HPLC法的应用分离苯甲酸钠、山梨酸钾等防腐剂804、离子抑制色谱法应用离子型化合物在反相色谱柱上不保留改变流动相的pH值，抑制样品离子的电离主要适用于弱酸性化合物的分离降低流动相的pH值，使样品降低离子化使用硅胶基质C18填料使用条件应在填料基质的范围内硅胶柱的pH在2-8（较保险值3-7）内.4、离子抑制色谱法应用离子型化合物在反相色谱柱上不保留.81下列情况下不能使用离子抑制方法，如果：一些酸在pH低于2时还保持离子化一些碱在pH高于7时还保持离子化可以有以下的选择离子交换色谱使用聚合物或其他耐碱性流动相的反相柱，在pH高于7时用离子抑制法使用“离子对色谱法”.下列情况下不能使用离子抑制方法，如果：.82离子抑制色谱实例而在乙腈/水并且pH=7时，多数组份保留时间很短，无法完全分离。.离子抑制色谱实例而在乙腈/水并且pH=7时，多数组份保留时间835、HPLC在聚合物助剂中的应用P112.5、HPLC在聚合物助剂中的应用P112.843.3.2HPLC在表面活性剂中的应用固定相为烷基硅烷化流动相,甲醇：NaH2PO4（0.015mol/L水溶液）=35：65，pH=3～4分析烷基磺酸用电导检测器分析烷基苯磺酸用UV检测器不同碳数出峰顺序？检测方式？正相？反相？为什么加入NaH2PO4水溶液.3.3.2HPLC在表面活性剂中的应用固定相为烷基硅烷化.853.3.3HPLC在药物中的应用P117固定相，LiChrosorbC18流动相，0.01mol/L醋酸缓冲液（pH4.75）：乙腈=85：15乙酸作用，离子抑制正相？反相？为何用UV检测？.3.3.3HPLC在药物中的应用P117固定相，Li86P118

.P118.873.3.4HPLC在其它精细化学品中的应用间羟基苯甲酸的HPLC分析P123柱子，LiChrosorbC18检测方式，UV正相，反相？保留时间相对大小固定相，流动相流动相，甲醇：水=35：65，高氯酸调pH=2.5？.3.3.4HPLC在其它精细化学品中的应用间羟基苯甲酸的H88在食品研究中的分析应用食品中的天然成分碳水化合物类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂颜料和染料（色素〕维生素污染物霉菌（黄曲霉毒素〕农药和兽药残留多环芳烃（PAHS〕和亚硝酸.在食品研究中的分析应用.89在兽药研究中分析应用在医药研究中分析应用药物分析有USP、BP、CP等标准常用药物研究中的应用：解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。甾体药物研究中的应用：肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。抗菌素类药物研究中的应用：青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。中草药研究中的应用：生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类手性药物研究中的应用：光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。.在兽药研究中分析应用.90在生物化学和生物工程中的应用氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究（儿茶酚胺类)在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析.在生物化学和生物工程中的应用.91在公安、刑警破案工作需要毒品分析等在环境污染分析中的应用废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留、酚类和胺类的检测.在公安、刑警破案工作需要.923.3.5柱前衍生法在HPLC中的应用为什么要柱前衍生？一是由于待测物质在HPLC条件下不能分离，比如用RP-HPLC分离氨基酸，由于氨基酸在极性流动相中解离，不能保留，所以用柱前衍生使其成为弱极性的衍生物，就可以分离了。二是由于待测物质在常用的检测器（比如：UV-VIS）上响应比较弱，用柱前衍生加上发色团，使其产生紫外吸收。.3.3.5柱前衍生法在HPLC中的应用为什么要柱前衍生？.931、用于紫外检测的柱前衍生试剂标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm羧酸类260羧酸类265醇、胺和酚类254.1、用于紫外检测的柱前衍生试剂标记试剂样品类型衍生物检测波长94标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm苯酰氯醇类230对硝基苯甲酰氯醇类254对甲氧基苯甲酰氯胺类254O-对硝基苄基羟胺盐酸盐醛、酮类265.标记试剂样品类型衍生物检测波长/nm苯酰氯醇类230对硝基苯952、柱前衍生物HPLC在药分中应用胺类（氨基酸、多胺和肽等）抗生素类（新霉素、氨基糖苷、苯巴比妥）羧酸类（胆汁酸）羟基化合物（胆酸）甾族化合物甘氨胆酸牛磺胆酸脱