固相萃取富集邻苯二甲酸二乙酯

1、实验名称：固相萃取富集邻苯二甲酸二乙酯实验目的了解固相萃取基本原理。掌握固相萃取基本操作步骤。实验原理固相萃取(Solid Phase Extraction简称SPE )是近年发展起来一种样品预 处理技术，由液固萃取和液相色谱技术结合发展而来。固相萃取是一个包括液相 和固相的物理萃取过程。在固相萃取过程中，固相对分析物的吸附力大于样品母 液，当样品通过固相萃取柱时，分析物被吸附在固体表面，其他组分则随样品母 液通过柱子，最后用适当的溶剂将分析物脱下来。目前，这项技术主要用于样品 的分离、纯化和浓缩。与传统的液液萃取法相比较，该技术可以提高分析物的回 收率、更有效地将分析物与干扰组分分离，减少样

2、品预处理过程，操作简单，省 时，省力。固相萃取基本操作步骤：1、柱的预处理：为了获得高的回收率和良好的重现性，固相萃取柱在使用 之前必须用适当的溶剂进行预处理，预处理除去填料中可能存在的杂质，另一个 目的是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。2、样品的添加：预处理后，试样溶液被加至并以一定的流速通过柱子。在 该步骤分析物被保留在吸附剂上。3、柱的洗涤：在样品通过萃取柱时，不仅分析物被吸附在柱子上，一些杂 质也同时被吸附，选择适当的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留 在柱上。4、分析物的洗脱：用洗脱剂将分析物洗脱在收集管中，为了提高分析物的 浓度或为以后分析调整溶剂杂质，可以把收集到的

3、分析物用氮气吹干，再溶于小 体积适当的溶剂中。三仪器与试剂仪器：Agilent8453UV-VIS 分光光度仪Glass Speed Mate -12 固相萃取仪Speed SPE C18/18% 500mg/6mL2 根量筒：10mL 1个 100mL 2个容量瓶：250ml 6个10mL 2个 1L 1个试剂： 邻苯二甲酸二乙酯(DEP)分析纯。甲醇分析纯。（3）邻苯二甲酸二乙酯溶液（1g / L）：取0.89mL DEP于1L容量瓶中，加约150mL 甲醇溶液，以蒸馏水定容。（4）邻苯二甲酸二乙酯溶液（0.002、0.004、0.008、0.016、0.024、0.036g / L）：

4、分别取0.5、1、2、4、6、8mL溶液（3）于250mL容量瓶中，以蒸馏水定容。四、实验步骤1、固相萃取：（1）活化：取C18小柱2根，分别标记为样品柱、空白柱。分别量取7mL甲醇过柱。 待液面接近固相时，分别量取10mL蒸馏水过柱。（2）过柱：待蒸馏水过完柱，在样品柱中，量取100mL 0.002g / L DEP溶液，分多次过 柱。在空白柱中，量取100mL蒸馏水，分多次过柱。（3）洗脱：待溶液全部过完柱后，取下两根C18小柱，分别置于两个10mL容量瓶上， 分别量取7mL甲醇过柱。待甲醇过完柱，取下C18小柱，以甲醇定容，分别得 到样品过柱液及空白过柱液。2、Agilent8453UV

5、-VIS分光光度仪的测定：（1）标准曲线的测定：以蒸馏水为参比，测定 0.002、0.004、0.008、0.016、0.024、0.032g / L DEP 溶液。（2）样品的测定：以空白过柱液为参比，测定样品过柱液。五、数据的记录与处理1.标准曲线的绘制标准溶液测量数据:C/g/L0.0020.0040.0080.0160.0240.032A0.0552320.17830.289830.601610.896051.19430标准曲线标准曲线浓度C(g/L)标准曲线线性(标准曲线)2.计算富集倍数富集后的样品的吸光度A=0.61908由标准曲线得线性方程式为：y=37.33x+0.0008,

6、代入吸光度值A,求得浓度C (样品)=0.01656 g/L则富集倍数 N=0.01656/0.002=8.28六、思考与讨论你认为如何能进一步提高富集倍数？富集倍数的提高会受到哪些因素的限 制？答：我觉得提高富集倍数主要有以下方法：选择更好的吸附剂；增加试样在柱内的停留时间，让吸附剂充分吸收；通过加入某种物质于待富集试样中增加其吸附系数。富集倍数的提高会受到试样的吸附系数，吸附剂强度，pH值，无机盐的浓度， 泵的压力等的影响。在原溶液的配制中，用到了一定量的甲醇。而在标准曲线的测定中，为何 仍然采用蒸馏水作为参比？试从全波长谱图中找到线索。答：在制定标准曲线的时候使用的标准溶液都没有添加甲醇

7、，所以采用了蒸馏 水作参比。除了使用紫外-可见分光光度法进行检测外，列举你认为可能的检测手段及 其特点。答：利用722型分光光度计测定：操作简单，测量迅速，但灵敏度不高。原子吸收分光光度法测定：必须要有对应原子的空心阴极灯，测量较 准确，但要找到被测物质所特有的一种元素，通过对该元素的测定来计 算该物质的含量。通过文献查阅，简单综述目前固相萃取技术的发展现状及应用领域。答：发展现状：随着萃取材料，萃取剂，吸附物质等的研究与发展，固相萃取技术正越来 越广泛地应用于环境，医药化工等多个领域，并起着重要作用。这种方法几乎 可以用于气体，液体，生物，固体等样品中各类挥发性物质或半挥发性物质的 分析在短

8、短的10多年得发展的时间当中，已在环境，生物，工业，食品，临 床医学等领域的各个方面得到广泛应用，在发展过程中主要涉及到萃取方法， 联用技术的发展，SPE理论的进一步的完善和其应用等几个方面。应用领域：食品监测方面的应用固相萃取技术在食品检测中的作用主要是评估食品营养价值，监测各种 食品添加剂含量，测定芳香剂和香料含量以及食品中农药，杀虫剂，除草剂等 有害物质的残留量等。环境监测中的应用固相萃取技术对于各种农药，除草剂，灭菌剂残留，挥发性碳化合物， 苯及其同系物，多环芳烃，芳香胺化合物和酚类化合物等环境污染物的测定， 都具有较宽的线性范围和较高的灵敏度，同时有的时候也可对一些重金属的含 量进行测定。医药卫生领域的应用固相萃取技术已逐渐成为生理，病理，毒理学领域重要的检测手段，在 临床检验中利用该技术萃取血，尿