从蜂胶中提取黄酮类化合物的研究_图文

1、Vol13N。2第13卷第2期淮海工学院学报(自然科学版i!竺!兰!墨!窒竺型塞!坚兰!塑坠坠!竺望墅竺竺!竺墼墅!坠一=2=;=o=#=_=;=;=;=;。一一一。文童编号:16726685(200402一006003从蜂胶中提取黄酮类化合物的研究王启发,程青芳2,许冰1(1.淮海Z学院海洋学浣,江苏连云港222095;2.淮海王学靛讫学王疆系,巍苏连云港222005摘要:对以蜂胶慧原料提取黄酾类化舍物的工艺进行了探讨。研究了溶裁与蜂胶的质量配斑(液躐比、溶卉ll的质量分数、提取时间、提取温度对黄酮类化合物含量的影响。结果表明,在40下,当液田比为8:l,乙醇质量分数为80%,提取时问为6h

2、时,所得产品中黄酮类化舍物的质量分数遮21.5%。工艺操作麓单,经济适用。关键词:蜂胶;黄酮类化合物;芦丁;乙醇一水体系崇蓬分类号:S896。8;Q946文献椽莰秘:AThe Tec|lnolOgy Of ExtraCting FlaVO瓣Oids frOl稚PropOlisWANG Qifal,CHENG Qingfan92,XU驳n91(1.CoIlege of Marine Science,Huaihai Institute of Technology,Lianyungang222005,China;2。ep.of Che娃tieal嚣ngine譬ring,u珏ihainstitute

3、of TeehnoIogy,Lianyu珏gang22200S,China Abstraet:The technology of extfacting flavonoids ffom pfopolis was discussed。The factors that affect the y沁ld were inVestigated,including the weight ratio of soIVent and propohs,the eoncntra毫ion of solvent,tle extfacti狂g tine and te!nperat疆fe。Res挂lts showed that

4、唾O,c,8:l of80%ethanoI to propolis weight ratio and the extracting time of6h were optimal.The amount ofl&vonoids is2王。s%娃稳def the opti嫩杖m eondi专ions。he process was si搬ple8nd econo蕊ie with high practicability and efficiency.Key words:propolis;flavonoid繁2麓王启发等;获蜂获牵掇浓黄酮类亿合耪酶磷究6l 台物含量酶影#两,提&了最佳工艺

5、条俘。1实验部分1.1试剂和仪器蜂胶(工业撼,河媾省李建蜂产晶龆工厂,芦丁(生化试剂,上海试剂二厂,乙醇(化学纯,上海试剂二厂,三氯纯铝(分辑纯,上海试麓二厂,醋酸镡(分析纯,上海实验试剂有限公司。袋T一蛰2型粉碎褫(j艺京鑫环耍科技有限公司, 721分光光度计(上海精密科学仪器有限公司,分析天平(t海天平仪器厂,抽滤装置及容量瓶等。1.2黄酮类化磊施的提取1.2.1蜂胶预处理将原料蜂胶放入冰箱冷冻5 b(蜂胶农15以下变硬交臆,在她瀑度淡上具有粘性,不便粉碎,然后拿出粉碎,过40目筛,备用。l。2。2黄酾类牝舍耪的提取穗确称歉邑遘筛的原料蜂胶50g投入到研钵中,加质量分数为80%的乙醇溶液5

6、0ml。着研磨成糊状。然后将糊状物转移至装有搅拌器、温度计、回流冷凝铐的三日烧瓶中,用50mI。上述乙醇溶液洗涤研钵数次,洗涤液也转移至三日烧瓶孛。莠趣烧瓶中热入209m,乙醇溶液,搅拌、加热混合物鬣40。e,恒温搅拌6h,冷却,擒滤,滤滚耀履基分数为80%酶己醇洗涤两状,合并滤液并转移到1000mI。容量瓶中,定容待测。l。3样品提取液中黄黼类诧合物质重浓菠的测定1.3。l标准曲线的绘制参照文献6,采用芦丁为标准品,用分光光度计测定黄酮类化合物的禽量。精确褥取在120减压予燥至毽重的芦丁标准品100.oo mg,鬣100mI。容量瓶中,并向其中加入80激l。爱蘸分数秀so%熬乙醇溶液,承漆徽

7、热歪芦丁完全溶解,冷却,以上述乙醇溶液定容,备用。精确移取lo mf。上述芦丁标准液鬟100ml,容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即德o。1mg/l。芦丁标准液。准确吸取芦丁标准液O.O,1.0,2.O,3。O,4.O, 5。O,6.o mI。分剃置予25mI。容量瓶中,糖确燃入质量分数为2.5%的三氯化铝溶液3.o mL及醋酸钾溶液5。O m!,耀质爨分数势鑫0必静乙醇稀释至刻度,摇匀,放置30min;以芦丁空白为对照,在波长萼ls n撒鲑溅定吸光度篮,泼质豢浓度对暖毙度值作图,得芦丁橼准曲线如图1所承。圆归方程:】|。一36.273A+O.434,yO.9993,式中,P为芦丁的质量浓度(mg

8、/I。,A为吸光度值。J奄世迸测1l嚣潮l艿丁的标准工作曲线Fig。l The standard working curVe of r挂t拜side1。3。2黉酮类化舍物质量浓度的测定准确移取2mL样品提取液于50m乙容量瓶中,用质量分数戈80簇静乙醇稀释至裁度。准确移取蓠述稀释液5 mL,按标准曲线测其吸光魔值,然后代入回归方程计算,静蜀得样品提取液串黄酮类亿合物的藤量浓度,再经计算得到其质量分数。2结果与讨论选取渡圈纥、溶荆黪曩爨分数、提取瓣阕稻湿度4因素做单因索水平试验,从结果确定蜂胶中提取黄熬类纯会物懿最襞忑艺。2.1提取时间的影晌将研蘑成糊狭的蜂胶和质量分数为80弼的乙醇转移至三口烧

9、瓶中,边搅拌边加热至40,考察不同提取时间对黄酮类化含物质量分数的影响,结果如图2赝示。22避19婪16鲫蝼310345678撵墩辩蠲热望2提取对阉对黄嘲类化食物质量分数麴彩晌Fig.2甜Ie effect of time on the content of flavonoids 放醒2霹泼看出,当提取爵阕增热烈6ll拜孪,黄酮类化合物的质量分数达到最大德21.5%,再延长时闶鲻下降。提取时间增加到8h,质量分数下降为16.3%,可能是随着提取时阍的增加,提取液中杂质含薰增商。因此,最适宜的掇取时间为6h。2.2溶剂质量分数麴彩响。按液围比8:1加入不同质擞分数的乙醇,在S2瀑海工学靛学羧(鑫

10、然辩学舨2004年6秀40下提取6魏,考察乙醇质燕分数对提取滚审黄酮类化合物质量分数的影响,结果如图3所示。乙醇的质量分数/%凿3艺醇质量分数对提取液中黄鬻类化裔物质量分数的影响Fig。3The effect of concentration on theconte娃l of fI趣vonoids嘲图3可知,随着乙醇质擞分数的增加,黄酮类化合物质量分数持续升高,当乙醇质量分数为80%时,达到最大值21.5%,继续提高乙醇质量分数,嬲下降,当乙醇质量分数为95%时,黄酮类化合物质量分数降为17.1%。乙醇凌豢分数过褰,提取液中杂质禽量不断增大。故最佳乙醇质量分数为80%。2.3液萄琵髀影晌按不同

11、液固比用质基分数为80%的乙醇在40下掇取6h,考察液圆毙对摄取液中黄酮类化合物质燕分数的影响,结果如图4所幂。豳4液阉比对簧酮类化合物质分数的影响Fl薯。4薹强e l珏l毽enee帕Iliq滋建solldr鞋le鞣镭ecOntent Of fIavOnoids图4表明,随着液固比的增加,黄酮类化合物的质量分数逐渐增加,当液固比为8时最大。液同比小,黄酮类化合物溶出不充分,当液围比为9以上时,曲线显示黄酮禽量变化趋予稳定,因此,从降低成本、劳省能源等方面考虑,最健滚圆圪势8;l。2.4提取温度的影响按渡露院8:l热入壤量分数势80%粒乙酵,在不同温度下提取6h,考察温度对提取液中黄酮类纯合物质

12、爨分数的影响,结果如图5所示。22莲19豢求16曲目整13lOlO20304050豹提取温度,鎏5溢度对黄酮类亿台物质重分数的彰晌Fig.5The effect Of temperature on theconlent of flavonoids图5表髓,随着温度的升高,黄酮类亿合物质量分数先增加后下降,说骥提取进行褥较慢;当温度身高到40时其质量分数达到最大值。从热力学角度分橱,滠度越蹇,越有裁子黄黼类化含物的溶爨,从而提高其质量分数,但温度过高,杂质的溶出增加,霭时,乙醇的挥发氇增鸯器,不弱子黄黼类诧合鐾的溶出,因此,最适提取温度为40。C。3结论研究结果表明,从蜂胶中提取黄酮类化合物的最佳工艺为:乙醇质量分数为80%,溶剂与蜂胶的覆量鬣吃<滚固魄力8:l,搅拌下提取瀑度失4G ,提取时阅为6h。在此条件下,提取液中黄酮类化合物的震量分数可达21.5%,两且工艺操作简单,经济适用,具有良好的应用前景。参考义麸:1正贻节.蜜蜂产品学M.北京:农业出版社,1995.8389.2郭糯,瘸盘东。蜂艘的毙学成分礤究遗震(缘述口。孛园养蜂,2000,51(4:1822.3】妫誊。黄鬻类亿食貔豹抗戴诧性璇;。审善蒗耀, 1996,21(4:1821.4陈运孛,靛枣泓,震享卷。