实验八 家兔的热原

1、实验八实验八 家兔的给药、采血家兔的给药、采血热原实验热原实验【目的要求目的要求】1、熟悉家兔的各种给药方法；、熟悉家兔的各种给药方法；2、掌握家兔的、掌握家兔的耳缘静脉采血；耳缘静脉采血；3、了解家兔热原反应的基本原理。、了解家兔热原反应的基本原理。【基本原理基本原理】临床上在进行静脉滴注大量输液时，由于药临床上在进行静脉滴注大量输液时，由于药液中含有热原液中含有热原( (注射剂中含有热原量达注射剂中含有热原量达1ug1ug /kg/kg就可引起不良反应就可引起不良反应) )，病人在，病人在0.50.51.0h1.0h内出现内出现冷颤、高热、出汗、昏晕、呕吐等症状，高热冷颤、高热、出汗、昏晕

2、、呕吐等症状，高热时体温可达时体温可达4040，严重者甚至可休克，这种现，严重者甚至可休克，这种现象称为热原反应。象称为热原反应。 引起热原反应的主要原因是注射液或输液引起热原反应的主要原因是注射液或输液器中污染的热原所引起的。热原的致热量因菌器中污染的热原所引起的。热原的致热量因菌种而异，如革兰阴性杆菌致热能力最强；由于种而异，如革兰阴性杆菌致热能力最强；由于注射途径不同，引起发热的程度也有所差异。注射途径不同，引起发热的程度也有所差异。由于家兔对热原的反应与人基本相似，由于家兔对热原的反应与人基本相似，目前家兔法仍为各国药典规定的检查热原的目前家兔法仍为各国药典规定的检查热原的法定方法。法

3、定方法。 家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，发热反应典型、恒定，因此常选用家反应，发热反应典型、恒定，因此常选用家兔进行这方面的研究。兔进行这方面的研究。反应过程反应过程：热原：热原- -白白细胞细胞- -吞噬吞噬- -白细胞崩解，释放内源性致白细胞崩解，释放内源性致热源热源- -作用与作用与体温调节中枢体温调节中枢- -产热增加，散热减少产热增加，散热减少- -体温上升。体温上升。内源性致热源内源性致热源n又称白细胞致热源，如白介素肿瘤坏死因子和又称白细胞致热源，如白介素肿瘤坏死因子和干扰素等通过血干扰素等通过血- -脑脊液屏障直接作用于体温调脑脊液屏

4、障直接作用于体温调节中枢的体温调定点，使调定点上升，体温调节中枢的体温调定点，使调定点上升，体温调节中枢必须对体温加以重新调节发出冲动，并节中枢必须对体温加以重新调节发出冲动，并通过垂体内分泌因素使代谢增加或通过运动神通过垂体内分泌因素使代谢增加或通过运动神经使骨骼肌阵缩，使产热增多；另一方面可通经使骨骼肌阵缩，使产热增多；另一方面可通过交感神经使皮肤血管及竖毛肌收缩，停止排过交感神经使皮肤血管及竖毛肌收缩，停止排汗，散热减少。这一综合调节作用使产热大于汗，散热减少。这一综合调节作用使产热大于散热，体温升高引起发热。散热，体温升高引起发热。【动物与器材动物与器材】家兔（每组家兔（每组2只：只：

5、1只用于热源实验，只用于热源实验，1只练习给药、采血和麻醉等）、台秤、只练习给药、采血和麻醉等）、台秤、动物肛门体温计、注射器、动物肛门体温计、注射器、0.9%戊巴比戊巴比妥钠、生理盐水、伤寒妥钠、生理盐水、伤寒-副伤寒四联菌苗、副伤寒四联菌苗、二硝基酚、二硝基酚、10%蛋白胨、消蛋白胨、消毒脱脂牛奶。毒脱脂牛奶。实验内容（、家兔给药、麻醉）实验内容（、家兔给药、麻醉）1 1、静脉注射静脉注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。外缘静脉表浅易固定，

6、常用。 先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连手持注射器连6 6号针头尽量从静脉的远端刺入，移号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。2 2、皮下注射、皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤，注射时以左手

7、拇指和食指提起皮肤，将连有将连有5 5（1/21/2）号针头的注射器刺入皮下。注射部）号针头的注射器刺入皮下。注射部位一般是在兔背部或耳根部注射。位一般是在兔背部或耳根部注射。3 3、肌肉注射、肌肉注射 应选肌肉发达，无大血管通过的部位，应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。栓如无回血，即可进行注射。4 4、腹腔注射、腹腔注射 用家兔做实验时，进针部位为下腹部用家兔做实验时，进针部位为下腹部的腹白线离开的腹白线离开1cm1cm处。处。实验内容（、家兔采血）实验内容（、家兔采血）耳缘静脉

8、采血耳缘静脉采血：将兔麻醉后固定，拔去耳缘静：将兔麻醉后固定，拔去耳缘静脉局部的被毛，消毒，用手指轻弹兔耳，使静脉脉局部的被毛，消毒，用手指轻弹兔耳，使静脉扩张，用针头刺耳缘静脉末端，血液即流出。本扩张，用针头刺耳缘静脉末端，血液即流出。本法为兔最常用的采血方法，可多次重复使用。法为兔最常用的采血方法，可多次重复使用。2 2）颈静脉采血）颈静脉采血：将家兔麻醉后固定，剪去一侧颈：将家兔麻醉后固定，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。血。 耳中央动脉采

9、血耳中央动脉采血：在兔耳中央有一条较粗的、：在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉，即可见血液进入针平行的向心方向刺入动脉，即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛，故抽血前必管。由于兔耳中央动脉容易痉挛，故抽血前必须让兔耳充分充血，采血时动作要迅速。采血须让兔耳充分充血，采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细，一般用所用针头不要太细，一般用6号针头，针刺部位号针头，针刺部位从中央动脉末端开始，不要在近耳根部采血。从中央动脉

10、末端开始，不要在近耳根部采血。4）心脏采血心脏采血：穿刺部位在第三肋间：穿刺部位在第三肋间胸骨左缘胸骨左缘1mm处，选心跳最明显的处，选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。血。 实验内容（、家兔热源实验）实验内容（、家兔热源实验） 【方法与步骤方法与步骤】n取适用家兔取适用家兔2 2只（提前停食只（提前停食1212小时小时: :降低家兔降低家兔体能，加速应激反应发生），称量体重体能，加速应激反应发生），称量体重(1.5-(1.5-3.0

11、3.0) )后，用肛门体温计测量家兔的正常体后，用肛门体温计测量家兔的正常体温温(38.0(38.039.639.6) )，一般测量两或三次，温，一般测量两或三次，温差不得超过差不得超过0.40.4。n采用以下方法之一进行热源实验：采用以下方法之一进行热源实验： 1 1）于于15min15min内自家兔耳缘静脉缓慢注射规内自家兔耳缘静脉缓慢注射规定剂量（定剂量（1.01.02.0ml/kg2.0ml/kg体重）伤寒体重）伤寒- -副伤寒副伤寒四联菌苗，（供试菌苗温热至四联菌苗，（供试菌苗温热至3737，含量应，含量应不低于不低于1010亿亿/ml/ml）；）；2）皮下注射规定剂量（皮下注射规定

12、剂量（1.0ml/kg体重）体重）2%的的2、4二硝基酚溶液（配制二硝基酚溶液（配制2、4二硝基酚二硝基酚溶液时，需加溶液时，需加10%NaOH少许，使溶液完全少许，使溶液完全溶解）；溶解）；3）肌肉注射规定剂量肌肉注射规定剂量(10.0ml /Kg体重体重)10%蛋蛋白胨（温热至白胨（温热至37的供试溶液）；的供试溶液）；4）皮下注射消毒脱脂牛奶（皮下注射消毒脱脂牛奶（35ml/kg体体重）。重）。、每隔、每隔20min按前法测其体温一次，按前法测其体温一次，共测五次，以共测五次，以5次体温中最高的一次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温升次减去正常体温，即为该兔体温升高度数。高度数。

13、n4、将给药前后的每次体温测量结、将给药前后的每次体温测量结果记录下来，填于表内。果记录下来，填于表内。n体温计在插入肛门前，应先消毒体温计，甩动体温体温计在插入肛门前，应先消毒体温计，甩动体温计使水银柱降到计使水银柱降到35以下，涂上润滑剂后才能使用；以下，涂上润滑剂后才能使用；n肛门体温计插入各兔肛门的深度应相同（一般约肛门体温计插入各兔肛门的深度应相同（一般约6左右或插至肛温左右或插至肛温37处），插入肛门的体温计，处），插入肛门的体温计，至少停留至少停留35分钟后才能取出；分钟后才能取出；n供试家兔应尽可能处于同一温度环境中；供试家兔应尽可能处于同一温度环境中；n实验用的注射器、针头及一切供实验接触的器皿，实验用的注射器、针头及一切供实验接触的器皿，应置烘箱中应置烘箱中250加热加热30min或用或用180加温加温2h，也，也可用其他适宜的方法除去热原。可用其他适宜的方法除去热原。日期日期室温（室温（）实验组实验组兔体重（兔体重（kgkg）药物药物给药方法给药方法给药前第一给药前第一次测的体温次测的体温()()给药前第二给药前第二次测的体温次测的体温()()给药前的平给药前的平均体温均体温()()注射药物时注射药物时间间第一次测的第一次测的体温（体温（）第二次测的第二次测的体温（体温（