黄霉素及饲料药物添加剂在饲料配方中的应用技术

中牧实业股份有限公司 China Animal Husbandry Industry Co.,Ltd. 黄霉素及饲料药物添加剂 在饲料配方中的应用技术 刘 向阳 博士 1 药添作用实质药添作用实质 对肠道菌群的影响。选择性抑 杀有害微生物、促进有益微生物生 长。 可能成为证据的现象：可能成为证据的现象： 促生长 剂对无菌动物无效、在环境恶劣情 况下促生长明显、后期效果好于前 期 2 1、耐药性 固有耐药性、 获得性耐药性获得性耐药性 2、 药物残留 -通过饲料进入食物链，在食品、环境中造成残留。 3、 药物安全 -对药物长期使用的监察，药物毒副作用的验证。 3 药物饲料添加剂使用规定 鉴于用药安全、残留及耐药性的问题，许多国家都对药 物的使用做出严格的规定，明确列出各自可用药的清单， 并对所用药的 用量、使用期限、使用对象 做出严格的规 定。 动物用药：一些国家如欧盟、美国、日本等国把动物用药分为 治疗用药和饲料添加药物 。 例如：欧盟饲料中使用抗生素类促生长剂仅有： 黄霉素、盐霉素、莫能霉素、及卑霉素。 其中丹麦率先禁止药物在饲料中的应用。虽然报道取消饲料用药后 增加了治疗药的使用，饲料转化率降低及胴体蛋白降低，但减少抗生 素在饲料中的使用品种是确保人类健康的要求，是发展的趋势。 4 对于挑战的应对措施 加工工艺 开发更加安全、无毒副作用、无残留畜禽专用抗生素， 避免交叉耐药性的产生。如黄霉素等。 开发环保绿色替代抗生素的产品如： 中草药提取物 微生物活菌制剂 寡聚糖类 酶制剂类 有机酸类 其它。 5 添加剂附录（添加剂附录（ 一）一） 1、【、【 2001】 20号文件共号文件共 33种，其中种，其中 17种抗球虫药种抗球虫药 2、 与与 1997 8号文件：号文件： 取消取消 2种：种： 氨丙啉、硝酸二甲硫胺 改为处方药改为处方药 2种：种： 越霉素 A、 潮霉素 B 新增新增 8种：种： 赛杜、的克珠利、复方硝基酚钠、氨苯砷酸、洛克沙 砷、那西肽、阿维拉、诺必达 3、其中：、其中： 喹乙醇仅在中国使用 氨苯砷酸、洛克沙砷已经很少国家使用 吉他霉素仅可在日本使用 6 1、抗球虫药物、抗球虫药物 （ 产蛋期禁用；有休药期产蛋期禁用；有休药期 ） 只用于鸡：只用于鸡： 二硝托胺 ；马杜霉素铵；尼卡巴嗪 （ 高温禁用高温禁用 ） ；尼 卡巴嗪、乙氧酰胺苯甲酯 （ 高温禁用高温禁用 ） ；甲基盐霉素、尼卡巴嗪 ；甲 基盐霉素 ； 拉沙洛（拉沙洛（ 产蛋期？产蛋期？ ） ；氢溴酸常山酮 （ 水禽禁用水禽禁用 ） ；海 南霉素钠 ；赛杜霉素钠 可用于其他家禽：可用于其他家禽： 盐酸氨丙啉、乙氧酰胺苯甲酯；氯羟吡啶；盐酸 氨丙啉、乙氧酰胺苯甲酯、磺胺喹噁啉 可用于兔：可用于兔： 盐酸氯苯胍；氯羟吡啶 可用于猪：可用于猪： 盐霉素钠； 可用于牛：可用于牛： 莫能菌素钠；盐霉素钠 畜禽均可用：畜禽均可用： 地克珠利 2、水产：、水产： 复方硝基酚钠（用于虾蟹，休药 7天） 7 3、阳性菌：、阳性菌： 黄霉素 /杆菌肽锌 （牛鸡猪，休药（牛鸡猪，休药 0天，可用于产蛋期）天，可用于产蛋期） ； 维吉尼亚 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 1天，产蛋期？）天，产蛋期？） ； 那西肽 （鸡，休药（鸡，休药 3天，可用于产蛋期？）天，可用于产蛋期？） ； 阿维拉 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 0天，可用于产蛋期）天，可用于产蛋期） ； 恩拉霉素 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 7天，天， 产蛋期禁用产蛋期禁用 ） ； 吉它霉素 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 7天，天， 产蛋期禁用，防治呼吸系统疾病使用产蛋期禁用，防治呼吸系统疾病使用 5 7天？天？ ） 8 4、阴性菌有效、阴性菌有效 硫酸粘杆菌素 （牛鸡猪，休药（牛鸡猪，休药 7天，产蛋期禁用）天，产蛋期禁用） 5、广谱、广谱 土霉素钙 （ 10周龄内鸡、周龄内鸡、 4月龄内猪，月龄内猪， 休药休药 7天天 ？，产蛋期禁用）？，产蛋期禁用） 金霉素 （ 10周龄内鸡、周龄内鸡、 4月龄内猪，休药月龄内猪，休药 7天，产蛋期禁用）天，产蛋期禁用） 喹乙醇 （猪小于（猪小于 35kg， 休药休药 35天，家禽禁用）天，家禽禁用） 有机砷：有机砷： 氨苯胂酸；洛克沙胂 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 5天）天） 杆菌肽锌、硫酸粘杆菌素 （鸡，（鸡， 4月龄内猪，休药月龄内猪，休药 7天，产蛋期禁用）天，产蛋期禁用） 6、其他：、其他： 牛至油 （鸡猪，休药（鸡猪，休药 0天，可用于产蛋期）天，可用于产蛋期） 注意：同类之间不能合用注意：同类之间不能合用 9 1、磺胺喹恶啉 二甲氧嘧啶；磺胺氟吡嗪钠；复方磺胺嘧啶 2、 越霉素 A； 潮霉素 B； 氯羟吡啶；氟苯咪唑；伊维菌素 3、地美硝唑； 磷酸泰乐菌素； 硫酸安普霉素； 盐酸林可霉素 ； 赛地卡霉素；呋喃苯烯酸钠；延胡索酸泰妙菌素；盐酸林可 霉素 硫酸大观霉素； 硫酸新霉素； 磷酸替米考星； 磷酸泰 乐菌素 磺胺二甲嘧啶 4、甲砜霉素；诺氟沙星 盐酸小蘖碱；维生素 C磷酸酯镁 盐酸环丙沙星；盐酸环丙沙星 盐酸小蘖碱素 ；恶喹酸 处方药，商品饲料不得添加处方药，商品饲料不得添加 附录（二）添加剂品种附录（二）添加剂品种 10 药物分类及应用 一、 青霉素类：普鲁卡因青霉素 对链球菌、肺炎球菌、猪丹毒等 G+菌、 G-菌和螺旋体有强大 的抗菌力。 二、 氨基酸糖苷类： 对 G-菌（大肠杆菌、沙门氏菌、变形杆 菌、布氏杆菌、巴氏杆菌等）、 G+（ 链球菌、葡萄球菌）有 效，对真菌、立克次体、病毒无效。 新霉素、壮观霉素。 越霉素 A（ 广谱、特别对植物的病原性霉菌有特效） 潮霉素 B（ 广谱、对猪蛔虫、结节虫，鸡蛔虫等寄生虫有效） 11 3、 四环素类：对 G+菌、部分 G-菌、立克次体、螺旋体、 大型病毒等都有效。土霉素、金霉素等。 4、 大环内酯类：对 G+菌、支原体有较强的作用，吉它 霉素、泰乐菌素、林肯霉素等。 5、 多肽类：杆菌肽、维基尼亚霉素、恩拉霉素、抗敌素等 杆菌肽：主要对 G+菌有效，对少数 G-菌、螺旋体、放线 菌也有效。 维基尼亚霉素、恩拉霉素：主要对 G+菌有效； 抗敌素：主要对 G-菌有效。 12 6、 磷酸化多糖类：主要对 G+菌有效，黄霉素等 7、 聚醚类：主要作用于球虫，有一定抗菌作用。 盐霉素、马杜霉素、莫能霉素等 8、 合成类抗菌素：砷制剂、磺胺类、硝基呋喃类、喹乙醇等 9、 其它 13 药物的配合使用： 抗菌药物分为：繁殖期杀菌剂（ 1）和静止期杀菌剂（ 2）； 快效制菌剂（ 3）和慢效制菌剂（ 4）。 一般 1和 2、 3和 4合用有协同作用； 3和 4合用有相加作用； 1和 3合用有减弱和颉抗作用。 作用机理或方式相同的不宜合用。 14 致病性微生物 1. 立克次体 2. 衣原体 3. 支原体 4. 革兰氏阳性菌 5. 革兰氏阴性菌 6. 抗酸杆菌 7. 钩端螺旋体 8. 密螺旋体属 9. 放线菌 10.真菌 15 抗 G+药物添加剂 黄霉素、维吉尼亚霉素、阿维拉霉素、那西肽、杆菌肽 恩拉霉素； 抗 G+及支 原体 北里霉素、泰乐菌素、林可霉素、金霉素 抗 G-药物添加剂 粘杆菌素、新霉素等 16 广谱 抗生素： CTC、 OTC、 喹乙醇、砷制剂等； 驱虫类： 越霉素 A、 潮霉素 B、 芬苯哒唑、依维菌素等； 17 黄霉素黄霉素 牧乐旺 (Multimycin)： 中牧实业股份公司生产的黄霉素预混剂 商品名 默诺霉素（ Moenomycin） ： 以该活性成分产生菌的首次 分离地 Moenus冠名的通用科学名。 斑伯霉素（ Bambermycin） ： 美国通用名。 黄磷酯素（ Flavophospholipol） ： 欧共体 /WHO通用名。 黄霉素（ Flavophospholipol） ： 中国通用名。 Flavocorm ： 日本通用名。 富乐旺 (Flavomycin)： 德国赫斯特公司注册商品名，中文 另一名称为福乐旺。 18 黄霉素概况黄霉素概况 黄霉素 (Flavophospholipol)， 是由 Streptomyces bambergiensis (一组链霉菌 )菌株发酵而成 一种动物专用抗生素类促生长添加剂 至少含有 A、 B1、 B2、 C等四种组分，其中组分 A占 50以上 黄霉素 在抗生素分类上属于 含磷糖酯类 19 分子式：为分子式：为 C70H124O40N6P； 分子量：分子量： 1752 20 分解温度：各组分复合物 200 ；组分 A为 184 185 （熔点 ） 预混剂产品性状：为褐色粉末，有特殊味道 纯品溶于水、低级醇等极性溶剂；微溶于乙醚和乙酸乙酯； 不溶于苯和氯仿；难溶于 4碳以上醇。 其他性质其他性质 21 黄霉素的生产工艺 摇瓶 发酵罐 喷雾干燥 制粒含量测定 调配成品 4%， 8% 接种斜面 接种 种子培养 种子罐 22 1、细胞壁中双糖分子与黄霉素结构类似，糖基转移酶 无法将其区分，不会形成正常的肽聚糖。因此主要抑制细 菌胞壁的合成，对阳性病原菌高效。对少数阴性菌也有效 ，如布氏杆菌。 2、对大肠杆菌的肽聚糖生物合成（菌外试验），抑制 胞壁合成效率：杆菌肽（ 100g/ml， 抑制率 20； 10g/ml ， 抑制率抑制率 0 ）；黄霉素（ 1g/ml， 抑制率 100； 0.1g/ml ， 抑制率抑制率 100 ； 0.01g/ml， 抑制率 39 ）。 3、通过对大肠杆菌的肽聚糖生物合成（菌外试验）抑 制效果试验得到，万古霉素、黄霉素、杆菌肽的 IC50分别为 1.1、 0.03、 0.7g/ml（ Barbosa M D et al., 2002） 。 抗菌机制抗菌机制 23 黄霉素抗菌谱概况黄霉素抗菌谱概况 (g/ml) 大肠杆菌（肉鸡） 0.025 大肠杆菌（蛋鸡） 0.025 大肠杆菌（猪） 0.125 大肠杆菌（猪） 0.25 大肠杆菌（猪） 32 巴氏杆菌（鸭） 0.125 巴氏杆菌（鸡） 2.0 巴氏杆菌（蛋鸡） 0.0625 沙门氏菌 (猪 ) 4.0 沙门氏菌（鸡） 0.25 布氏杆菌 1.0 绿脓杆菌 64 双歧杆菌 256 乳酸杆菌 128 炭疽杆菌 0.001 金黄色葡萄球菌 0.025 化脓链球菌 0.025 停乳链球菌 0.03125 粪链球菌 0.03125 肺炎链球菌 0.25 化脓棒状杆菌 2.0 李氏杆菌 0.0625 丹毒杆菌 0.03125 肠杆菌 0.0625 枯草杆菌 0.125 耐药金葡球菌 耐链霉素 0.125 耐青、四环素 0.0625 24 黄霉素抗菌作用针对性强，不伤害有益菌。 下表为最低抑菌浓度试验结果（微克 /毫升）： 其他特点其他特点 药物（推荐用量） 乳酸杆菌 黄霉素（ 5 25） 128 杆菌肽（ 4 40） 16 速大肥（ 5 25） 0.25 金霉素（ 20 75） 32 土霉素（ 10 50） 0.125 双歧杆菌 256 16 0.25 32 0.125 25 牧乐旺稳定性试验牧乐旺稳定性试验 条件：条件： 40 恒温、恒温、 75恒湿下培养箱中原包装存放恒湿下培养箱中原包装存放 160天天 方法：微生物检定法方法：微生物检定法 测定含量；测定含量； HPLC法法 测定组分测定组分 10天 90天 120天 160天 100 99 100 98 100 100 97 102 100 100 97 98 01040201 01040202 01040203 牧乐旺有效成分保存率存放期 结果：外观、含量、组分均未见变化结果：外观、含量、组分均未见变化 26 黄霉素在预混料中稳定性 存放期 2.5年 温度（ ） 4 保存率 100 2.5年 20 92 48小时 80 80 24小时 100 80 2.5年 37 93 6月 50 93 24小时 80 90 条件温度 调温前 21 物料水分（） 11.0 保存率 100 调温后 70 13.7 111 压粒后 84 13.5 107 冷却后 28 12.1 95 黄霉素在制粒条件下稳定性 27 按推荐剂量使用牧乐旺 对目标动物及使用人员无任何不良反应对目标动物及使用人员无任何不良反应 安全性能安全性能 （一）（一） v 牧乐旺对 ICR小鼠的口服 LD50为 大于大于 5000mg/kg.b.w v 牧乐旺对大鼠的口服 LD50为大于为大于 5000mg/kg.b.w v 黄霉素对鸡口服 LD50为 8900mg/kg v 黄霉素以 4700 mg/kg剂量饲喂怀孕母兔无致畸、致癌、致突变作用 v 黄霉素以 4466 mg/kg剂量 18周周 饲喂小鼠无三致、致癌、致突变作用 v 黄霉素以 4466 mg/kg剂量 二年二年 饲喂大鼠无三致作用和繁殖毒性 v 黄霉素对使用人员安全 v 与其他药物无不良禁忌、对动物各个阶段均无毒副作用 28 按推荐剂量使用牧乐旺 在动物产品中无残留，宰前无需停药在动物产品中无残留，宰前无需停药 药代动力学表明： 黄霉素为大分子物质，分子量在 1400左右，因此 在肠道实际不吸收，不会造成动物组织中的药物残留。 v 饲喂试验（猪鸡牛兔）：以 550mg/kg剂量饲喂，组织中未见黄霉素。 v 蛋鸡 饲喂试验：以 125mg/kg剂量饲喂，蛋清、蛋黄中未见黄霉素。 v 奶牛 饲喂试验：以 800mg/头 剂量饲喂，六周后牛奶中未见黄霉素。 v 猪 饲喂试验：以 320mg/头 剂量饲喂至出栏，血液中未见黄霉素。 安全性能安全性能 （二）（二） 29 按推荐剂量使用牧乐旺 微生物安全性能良好，与其他药物无交叉耐药性，微生物安全性能良好，与其他药物无交叉耐药性， 并能有效抑制携带质粒的耐药性菌并能有效抑制携带质粒的耐药性菌 安全性能安全性能 （三）（三） 1、黄霉素与其他作用于细胞壁的药物无交叉耐药性 2、 减少沙门氏菌 、产气夹膜梭菌排出量，降低对人类健康的威胁 3、 减少 耐药质粒携带菌耐药质粒携带菌 排出，减缓 细菌耐药性细菌耐药性 传播威胁 30 正常情况下，黄霉素不能渗透进阴性菌外膜，对其作用有限。但当 某些阴性菌携带耐药质粒后， 外膜通透性发生改变外膜通透性发生改变 ，黄霉素容易进入菌 体细胞，因此对黄霉素敏感性增加。这与细菌细胞壁上具有纤毛或性伞 毛前体蛋白有关 (Watanabe et al., Proc. 7th Int. Congr. Chemother)。 体外试验证明：原本不敏感的阴性菌（包括沙门氏菌）一旦得到耐 药质粒，对黄霉素的敏感性会增加，如黄霉素对普通大肠杆菌的 MIC大于大于 64mg/L， 但对携带有质粒的大肠杆菌的 MIC为 0.125 5mg/L。 这种敏感性 变化在阳性菌也可发生，如青霉素结合蛋白（ PBP） 中的 PBP2a发生变异 后的 肺炎链球菌肺炎链球菌 对黄霉素敏感性增强 （ George B A， 1982； Sokol A et al., 1973； T Watanabe et al., 7th Int. Congr. Chemother., abstr. A-8/11, 1971； Lebek G， 1971； Spring, W. G. 1975） 。 通过抑制耐药质粒携带菌的生长繁殖，清除一些宿主体内细菌的耐 药质粒，降低其扩散速度，从而 恢复对药物的敏感性恢复对药物的敏感性 ， 有助于养殖场有助于养殖场 耐药性及疾病的有效控制耐药性及疾病的有效控制 。 31 按推荐剂量使用牧乐旺 肠道排出后不污染环境，不影响其他动植物生长肠道排出后不污染环境，不影响其他动植物生长 安全性能安全性能 （四）（四） v 黄霉素直接经肠道在粪便中原形排出。 v 黄霉素在环境中不被植物吸收。 v 黄霉素不影响沼气的发酵产生 v 试验证明： 粪便中黄霉素分子降解半衰期为 21天，在粪泥混合物中降解更 快；新鲜粪尿中 10mg/kg黄霉素有氧降解完全要 14周（在土壤混合物中需要 2周） 。 由于黄霉素能为环境中大量微生物分解，如果不是长期于 4 以下的环境，对环境威胁可以忽略（ Galvachin&Katz， 1994） 。 32 用法用量用法用量 推荐剂量 饲喂对象 效价 每吨全价饲料中的添加量（克） mg/kg 牧乐旺（ 4%） 牧乐旺（ 8%） 肉鸡肉鸡 2-5 50-125 25-63 蛋鸡、蛋鸭蛋鸡、蛋鸭 2-5 50-125 25-63 仔猪仔猪 5-20 125-500 63-250 生长肥育猪生长肥育猪 2-5 50-125 25-63 肉牛肉牛 2-10 50-250 25-125 兔兔 2-4 50-100 25-50 鲤鱼、草鱼、鲫鱼鲤鱼、草鱼、鲫鱼 2-4 50-100 25-50 鳗鱼、虾鳗鱼、虾 10-15 250-375 125-175 33 药效保证： 2年。 注意事项： 无。 包装规格： 20公斤多层纸塑袋装。 贮存方式： 室温干燥环境下原包装中密封保存。