活细胞染色专题

关键词：活细胞探针，微管，溶酶体，线粒体，飞跃的载体你绝对不容错过的多彩活细胞探针活细胞成像技术彻底革新了生物学家研究细胞、蛋白质以及众多分子之间相互作用和生理过程的方式。与固定细胞的成像研究中提供的“快照”相比，对于动态变化的观察使得人们对细胞的运作过程的认识更加深入。此外，由于活细胞成像更不容易引入实验伪影，它通常能提供比固定细胞成像更加真实可靠的信息。然而，目前市面上的但由于目前商业化的大多数性能优秀的荧光染料（例如Alexa、Atto系列）大多存在以下弊端：它们大多数具有一定的细胞毒性；染料短时间曝光，容易淬灭；大多数染料与高分辨率显微镜（如SIM,TIRF,STORM,PALM）不兼容。在Abbkine技术团队的持续努力下，我们突破了层层困难，不断精选和优化，开发出了多款不同的活细胞探针。一、活细胞微管荧光探针微管蛋白（tubulin）是微管的主要组成部分。这种细胞内圆柱形丝状结构存在于几乎所有真核细胞中。微管在有丝分裂，细胞内转运，鞭毛运动和细胞骨架中起结构和移动元件的作用。Tubulin是一种异二聚体，由α-微管蛋白和b-微管蛋白组成;两个亚基的分子量均为55kDa，具有相当大的同源性。研究最多的微管蛋白均已从脊椎动物脑中提取分离了出来。通过在免疫荧光显微镜中对微管的观察，使得研究者能够观察到超分子结构形式的蛋白质在细胞中的组织结构。该系列探针是带有荧光的可以特异性标记哺乳动物活细胞中微管的荧光探针，具有较强的水溶性和pH稳定性；该探针可实现活细胞的标记，需注意使用前细胞密度适宜及Buffer的使用浓度在适用范围以保证良好的细胞状态。该试剂盒与市售的荧光性能相比：在同等拍摄参数的HiS-SIM超分辨显微镜及Spiningdisk共聚焦显微镜成像结果对比显示，它标记效果好、抗漂白能力强。经过测试，该系列可在U2OS、Hela、MCF-7、MDA-MB-231等细胞系中实现微管特异性标记，具有较强的普适性。Fig.1.Abbkine的TraKine™ProLive-cellTubulin-trakerkit(GreenFluorescence)成像效果明亮且清晰，可以观察到细胞微管形态的动态变化。高特异性，低背景，具有完美的荧光稳定性。Fig.2.Abbkine的TraKine™ProLive-cellMitochondrionStainingkit(DeepRedFluorescencewithSuperResolution)(15µM)对活细胞和固定细胞染色结果，这个结果显示细胞固定对线粒体标记形式几乎无影响。二、活细胞溶酶体探针溶酶体（Lysosome）是动物细胞中重要的细胞器,其存在的完整性与动物生理病理均密切相关。溶酶体是单层膜围绕、内含多种酸性水解酶类的囊泡状细胞器，其主要功能是进行细胞内消化，专司分解各种外源和内源的大分子物质。细胞内的溶酶体具有异质性，形态大小及内含的水解酶种类都可能有很大的不同，标志酶为酸性磷酸酶。最新研究发现，吞噬体与溶酶体具有双向信号功能；溶酶体朝向转运囊泡的运动能力，对于降解生物大分子而言至关重要。该系列染料具有的明显优势如下：•优化的哺乳动物活细胞和固定细胞溶酶体染色方案，该产品目前已在U2OS,Hela,Cos-7,ARPE等多种细胞系测试，均能实现活细胞标记。如果样本种类不包含在以上细胞系，我们可提供针对特定细胞系的实验服务。•特别适合激光共聚焦显微镜（Confocal）及长时超分辨率显微镜（如SIM,STED,TIRF）下的活细胞研究，完美用于观察三维空间内的细胞动态。•专利染料LysOrange™高特异性，低背景，完美的荧光稳定性。•几乎无细胞毒性。Fig.2.Abbkine的TraKine™ProLive-cellLysosomeStainingkit(OrangeFluorescencewithSuperResolution)对U2OS细胞系染色的SIM结果。此图说明该试剂盒可以清晰标记活细胞的线粒体结构，同时进行超分辨率成像。相关产品推荐如下：产品名称货号染料Ex/Em(nm)规格价格（元）TraKineTMPro活细胞溶酶体染色试剂盒（绿色荧光）KTC4200490/525nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活细胞溶酶体染色试剂盒（红色荧光）KTC4210564/590nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活细胞微管染色试剂盒（绿色荧光）KTC4100500/520nm50T/250T1598/3998TraKineTMPro活细胞微管染色试剂盒（红色荧光）KTC4110652/674nm50T/250T1598/3998活细胞探针技术还有很大的发展空间，将来会应用到更多的实验领域，在生物行业发展中具有举足轻重的地位，正持续获得生物学家的关注。abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台，经过不懈努力，将多种高端生物实验的干货整理出来，后期陆续在微信公众号中刊登，请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域，致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒，以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品，从免疫学基础产品，如蛋白提取定量，到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等；细胞研究用