安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法 液相色谱常见问题解决方法

第第页安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法液相色谱常见问题解决方法安捷伦液相色谱仪常见问题及相应的解决方法：

一、安捷伦液相色谱仪常见问题柱压高

原因分析以及解决方法：

（1）缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内。先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压渐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。

（2）样品污染沉积。由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子，再用换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。

二、安捷伦液相色谱仪常见问题不稳定

原因分析以及解决方法：

原因：系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物，使得两者不能密封。

解决方法：处理工作中注意察看流动相的量，保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底，避开吸入空气，流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物，拆下单向阀，放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。

三、安捷伦液相色谱仪常见问题指示

原因分析以及解决方法：

（1）泵密封垫圈磨损。更换密封垫圈

（2）大量气泡进入泵体。在泵作用的同时，用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮忙抽出空气。

四、安捷伦液相色谱仪常见问题重复性差

原因分析以及解决方法：

（1）进样阀漏液。更换进样阀垫圈

（2）加样针不到位。保证加样针插到底，注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态，以保证进样量的精准。

（3）液量不足。

五、安捷伦液相色谱仪常见问题峰分叉

原因分析以及解决方法：

（1）色谱柱被污染。先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。

（2）柱头填料塌陷。拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分（污染的填料），装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30分钟以上。

液相色谱柱的结构说明

液相色谱柱的结构：

1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

柱接头接受低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹（国内外已规范化）。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管（Φ6.35mm）连接，中心放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸（Φ1.57mm）的连接管连接，中心也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量削减柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上（连接管通过压环后露出的管长度应严格掌控在2．5mm长或其他固定尺寸）。

在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片（或滤网），用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有确定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避开腐蚀。

2、柱填料：

液相色谱柱的分别作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱：多以硅胶为柱填料。依据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10？m的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，—NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

反相柱：紧要是以硅胶为基质，