湿热灭菌工艺的验证-标准与方法

来自www.3722.cn中国最大资料库下载湿热灭菌工艺的验证－标准与方法–

上海市食品药品监品药品监督管理局–

上海市食品药品包品药品包装材料测试所验证部来自中国最大资料库下载GMP的新•63条：任何灭菌工艺在投入使用前，都必须通过物理检测手段验证其对产品的适用性及灭菌效果，即每种被灭菌产品和物品的所有部位都达到了设定的灭菌要求，必要时还应进行生物指示剂试验，作为灭菌监控的补充手段。••64条：应对灭菌工艺的有效性定期进行再验证（每年至少一次）。设备有重大变更后，应进行再验证。应保存再验证的结果和记录。65条：所有的待灭菌物品均须按规定的要求处理，以获得良好的灭菌效果，灭菌工艺的设计应确保灭菌完全。来自中国最大资料库下载GMP的新••66条：应通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。67条：应按供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照来确认其质量。使用生物指示剂时，应采取严格措施，防止由其所致的微生物污染。••68条：应有明确区分已灭菌产品和待灭菌产品的方法。每一车（盘或其它装载设备）产品或物料均应贴签，清晰地注明品名、批号并标明是否已经灭菌。必要时，可用湿热灭菌指示带加以区分。69条：每一个灭菌批次都应有灭菌记录。应把灭菌记录作为该批产品放行的依据。来自中国最大资料库下载GMP的新••热力灭菌监测或记录的温度探头与用于控制的温度探头应分开••每次灭菌均应记录灭菌过程的时间/温度曲线应定期将独立的温度显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱对照。••应监测每种装载方式所需升温时间，且从所有被灭菌产品或物品达到设定的灭菌温度后开始计算灭菌时间。应有措施防止已灭菌产品或物品在冷却过程中遭受污染。来自中国最大资料库下载GMP的新•

湿热灭菌•

参数应包括灭菌时间、温度或压力•

应经常对腔室作检漏测试•

被灭菌物品应用合适的材料适当包扎•

直接接触产品的包装容器、灌装设备、胶塞及可能与产品接触的工器具等的湿热灭菌应采用纯蒸汽来自中国最大资料库下载国际法规和标准•

ISO

11135•

ISO

17665•

PDA

No.1

技术文件Validation

of

Moist

Heat

SterilizationProcesses:

Cycle

Design,

Development

Qualification

andOngoing

Control

Technical

Report

No.

1

(2007

Revision)•

British

Standard

BS

EN

285:2008

Sterilization­Steamsterilizers­Large

sterilizers•

EN

554•

FDA

CGMP（2004）•

EU

CGMP（2008）•

灭菌技术和验证指南－日本•

其它来自中国最大资料库下载目的•

获得有效合理的灭菌参数•

证明湿热灭菌设备对被灭菌品的适用性•

不同灭菌程序的可靠性和重现性来自中国最大资料库下载术语•

初始菌Bioburden•

湿热灭菌介质：–

饱和蒸汽–

空气­蒸汽混合气体–

过热水等•

D值/Z值•

F值（F

值）0来自中国最大资料库下载术语•

蒸汽的质量–

干燥值（Dryness

value

）–

不冷凝气体（Noncondesable

Gases

）–

饱和蒸汽（Saturated

Steam

）•

过度杀灭程序（Overkill

Approach）•

预真空程序（Prevacuum

Process）•

蒸汽－空气混合气体（Steam­

Air

Mixture）灭菌•

过热水程序（Superheated

Water

Process）•

无菌保证水平（Sterility

Assurance

Level,

SAL）来自中国最大资料库下载灭菌法选择的基本原则是是

热

不

稳定

产

品

吗

?否采

用

特

殊

方

法采

用

过

度

杀

灭

法多

孔

/固

体

物

品密

封

液

体

产

品被

灭

菌

品的

形

式

?需

考

虑

抽真

空

?需

加

压

吗

?要不要现

有

抽

真可

用

过

热水

程

序

?空

灭

菌

器

?要有无可不可脉

动

真

空

程

序重

力

置

换

程

序过

热

水

或

SAMSAM程

序任

何

湿

热

程

序来自中国最大资料库下载灭菌法选择的基本原则•

过度杀灭法。–

假设：–

N

＝1060–

D

＝1分钟121–

Z＝10℃–

将数据代入公式，得L=1，再按计算，达到微生物残存概率为一百万分之一所需的物理及生物杀灭力如下：»

物理杀灭力F

为12分钟，PHY»

生物杀灭力F

＝D

×（LogN

－Log

）＝12分钟BIO1210NF来自中国最大资料库下载灭菌法选择的基本原则•

残存概率法–

假设产品的生物负荷测试中：–

N

＝1020–

D

＝1分钟121–

Z＝10℃–

经灭菌后，微生物残存概率N

小于10­6F–

利用上面的数值，可以计算出微生物残存概率小于10­6所需的F

和F

如下：PHYBIO–

F

＝F

＝F

＝D

×（LogN

－Log

NF）＝80分钟PHYBIO1210来自中国最大资料库下载灭菌法选择的基本原则•

装载类型的界定–

考虑到装载的特性及特定装载的方式。例如，多孔/固体物品通常包括但不局限于以下物品：»

过滤器（薄膜式过滤器、筒式过滤器、预过滤器等）»

胶塞和其它聚合物密封件»

管道和软管»

工作服、口罩»

清洁用具»

设备更换部件，如药液灌装–

液体装载通常包括但不局限于以下物品：»

已灌装入最终容器（如小瓶、软包装、玻瓶或安瓿）的产品（溶液、混悬剂或乳剂）»

已检验或加工后剩下的可能含有致病菌的废液。来自中国最大资料库下载WHO

Sterilization

by

moist

heat•6.4

Sterilization

by

moist

heat

…

issuitable

only

for

water­wettablematerials

and

aqueous

formulations.

….•

6.4

湿热灭菌法…仅适用于水浸润性材料或水溶液。…程序控The

temperature

recorder

shouldnormally

be

independent

of

the制系统应独立于温度记录仪表，并配置独立的温度显示器。灭菌过程中，温度显示器的读数应与灭菌曲线记录对照。…腔室底部装有排水口的灭菌柜，有必要测定并记录该点在灭菌全过程中的温度数据。如灭菌程序中含抽真空，则应定期对腔室进行检漏试验。controller,

and

there

should

be

anindependent

temperature

indicator,

thereading

from

which

should

be

routinelychecked

against

the

chart

recorderduring

the

sterilization

period.

Forsterilizers

fitted

with

a

drain

at

thebottom

of

the

chamber,

it

may

also

benecessary

to

record

the

temperature

atthis

position

throughout

the

sterilizationperiod.

There

should

be

regular

leaktests

on

the

chamber

when

a

vacuumphase

is

part

of

the

cycle.来自中国最大资料库下载WHO

Sterilization

by

moist

heat•

6.5

The

items

to

be

sterilized,other

than

products

in

sealedcontainers,

should

be•

6.5

如被灭菌品不是最终灭菌产品，则应使用合适的材料将其适当包扎，所用材料及包扎方式应利于排除空气，有利于蒸汽穿透并能防止灭菌后的二次污染。在规定的灭菌温度和灭菌时间内，所有被灭菌品应与水或饱和蒸汽相接触.wrapped

in

a

material

thatallows

the

removal

of

air

andthe

penetration

of

steam

butprevents

recontaminationafter

sterilization.

All

parts

ofthe

load

should

be

in

contactwith

water

or

saturated

steamat

the

required

temperaturefor

the

required

time.蒸汽的潜热为540卡/克，有空气处灭菌效果差，脉动真空水喷淋等就是要解决潜热问题来自中国最大资料库下载几种常用的湿热灭菌法•

液体注射剂产品的灭菌–

空气－蒸汽混合物（SAM）–

过热水喷淋法–

重力置换法（不推荐）来自中国最大资料库下载下排式蒸汽灭菌柜（重力置换法）Gravity

Displacement

Autoclave下排式蒸汽灭菌柜工作原理图温度计压力表1、蒸汽进入蒸汽进2、高温度蒸汽比重小，在上部蒸汽档板3、蒸汽不断进入空气4、冷凝水及低温度空气在底部被挤走排放下排式灭菌柜At

equal

temperature

and

pressure,

air

is

in

fact

on

the

average

1.5

timesdenser

than

steam.来自中国最大资料库下载过热水喷淋灭菌柜-热交换器由不锈钢制造、卫生级、双功能（加热及冷却），有效，安全。湍流、速度、液体循环交换（蒸汽和冷却水）自动实现热交换器内部的清洁。控制柜CA除菌过滤器卫生离心泵：保持水的高速循环，这对实现温度的均一性至关重要。来自中国最大资料库下载过热水喷淋/温度­压力曲线Temperature/Pressure

ChartHot

Water

Shower

Process2.52.01.51.0140120排气Fo100806040200.500020406080100120Time

(min)来自中国最大资料库下载Hot

water

spray

sterilizer•

本图为旋转式喷淋灭菌柜•

水喷淋­高效热交换，程序短喷淋管•

可用于乳剂、氨基酸等•

配外部双管板热交换器门密封条•

过程：进PW→蒸汽加热循环水→

在过压保护条件下→

水喷淋产品

达到灭菌温度

保→­温→冷却→平衡压力­出料•

转速：1­5转/分传动装置•

产品温差可控<±0.5℃hot

water

spray

sterilizer

withRotating

Cage

for

fat

emulsions,etc.纯化水来自中国最大资料库下载过热水旋转喷淋灭菌程序Filling

PW进PW到设定液位Sterilizing灭菌＋压缩空气Heating逐步加热＋加压缩空气Initialization程序开始Cooling冷却Safety

exhaust

check<

±0.1

bar安全压力检查Safety

coolingCheck

<

80℃安全温度检查Draining排放气/水End

of

program程序结束来自中国最大资料库下载SAM-灭菌柜-流程示意Steam：蒸汽Sterile

filter：除菌过滤器Reference

bottle：参照瓶Heat

exchanger：热交换器Pressure

vessel：压力容器Fan：风叶（非金属）PT

100：温度探头Cooling

water：冷却水Cold

water：冷冻水（~7

℃

）Condensate：冷凝水Spray

Condensate：喷淋冷凝水Drain：排放口来自中国最大资料库下载eTemperature­PrssureChartSA­Mixture

ProcessSAM混合气体灭菌温度­压力曲线1401202.52.01.51.0Fo1008060冷却时间长40200.500020406080100120Time

(min)红线为压力：兰线为温度来自中国最大资料库下载灭菌中的压力平衡•

玻璃瓶•

软包装–

目的是不让水汽化–

要保护PP类塑料包装不变形、不受损坏，特别是在冷却阶段，当溶液温度较高、外部处冷却阶段时–

有一定的保持包装作用–

充气要求比较低，一般可控制在~2巴左右–

开始时压力也不宜过大，–

如加蒸汽，总压在2巴左要考虑到对虚焊的影响右–

压力控制要求比瓶子的要–

压力的设定还取决于产品高一些来自中国最大资料库下载Equipment

sterilizer适用对象程序随被灭菌品的特性而定•

Equipment

parts•

Textiles•

Rubber

stoppers•

Glass

&

plasticbottles•

Plastic

bags•

Blister

packs•

Contact

lenses•

Glass

&

plasticsyringes

(emptyor

filled,

wrappedor

over­wrapped)•

Utensils•

Infectious

waste•

Aluminum

caps•

Ampoules•

Vials来自中国最大资料库下载用于多孔/固体物品灭菌器灭菌程序抽真空>

­0.07MPa进蒸汽：

运行3次过滤器与胶塞、仪表和电器连线等••

工作服•

手套至设定的灭菌温度121℃保温至

•

口罩设定的时间•

过滤器排气•

灌装器具抽真空干燥约15分钟进过滤气体平衡压力程序结束来自中国最大资料库下载脉动真空蒸汽灭菌程序Steam­Pulsing

Sterilizers预真空升温保温降温干燥排气

结束1211001

2

3脉动真空：抽真空-进蒸汽-抽真空-进蒸汽温度真空来自中国最大资料库下载灭菌工艺的验证及其验证文件•

DQ–

在选用蒸汽灭菌器时，首先应根据产品的工艺来考虑蒸汽灭菌器的选型，主要是装量的大小、灭菌温度与时间的可控制性、灭菌程序的可选择性、灭菌时腔室内温度的一致性、升温与降温速率的稳定性、控制及记录系统的可靠性等。•

首先对所选灭菌器进行确认（IQ/OQ）–

例如：»

空气过滤器的泄漏