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支原体污染及防治从门外汉角度谈—11支原体污染易被忽视1.培养液可不发生混浊2.细胞病理变化轻微或不显著3.细微变化也可由于传代，换液而缓解。4.个别严重者，可致细胞增殖缓慢，甚至从培养器皿脱落22支原体高污染率国内外研究表明，在细胞培养中，支原体感染率达到30-60%支原体污染已成为世界问题！33333333支原体的生物特性◆是目前发现的最小细胞，直径约为0.13-0.18μm。◆无细胞壁，不能维持固定的形态，变形能力大。◆革兰氏染色不易着色或呈阴性。◆胞膜中含有胆固醇或其他甾醇。◆多数支原体适合在偏碱性条件下生存（pH值7．6~8．0），对酸耐受性差。◆对热比较敏感，对一般抗生素不敏感。4支原体污染的类型口腔支原体(M.orale)精氨酸支原体(M.arginini)猪鼻支原体(M.hyorhinis)发酵支原体(M.fermentans)梨支原体(M.pirum)莱氏无胆甾原体(A.laidlawi）5支原体污染的来源操作者无菌操作技术不当、污染之培养基、血清、细胞等。操作室环境不佳、实验器具不洁。6科研人员的困惑有些实验结果仅能在支原体阳性的细胞中得到也曾有利用肿瘤细胞制备的单克隆抗体实为针对所污染的支原体的抗体。还有的科研成果,他人无法重复,也因所用细胞有支原体污染所致。实验结果真实性和可靠性大大下降7支原体污染对细胞的影响

1、影响细胞的生长状态及形态支原体可使培液中支持细胞生长的营养物质含量减少，造成细胞生长缓慢甚至停止；另外还会导致细胞微管解聚，引起细胞一系列病变，表现为细胞收缩、贴壁细胞脱落、裂解等。8支原体污染对细胞的影响9

支原体污染对细胞的影响2.影响细胞的代谢和功能（1）培液中的精氨酸被支原体大量消耗，引起细胞蛋白质、DNA、rRNA、mRNA的合成障碍；（2）支原体活动使培液成分发生改变（如发酵型支原体降解糖类产生酸性物质），影响细胞代谢。（3）支原体吸附在细胞表面，破坏细胞膜的完整性，影响细胞信号传递；10支原体污染对细胞的影响（4）支原体消耗细胞的核苷库—染色体异常1112支原体污染对细胞的影响3、其他此外，支原体污染还会影响一些病毒在细胞中的产量、使恶性细胞致癌能力下降、影响淋巴细胞分化等。13支原体污染的检测方法培养法DNA荧光染色法聚合酶链反应(PCR)法

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