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文档简介
微生物控制控程度分类1第1页,课件共60页,创作于2023年2月第一节实验动物微生物控制分级按微生物学控制标准或微生物净化程度,分为五类:普通动物(Conventionalanimal,CVA)清洁动物(Cleananimal,CLA)无特定病原体动物(Specificpathogenfreeanimal,SPFA)悉生动物(Gnotobioticanimal,GNA)无菌动物(Germfreeanimal,GFA)2第2页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—普通动物普通动物(Conventionalanimal,CVA)定义:未经严格微生物和寄生虫控制,饲养在开放系统中,体内外不携带有质量标准规定的人畜共患病病原体和动物烈性传染病病原体的动物,是在微生物学控制上要求最低的动物。常见有豚鼠,地鼠,兔,犬,猴,不设普通级大鼠,小鼠。饲养条件:开放系统来源:经微生物学检查不带有上述病原体的动物,最初来源于无菌动物,悉生动物,SPF动物或普通动物刨宫产。3第3页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—普通动物微生物学特点
要求不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病病原。饲养管理
饲养于开放系统。但仍然对温度,湿度,饲料,垫料,饮水,卫生等有一定控制。生理学特点外观健康,饮食排泄正常,无异常分泌物,无临床症状,脏器无眼观病灶。
4第4页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物质量控制第5页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—普通动物普通实验动物的应用仅可作为生物医学中教学示教之用作为某些科学研究为探索方法而从事的预试验之用不可供科研、生产和检定之用。6第6页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—清洁动物清洁动物(Cleananimal,CLA)定义:饲养在半屏障系统中,除普通级动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的实验动物,又称二级动物。常见有小鼠,大鼠,豚鼠,地鼠和兔。不设清洁级犬,猴标准。饲养条件:半屏障系统内来源:SPF动物或无菌动物或悉生动物或普通级动物刨宫产。7第7页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—清洁动物微生物特点:
1、清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和寄生虫多,但比SPF动物少。
2、清洁级动物除肉眼观察无病外,尸体解剖时,主要脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织切片均应无病变。8第8页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物质量控制第9页,课件共60页,创作于2023年2月饲养管理:
1、清洁级动物饲养于温湿度恒定的半屏障系统中。2、其所用的饲料、垫料、饮用水、笼器具等都经过消毒灭菌处理。3、工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。实验动物微生物控制分级—清洁动物10第10页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—清洁动物应用:
1、清洁级动物是根据我国国情而设立的等级动物,它较普通级动物健康,又较SPF级动物易达到质量标准。2、在动物实验中可免受动物疾病的干扰,其敏感性与重复性亦较好。是目前我国主要使用的质量控制等级的动物,已被广泛地应用于生命科学研究、新药研制和安全评价等领域的动物实验之中。11第11页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—SPFA无特定病原体动物(Specificpathogenfreeanimal,SPFA)定义:指在屏障系统或隔离系统饲育的、经检测体内外无质量标准规定的特定病原微生物和寄生虫存在,但可携带非特定的(未知的)微生物和寄生虫的动物。常见有小鼠,大鼠,豚鼠,地鼠,兔,犬,猴等。饲养条件:屏障系统内大规模生产/隔离器内保种来源:1、将无菌动物转移到屏障系统中饲养繁殖2、无菌动物剖宫取胎后在隔离屏障设施中由SPF亲代
抚养。12第12页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—SPFA微生物特点:SPF动物除普通级、清洁级动物应排除的病原体外,不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的病原。饲养管理:SPF动物必须饲养在温度湿度恒定的空气净化的屏障系统中,实行严格的微生物控制。13第13页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物质量控制第14页,课件共60页,创作于2023年2月1、国际上公认SPF动物适用于所有科研实验,是国际标准级别的实验动物,实验结果可靠。(1)避免病原体的隐性感染或潜伏感染对实验结果的干扰。(2)避免某些条件性致病菌对实验结果的干扰。2、各种疫苗生产所采用的动物应为SPF动物。实验动物微生物控制分级—SPFASPF动物的应用铜绿假单胞杆菌15第15页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—无菌动物无菌动物(Germfreeanimal,GFA):指在隔离系统饲育的,经检测体内外无可检出的任何微生物和寄生虫的实验动物。常见有小鼠,大鼠,豚鼠,地鼠和兔。饲养条件:无菌隔离器内来源:第一代通过无菌剖腹产术,人工哺乳获得;以后通过无菌动物雌雄交配繁殖或无菌剖腹产术,保姆鼠代奶扩群。16第16页,课件共60页,创作于2023年2月无菌隔离器内隔离室洁净度达到100级17第17页,课件共60页,创作于2023年2月18第18页,课件共60页,创作于2023年2月人工培育理论基础——胎盘对微生物具有屏障作用获取方式:无菌条件下取仔,一切操作在无菌隔离器中进行无菌剖宫产,人工哺乳或无菌母鼠代乳实验动物微生物控制分级—无菌动物19第19页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—无菌动物无菌动物的特点微生物特点:1、在动物体内外任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫。此微生物指病毒、立克次体、细菌(包括螺旋体、支原体)、真菌和原虫。2、“无菌”是个相对的概念,只是根据现有的科学知识和检验方法在一定时期内不能检出病原体而已。随着科学技术的发展,现在认为是无菌的动物或许将来可以检出病原体而不是无菌动物。20第20页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—无菌动物无菌动物的特点体重增长速度较慢,性成熟稍晚,产仔少,成活率高,寿命延长等。项目两种动物比较项目两种动物比较寿命GF>CV性成熟期晚GF>CV早期增长GF<CV产仔数GF<CV摄食和饮水量GF≧CV仔畜成活率GF>CV21第21页,课件共60页,创作于2023年2月无菌动物的应用微生物学中的研究:微生物间的拮抗作用免疫学研究中的应用:
无菌动物体内既无抗原也无特异性抗体,处于一种“原始状态”,很适合用于各种免疫功能的研究。肿瘤学研究,如:苏铁素老年病学研究:无菌动物寿命比普通动物长,说明微生物和机体老化有关22第22页,课件共60页,创作于2023年2月无菌动物的应用营养学的研究:无菌动物是研究营养的良好模型,很多营养成分是靠细菌产生的。如VB和VK是靠肠道细菌合成的,无菌动物体内不能合成VB和VK,所以可以用来研究哪些细菌合成了哪些维生素。毒理学研究研究发现青霉素过敏是因为肠道菌代谢引起,而非青霉素本身。23第23页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—悉生动物悉生动物(Gnotobioticanimal,GNA)定义:又称已知菌动物,在隔离系统饲育的,经检测其体内外仅有经人工有计划接种已知微生物或寄生虫的动物。饲养条件:无菌隔离器内来源:人为将已知的微生物投给无菌动物,使其体内带有已知菌单菌动物双菌动物多菌动物24第24页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物控制分级—悉生动物悉生动物的特点1、携带有已知菌2、与普通动物相比:无微生物刺激,淋巴系统发育不全,体液和细胞防御系统不如普通动物,易感染疾病3、与无菌动物相比:
悉生动物肠道内存在细菌可以合成维生素,不会像无菌动物一样发生维生素缺乏症。抵抗力、生活力较强,易于饲养管理。4、饲养管理:必须饲养在温湿度恒定的空气净化的隔离系统中,实行严格的微生物控制。25第25页,课件共60页,创作于2023年2月人工培育借助哺乳动物胎盘的屏障作用,临产前进行剖宫进化,消除各种寄生虫和生命体,将幼崽饲育在无菌屏障系统中,经人工哺乳或代乳培育出无菌动物,再向无菌动物有计划接种一种或几种已知菌。实验动物微生物控制分级—悉生动物26第26页,课件共60页,创作于2023年2月悉生动物的应用悉生态或微生态学研究免疫学研究无菌动物抵抗力弱,而悉生动物抵抗力强抗体制备研究普通动物难制备较纯抗体无菌动物免疫系统处于休眠期27第27页,课件共60页,创作于2023年2月悉生动物的应用克山病病因学研究缺乏硒引起or镰刀状黄曲霉菌引起?验证:植入黄曲霉菌动物结果:动物症状与克山病病人症状相似硒不足加重病情其他方面研究人和动物骨髓移植,肿瘤治疗及其病毒学,营养代谢,生理学,外科病人感染控制等28第28页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物微生物质量控制第29页,课件共60页,创作于2023年2月
不同微生物学等级的实验动物比较项目GFSPFCV传染病无无有或可能有寄生虫无很少有或可能有实验结果准确较准确有疑问应用动物数少量少量多或大量长期实验效果可能好可能好困难死亡率很低低高长期实验存活率约100%约90%40%左右实验准确设计可能可能不可能实验结果的价值很高高有疑问30第30页,课件共60页,创作于2023年2月第二节实验动物常见感染性疾病实验动物感染性疾病概念:实验动物常见感染性疾病包括——人兽共患病、动物烈性传染病、一般性疾病、寄生虫疾病。人畜共患病——指人类也可感染发病的一类动物疾病。31第31页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-人畜共患病导致人兽共患病的主要病原体:病毒:流行性出血热病毒、狂犬病病毒、猴疱疹病毒等。细菌:沙门氏菌、布氏杆菌、志贺氏菌、结核分枝杆菌等。真菌:皮肤病原真菌等。寄生虫:弓形体、钩端螺旋体病等寄生虫32第32页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-烈性传染病病毒:鼠痘病毒(小鼠脱脚病病毒)、兔出血症(兔瘟)病毒、犬细小病毒(急性出血性肠炎)、犬瘟热病毒等。一般疾病病原体:
病毒:小鼠肝炎病毒、仙台病毒、猴D型反转录病毒等。细菌:多杀巴氏杆菌、泰泽氏菌、鼠棒状杆菌、肺支原体等。寄生虫:多种体内外寄生虫。33第33页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病淋巴细胞性脉络丛脑膜炎(人畜共患病)传染源:淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。带病毒野小鼠或实
验小鼠为传染源。传播途径:带病毒小鼠的分泌物、排泄物污染,吸血昆虫传
播,胎盘垂直传播。易感者:人,小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗、鸡等。症状:实验动物多呈隐性感染,人感染后表现类似流感样症状第34页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病淋巴细胞性脉络丛脑膜炎(人畜共患病)诊断:小鼠为隐形感染,不表现出症状。可进行患病动物血清,脑脊液或病变组织接种在SPF级小鼠内,4~5天死亡。也可进行组织学的检测。预防:防止野小鼠或感染小鼠进入实验动物室与实验室。加强血清学检测,消灭带病小鼠。35第35页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒外形:呈圆形,或椭圆形,形似沙粒。结构:由包膜和单链RNA组成。特性:易被热(56℃)、紫外线、酸、碱、脂溶剂等灭活。36第36页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病流行性出血热(EHF)
/肾综合征出血热(人畜共患病):传染源:流行性出血热病毒(汉坦病毒)。带病毒黑线姬鼠和褐家鼠为主要传染源,实验大鼠也偶尔传播。传播途径:污染尘埃飞扬形成气溶胶吸入感染。带病毒的血、尿污染人皮肤破损处,也使人患病。吸血昆虫传播。易感者:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔。症状:动物感染不发病。人感染后出现高热、出血、休克、肾功能受损和循环衰竭,严重者死亡。37第37页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病病毒示意图人感染流行性出血热人感染症状三痛:头痛,眼眶痛,腰痛三红:脸,脖子,胸部红肿低血压,少尿期,闭尿期,多尿期38第38页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病流行性出血热(EHF)(人畜共患病):诊断:血清特异性抗体检测或是在感染大鼠的肺部组织中检查到特异性病毒抗原。常用方法酶联免疫吸附法(ELISA)或免疫荧光抗体实验预防:消灭野鼠,定期做血清学检查。39第39页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病EHF已构成的危害1999年博士后张某进入某大学博士后流动站从事“九五”国家攻关课题——补肾法治疗老年性痴呆的实验时与实验用大鼠接触,三个月后感染鼠源性流行性出血热,至2003年被诊断为肾功能衰竭,2006年进行肾移植手术。40第40页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病EHF已构成的危害2001年6月,正当我国“申奥”的关键时刻,北京发生了因使用质量不合格实验动物和动物实验不规范致使鼠源性人兽共患病流行性出血热感染一名院士死亡和700多师生紧急预防接种的重大事件。消灭了所有普通级的实验大小鼠。提高标准,修订实验动物管理法规。41第41页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病鼠痘(小鼠传染性脱脚病)(烈性传染病)传染源:鼠痘病毒(DNA病毒)。患病或带病毒小鼠是传染源。传播途径:接触病鼠的渗出物、分泌物及其污染的物品。易感者:小鼠,幼鼠和衰老小鼠敏感,呈致死性。症状:小鼠肢体和尾巴严重水肿,溃疡,最后坏死脱落。诊断:症状,病毒分离鉴定,血清学检查预防:定期做血清学检查,防止带病鼠进入实验动物房,接
种牛痘疫苗可防止此病.42第42页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病狂犬病(恐水症)(人畜共患病)传染源:狂犬病病毒,狂犬,携带病原的猫,猪及牛,马等。无症状动物可通过唾液排毒,成为主要传染源。传播途径:主要通过咬伤传播。唾液通过伤口等入侵。易感者:人和各种畜类对本病都有易感性,尤其犬科和猫科
动物。症状:动物感染表现出狂暴型或麻痹型。人感染后恐水,怕风,恐惧不安等43第43页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病狂犬病(恐水症)(人畜共患病)诊断:尸检动物脑组织内基氏小体预防:人被犬和猫咬伤后,必须24h小时内注射狂犬疫苗。观察可疑动物,病死动物应焚埋。捕杀野犬,管理和免疫家犬及家畜。44第44页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-病毒性疾病狂犬病病毒弹状病毒,遗传物质为单链RNA,表面有质膜蛋白对过氧化氢,高锰酸甲等敏感,100℃加热2min或紫外线照射灭活耐低温45第45页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物细菌感染归纳起来包括三个方面:人兽共患病原菌和动物致病菌
这类细菌中代表性的是沙门氏菌、志贺氏菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌等,不仅可以引起实验动物的严重疾病,而且也是人类的重要致病菌,应予以排除,确保人与动物的安全。条件性致病菌当动物在某些诱因的作用下,机体抵抗力下降,导致疾病发生,甚至流行。条件性致病菌对动物的影响相对比较严重。正常菌群的细菌(菌群失调)各种细菌即使是正常菌群,在动物体内的存在都会影响其生理参数和实验的重复性。这些变化又可将对动物结果产生不同程度的干扰和影响。实验动物常见感染性疾病-细菌性疾病46第46页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-细菌性疾病沙门氏菌病(人畜共患病)传染源:沙门氏菌。携带该菌的野鼠、苍蝇、动物粪便,病鼠是传染源。传播途径:粪便污染垫料、饲料、饮用水后,经消化道感染。易感者:大鼠、小鼠、豚鼠、兔。症状:食少和腹泻,急性暴发型可导致动物迅速死亡。诊断:症状,细菌培养。预防:严防野鼠,防止苍蝇,粪
便污染,隔离淘汰病鼠、
病兔。47第47页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-支原体疾病支原体疾病传染源:支原体(肺支原体、溶神经支原体和关节炎支原体),
患病或携带病原体的小鼠、大鼠。传播途径:带菌母鼠舔仔鼠,气溶胶传播,经污染笼具间接接触。易感动物:大鼠、小鼠。症状:肺支原体(呼吸系统疾病:鼻炎、肺炎,并发中耳炎-“歪头病”。母鼠死胎或不育)溶神经支原体(小鼠旋转病)关节炎支原体(大鼠多发性关节炎)48第48页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-支原体疾病支原体革兰氏阴性,形态多样,大小不一无细胞壁,细胞质表面有3层细胞膜在琼脂培养基上能形成0.5mm直径的荷包蛋形菌落。49第49页,课件共60页,创作于2023年2月50实验动物常见感染性疾病-巴斯德杆菌病巴斯德杆菌病传染源:巴斯德杆菌(多杀巴斯德杆菌,嗜肺巴斯德杆菌)
病兔和带菌啮齿类如豚鼠,大鼠,小鼠等。传播途径:直接接触患病动物,间接接触患病动物分泌物,粪便污染
物,或垂直传播给子代。易感动物:兔,最为敏感,其次为豚鼠,小鼠、大鼠。症状:多杀巴斯德杆菌(出血性败血症)嗜肺巴斯德杆菌(大小鼠肺炎、中耳炎、结膜炎、皮下溃
烂、引起尿道,生殖道疾病)
第50页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-巴斯德杆菌病巴斯德杆菌革兰阴性短杆菌,无荚膜发病机制:从伤口侵入,快速繁殖,引起强烈的炎性反应,导致伤口出现红肿,当宿主抵抗力降低时,可引起出血性败血症。
第51页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-寄生虫疾病寄生虫疾病:体外寄生虫螨,跳蚤,虱子体内寄生虫弓形虫,蠕虫,原虫52第52页,课件共60页,创作于2023年2月实验动物常见感染性疾病-寄生虫疾病弓形体病(人畜共
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