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碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被PropidiumIodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡的分析。碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)主要由PI、破膜剂等组成，经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。组成：名称编号DAO028StoragePIStain(1mg/ml)1ml-20°C避光使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、细胞样品的制备：⑴贴壁细胞：收集上述细胞悬液到离心管内。4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50pl培养液，以免吸走细胞。加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50plPBS，以免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。⑵悬浮细胞：4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50pl培养液，以免吸走细胞。加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50plPBS，以免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。2、细胞的固定：加入1ml冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4弋条件下固定2h或更长时间。4弋固定12-24h可能效果更佳。

3、细胞的清洗：4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50pl溶液，以免吸走细胞。加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。4弋离心，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50plPBS，以免吸走细胞。4、PI染色：在每个待检细胞样品中加入500pl配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于37°C避光水浴30min。5、检测与分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞DNA或RNA含量分析和光散射分析。注意事项：1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。4、如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，才可以进行检测。相关：编号名称CC0007磷酸缓冲盐溶液（10XPBS，无钙镁）DA0001DAPI染色液(5ug/ml)DA0020Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒DA0065台盼蓝染色液（0.4%）DC0032Masson

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