微生物学微生物培养基的配制灭菌

微生物学微生物培养基的配制灭菌第一页，共二十二页，2022年，8月28日课堂纪律严格遵守实验室规章制度严肃课堂纪律不允许无故旷课、早退迟到工作服第二页，共二十二页，2022年，8月28日进入微生物实验室的注意事项1.进入实验室必须穿白大褂2.实验室内不准吃东西3.在实验室内不要趴在桌子上4.实验完成后值日生留下做好清洁工作（值日工作实行组长负责制，纳入实验成绩）5.离开实验室前洗手6.实验现象要隔天观察的实验，必须要按时到实验室记录实验现象第三页，共二十二页，2022年，8月28日实验安排实验一微生物培养基的配制和灭菌实验二微生物的纯培养技术实验三显微镜油镜的使用及细胞形态的观察实验四环境因素对微生物的影响实验五放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察实验六水的细菌学检查，土壤微生物的分离实验七微生物生理生化反应观察试验八微生物遗传实验试验九药物的体外抗菌实验及口服药物的细菌检查实验十操作考试第四页，共二十二页，2022年，8月28日实验报告要求一个实验，一份实验报告，有连续性的实验等到做完后再写实验报告。实验报告内容：

1.实验项目名称

2.实验目的

3.实验原理

4.实验步骤

5.实验结果与分析（即使实验失败也要写好分析）

6.思考题第五页，共二十二页，2022年，8月28日实验微生物培养基的配制和灭菌及纯培养第六页，共二十二页，2022年，8月28日一、微生物培养基的配制和灭菌目的要求实验材料实验程序第七页，共二十二页，2022年，8月28日1、目的了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。第八页，共二十二页，2022年，8月28日2、材料和器皿主要药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、营养琼脂等。仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、紫外线杀菌灯。其它：天平、药匙、电炉、1mol/LHCl、1mol/LNaOH、pH试纸、三角烧瓶、量筒、玻棒、试管、培养皿、吸管、牛皮纸、纱绳、硅胶塞、标签等。第九页，共二十二页，2022年，8月28日3、方法和步骤培养基的配制培养基和玻璃器材的灭菌方法第十页，共二十二页，2022年，8月28日培养基的概念及种类培养基的配方、配制步骤（1）培养基的配制第十一页，共二十二页，2022年，8月28日培养基是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。培养基的介绍碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水营养物质的浓度要适宜营养物质之间的配比要适宜培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件要适宜。第十二页，共二十二页，2022年，8月28日细菌：pH7.0~8.0放线菌：pH7.5~8.5酵母菌：pH3.8~6.0霉菌：pH4.0~5.8藻类：pH6.0~7.0原生动物：pH6.0~8.0初始pH通常培养条件：第十三页，共二十二页，2022年，8月28日培养基的种类按照培养基的物理状态可分为1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基。3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。第十四页，共二十二页，2022年，8月28日

琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。第十五页，共二十二页，2022年，8月28日实验室的常用培养基：细菌：牛肉膏蛋白胨培养基；放线菌：高氏1号合成培养基培养；酵母菌：麦芽汁培养基；霉菌：查氏合成培养基；第十六页，共二十二页，2022年，8月28日培养基的配制配方、配料加热溶解调pH(略)过滤（略）分装(倒平板不分装）灭菌包扎(试管放在烧杯)摆斜面、倒平板贮存第十七页，共二十二页，2022年，8月28日牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、液体培养基2、固体培养基3、半固体培养基第十八页，共二十二页，2022年，8月28日牛肉膏蛋白胨固体培养基配方(P.64)：牛肉膏0.3g蛋白胨1g氯化钠0.5g琼脂1.5g

水100mLpH7.2~7.4灭菌121℃，20min牛肉膏蛋白胨半固体培养基配方：

琼脂0.3g牛肉膏蛋白胨液体培养基配方：

琼脂0g第十九页，共二十二页，2022年，8月28日牛肉膏蛋白胨