备课素材：微生物培养和应用常见知识盲点 高二下学期生物人教版选修1

微生物培养和应用常见知识盲点高中生物学选择性必修三有些内容是学生和教师感觉比较迷茫的。学生对填空题的错误率尤其高，关键可能和动手做实验有关，即使做了实验也不一定掌握很全面。关键是教材内容不显影或是过于简略。学生在学完后尚有一些知识盲点。常见知识盲点

1.常用的灭菌方法－与消毒和杀菌的区别学生在回答灭菌的时候有时会混淆生活中的习惯用法，如酒精应该是消毒，泡菜制作时加白酒也是杀灭杂菌，相当于消毒。在微生物学中，灭菌是有严格要求的。如下所示的就是常用的灭菌方法：不是所有的实验都要无菌操作的，如果在无菌条件下需要酶也是属于过滤灭菌，过滤灭菌的玻璃砂漏斗有不同的规格，不能通过细菌的是G6玻璃砂漏斗。另外，尿素培养基并不是说都是过滤灭菌，只有尿素才是过滤灭菌，其他的成分都是需要高压蒸汽灭菌。对无菌室、超净台和实验服可采用紫外线灭菌法（也有说法该方法是消毒法）。2.划线分离法需要注意的问题（1）操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束后，仍然需要灼烧接种环。（2）在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，冷却的办法可以让接种环轻轻轻触碰培养基，以免接种环温度太高，杀死菌种。另外，接种也可以用接种针。（3）在进行第二次以及其后的划线操作时，要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始划线，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落（表述的规范用语）。3.计数时的误差原因分析计数时有时会产生误差，原因是在涂布分离法中，可能会发生多个微生物形成一个菌落的情况，因此涂布分离法统计的大肠杆菌数目会比实际值偏小。当然，还有一种说法是菌落只能是活菌才能生长，死亡的菌无法统计。如果在显微镜下计数，死亡的菌也是计数在内的。4.酚红和酸碱指示剂酸碱指示剂是检验溶液酸碱性的常用化学试剂，教材中的酚红和酚酞是有一定的区别的，详见文章后的链接，有时在回答问题时可以回答酸碱指示剂。主要有四类：（1）硝基酚类：一类酸性显著的指示剂，如对-硝基酚等。（2）酚酞类：有酚酞、百里酚酞和α-萘酚酞等，它们都是有机弱酸。（3）磺代酚酞类：有酚红、甲酚红、溴酚蓝、百里酚蓝等，它们都是有机弱酸。（4）偶氮化合物类：有甲基橙、中性红等，它们都是两性指示剂，既可作酸式离解，也可作碱式离解。5.筛选目的菌株的方法教材中出现了尿素为唯一氮源的培养基，是一种选择培养基，同时加了酚红也可以说同时也是鉴别培养基（教材中没具体出现鉴别培养基，可以不需要补充）。以下是筛选目的菌株的方法：6.透明圈和菌落直径大小高考考过菌的分解能力大小怎么判别的问题，严格地说是透明圈的直径和菌落直径的比值越大，说明菌的分泌物质能力或分解能力大，但有时按照试题的要求可能只要答透明圈大即可。不过要说明菌落生长情况，那么，只需要答菌落大即可。试题解析

试题1：在培养微生物时必须进行无菌操作，以下操作错误的是()A．各种器皿灭菌前均需用牛皮纸或报纸包好B．实验用具经灭菌后即可放在超净台上备用C．将培养基转移到三角瓶和试管中时必须用三角漏斗D．G6玻璃砂漏斗使用前要在121℃下进行高压蒸汽灭菌解析:各种器皿灭菌前均需用牛皮纸或报纸包好，培养皿可以几个包在一起，A正确；实验用具经灭菌后取出后放在超净台上，需要打开紫外灯和过滤风灭菌30min，B错误；将培养基转移到三角瓶和试管中时必须用三角漏斗，以防止污染，C正确；有些不能加热灭菌的化合物，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，G6玻璃砂漏斗使用前要在121℃下进行高压蒸汽灭菌15min，D正确。故答案为B。试题2：(2019·全国卷Ⅱ，37)物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是

。（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌，应该选择

菌落进一步纯化，选择的依据是

。（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即

_。（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加

，三处滴加量相同。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈。说明

；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明

。答案：（1）W（2）乙乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W（3）将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源（4）①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解W的能力相近解析：（1）要从土壤中分离出能降解含氮有机物W的目标菌，所用选择培养基应以该特定物质W为氮源。（2）图示信息显示，在乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W，若要得到目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化。（3）若要通过设计实验确定甲、乙两种细菌能否利用空气中的氮气作为氮源，需将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若某细菌