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电话:400-998-2324邮箱:service_uplc_ms@163.com网址:本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!-上海液质检测技术有限公司第第页ABTS自由基清除能力检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4571规格:100T/48S

微量法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。试剂名称规格保存条件提取液液体80mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1支2-8℃保存试剂三液体20μL×1支2-8℃保存试剂四液体1.5mL×1支-20℃保存试剂五粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前加入1mL蒸馏水,充分溶解;用不完的试剂可分装后保存,-20℃可保存四周,避免反复冻融;、试剂三工作液的配制:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前根据样本量按试剂三(μL):蒸馏水(mL)=1μL:12mL的比例配成试剂三工作液,现用现配,用多少配多少,尽量在4h之内用完;3、试剂四工作液的配制:可先将试剂四-20℃分装保存。临用前根据样本量按试剂四:试剂一(V:V)=1:9的比例配成试剂四工作液,现配现用,用不完的试剂放于-20℃可保存两周。45mgC2.8mL提取液,充分振荡溶解;10mmol/LC溶液,用于阳性对照。2-8℃可保存两周。5ABTS(V:V:V)=76:5:4的比例ABTS工作液,现用现配,室温避光保存,30分钟内使用。产品说明:ABTSABTS经氧化后生成稳ABTS405nm734nmABTSABTSnmABTS自由基的能力。ABTS

H2O2

ABTS·+(405nm)

Antioxidants

ABTS注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品:可见分光光度计//96/30~50目筛、冰、蒸馏水。操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)160℃(或粉碎机粉碎30~500.05g1mL40℃30min;10000rpm10min,取上清,置于冰上待测。2、红酒、果汁等液体样本:吸取100μL样本溶液加入900μL提取液,旋涡振荡混匀,室温10000rpm离心10min,取上清,置冰上待测。3、提取物或者药物:可用提取液配制成一定浓度,如5mg/mL。注意:ABTS自由基的能力可能相差很大,为保证实验结果的准确性,样本要根据预实验结果进行适当调整(90%5%,建议加大烘干样本质量或液体样本体积进行提取。二、测定步骤分光光度计/30min405nm,分光光度计用蒸馏水调零。序号稀释前浓度(mmol/L)C(µL)提取液体积(µL)稀释后浓度(mmol/L)110100900121160400.831120800.641801200.451401600.26序号稀释前浓度(mmol/L)C(µL)提取液体积(µL)稀释后浓度(mmol/L)110100900121160400.831120800.641801200.451401600.261201800.1备注:实验中每个标准管需10µL维生素C溶液。96EP管中分别加入下列试剂:试剂名称(μL)空白管测定管对照管阳性对照管上清液-1010-不同浓度的VC溶液10蒸馏水10试剂四工作液2020-20ABTS工作液170170-170试剂一--190-6min405nmA空白、A测定、A对照、A阳性1-2次。三、ABTS自由基清除率的计算阳性对照的自由基清除率计算公式:ABTS自由基清除率DVC%=[(A空白-A阳性对照)÷A空白]×100%。样本的

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