育种winrar压缩文件第12章单倍体

1、第12章雌核发育和雄核发育第一节雌核发育一雌核发育的概念（假受精）雌核发育：合子的发育是在卵子细胞核的控制下完成的二 精子染色体的遗传失活和雌核发育的诱导经过精子的遗传失活和卵子染色体的二倍化 (一) 获得遗传上失活的精子1、化学药品处理 甲苯胺兰、乙烯脲吖啶黄等处理可以使精子遗传失活，进而诱发雌核发 育，只是需要找出适当的处理浓度和处理时同。2、射线处理：紫外线、X射线或射线等处理后的失活精子来“受精”可用r射线直接照射精液原液(O51厘米，剂量15万伦琴，可获得雌核单倍体。有的用r射线照射精液其剂量为10万拉德，剂量率182拉 德秒r射线与x射线具有较好的穿透力，便于大量 精子的处理，它们

2、主要诱发染色体断裂，辐射剂量要低，低温可延长精子受精活性，辐射过的精子比正常精子比正常精子活性差，因此，不宣保存太久，最好辐射后及时进行人工授精。紫外线辐照较易操作，比r射线和射线危险性小，紫外线设备廉价，但它的缺点是穿透力弱，处理时必须注意到精液不能铺得太厚，并且紫外线照射DNA有光复活作用，要在暗处处理。3、杂交诱导三、雌核发育二倍体的诱导 同多倍体诱导吴清江和蒋一珪1981年用射线处理镜鲤和野鲤精子，照射时与三倍的HANKS液混合，剂量率130157R/分钟，总剂量15万R。楼允东把用4倍HANKS液混合的鲤鱼精子，（厚度0.51毫米），用30瓦紫外灯2537A） 距离17厘米，照射2小

3、时，精子醉汉状游动，对红镜鲤卵的激活率82%。四、雌核发育二倍体的鉴定1、流式细胞仪2荧光显微分析3、染色体分析4、同工酶电泳5、分子标记 鉴定6、形态学分析五、 人工雌核发育的应用（）、建立纯系：若母体是杂合体，那么雌核发育后 (般指雌核发育二倍体)的纯合程度将存在三种情况 A 二倍化是由于阻止了第一极体的形成和排出，由此产生的雌核发育子代的杂合性与母体相同，但是这样情况在鱼类很少见或不存 B二倍化是由于阻止第二极体的形成和排出，纯合度较高，但仍有些是处于杂合状态，杂合程度取决于第一次减数分裂期间的基因互换频率。这种情况普遍若在于鱼类 C 二倍化是在第二极体排出后，由于阻止第一次卵裂纺丝的形

4、成 ，所有的基因处于纯合状态(除突变外)是理想的纯合体，可直接用于建立纯系。我国已应用雌核发育技术建立了红鲤8305及8413两个纯系。（二）、性别控制：XY和ZW型如用兴国红鲤雌性纯合系作母本，与经雄激素反转的散鳞镜鲤雌核发育二倍体雄鱼(xx)杂交，产生了具有生长优势的全雌后代，已在生产中推广，获得良好的经济效益 （三）、遗传分析 1、确定性别遗传机制：如果雌孩发育的后代全是雌的，即可断定该种群的性别遗传机制属于雌性同配。如果雌核发育的后代个体中有雌有雄，或者全是雄（ ww个体不能成活)，即可推新其性别遗传机制是雌性异配 如泥鳅雌核发育二倍体的研究表明，泥鳅的性别遗传机制属于雌性同配；比目鱼

5、的性别决定机制为雌性异配，而且其(ww)超雌个体能够成活。 2、确定(研究)外界因素对遗传性或表型的影响：雌核发育所繁延的后代，由于基因型相同，个体间的性状差异几乎可以排除或忽略遗传因素的影响。 第一次减数分裂期间，同源染色体会发生交换，经抑制第二扳体的排出而得到的雌核发育二倍体不是完纯合的。通过表现型测定二倍体中某一基因杂合状态的机率，可知道这基因在染色体上的位置 ，画出基因连锁群的基因图距。同时由于纯合性，也此有利于查证隐性基因是否存在。 （四），提高产量中科院水生生物研究所采用杂交的方法，用方正银鲫与辐射过的兴国红鲤的精子进行人工授精，获得了具专生长优势的雌核发育后代，被称为异育银鲫，其

6、生长速度比方正银鲫自繁子代快37倍，比当地鲫鱼快23倍，已应用于生产并取得较高的经济效 由于是高度自交，成活率低，生长缓慢，从孵化到主动摄食死亡率更高。如鲤鱼在胚胎发育的前2周，成活率50%，这期间，外部少许畸形的个体通常死亡。第二节雄核发育雄核发育是指卵子只依靠雄性原核进行发育的生殖方式。 、卵子染色体遗传失活和雄核发育的诱导 人工诱发雄核发育也要经过失活卵子染色体和使雄核二倍化两个步骤。 1、使卵子染色体失活 (1)去除卵核：受精后，于卵子排出第二极体后，用玻璃针从极体排出点附近挑出卵核 2)射线破坏卵核： 。 用射线照射卵核来破坏卵内细胞核，所用射线有紫外线、x射线、r射线等。具体方法是

7、将成熟卵挤入试管，放在有冰块的冰瓶内照射，而后授精。 草鱼（雌）鲤鱼（雄），兴国红鲤草鱼，红鲫草鱼的杂交中都获得不同比例的雄核发育后代，有的是雄核发育二倍体，有的是单倍体。 (3)卵子过熟或老化 过熟或老化的卵子，染色体会自发畸变，这类似于受射线照射的卵子。如将排卵虹鳟放在2的池子里养45周，这样使卵过熟，然后用同种精子受精，诱发100的雄核单倍体。 2004年LI和袁媛用紫外线照射卵子，诱导了太平洋牡蛎和栉孔扇贝雄核发育的个体。如CO60，36000R使卵子遗传失活，再用630KG/CM2在受精后345分钟处理了3分钟，得到雄核发育二倍体。1995年，NYERS等用150微瓦/平方厘米的紫外

8、线照射尼罗罗非鱼卵子58分钟，在受精后2030分钟，用42.5处理4分钟，得到。雄核发育二倍体也可以通过抑制第一次卵裂获得，有人用4042高温抑制第一次卵裂获得了鲤鱼，罗非鱼雄核发育二倍体。热休克方法获得了斑马鱼、泥鳅、虹鳟六带鲃（BA）的词和发育二倍体。2、雄核染色体二倍化 二倍化的原理和方法与雌核发育二倍化一样，可用温度休克的方法，电可用静水压等方法等使之二倍化，否则也具有单倍体综合症难以成活。 有些学者用细胞核移植的方法使之二倍化 ，如将泥鳅精子和大鳞副泥鳅卵质构成的雄核单倍体囊胚细胞的细胞核，移植到大鳞付泥鳅的去核卵中，获得296的雄核发育二倍俸，并培育出5尾二公分以上的个体。 二、雄核发育的应用1 建立纯系。这一点要比雌核发育更优越。因为雄孩发育没有雌性原核的参预，不受第一、第二次减数分裂的影响，无论何种方法所产生的雄核二倍体，一切基因位点都处于纯合状态。2确定