羟基苯乙酮并建立其含量测定方法

1、羟基苯乙酮并建立其含量测定方法摘要：目的从滨蒿中别离得。方法采用硅胶柱色谱和SephadexLH-20从滨蒿的三氯甲烷部位别离得到对羟基苯乙酮；采用DiansilT18色谱柱2504.6，5，甲醇-2醋酸溶液30:70为流动相，检测波长为275n，对不同产地滨蒿中对羟基苯乙酮的含量进展测定。结果对羟基苯乙酮在0.0980.786g范围内线性关系良好，精细度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验的RSD均小于2，平均加样回收率为99.80。结论该方法准确、快速、重复性好,可用于滨蒿中对羟基苯乙酮含量的测定。关键词：滨蒿；对羟基苯乙酮；别离；含量测定滨蒿为?中国药典?2022年版一部茵陈项下

2、收载品种之一，为菊科植物滨蒿Arteisiaspariaaldst.etKit.的枯燥地上局部，具有清湿热，退黄疸的成效1，为利胆退黄的要药2，现代研究说明，对羟基苯乙酮具有明确的利胆活性3，是滨蒿的有效成分之一，而茵陈的现行质量标准中没有含量测定方面的内容，相关文献49也尚未见关于滨蒿中对羟基苯乙酮含量测定方面的报道。本实验运用硅胶柱色谱从滨蒿的三氯甲烷部位中从别离得到对羟基苯乙酮，并采用HPL法测定了10个产地滨蒿中对羟基苯乙酮的含量，为滨蒿的质量控制以及茵陈药材质量标准的建立奠定基矗1对羟基苯乙酮的别离1.1仪器与试药RE52-2旋转蒸发器上海泸西分析仪器厂；柱层析硅胶100200目，青

3、海海洋化工分厂，批号：061003；SephadexLH-20:进口分装Pharaia，上海化学试剂采购供给站分装厂；滨蒿购于成都五块石中药材市场，经成都中医药大学中药鉴定教研室严铸云教授鉴定为滨蒿Arteisiaspariaaldst.etKit.的枯燥地上局部；其余试剂均为分析纯。1.2提取与别离及构造鉴定取滨蒿粗粉加10倍量85乙醇回流提取2次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇后得浸膏，加热水使之混悬，依次用石油醚、三氯甲烷萃取，得三氯甲烷部位，将此提取部位上硅胶柱，以石油醚6090-乙酸乙酯5：1洗脱，搜集洗脱液，将此洗脱部位回收溶剂后上SephadexLH-20色谱柱，以甲醇-水洗脱

4、梯度洗脱，三氯甲烷重结晶，得白色针状结晶。结晶熔点为108109，UV：n：275；1H-NR600Hz，D3D：2.50(3H,S,-H3),6.82(2H,dd,J=8.9,2.4Hz,3,5-H),7.85(2H,dd,J=8.9,2.4Hz,2,6-H)；13-NR(D3D):24.85(-H3),114.82(-3,-5),128.83(-1),130.71(-2,-6),162.51(-4),198.08(=)，根据以上光谱数据与对羟基苯乙酮文献值一致10，确定该化合物为对羟基苯乙酮(p-Hydrxyaetphenne)，经色谱分析，纯度为98.97。-2-2含量测定2.1仪器与试

5、药VarianPrStar210高效液相色谱仪Variandel325检测器：美国瓦里安公司；BP211D万分之一、十万分之一型电子天平：德国Sartrius公司；DiansilT18色谱柱2504.6，5；对羟基苯乙酮对照品：自制，纯度大于98；滨蒿药材：购自四川、山西、辽宁、广西、陕西、河南、安徽、新疆，经成都中医药大学严铸云教授鉴定为滨蒿Arteisiaspariaaldst.etKit.的枯燥地上局部；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂为分析纯。2.2色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-2醋酸溶液30:70为流动相；流速为1Lin-1；检测波长为275n；柱

6、温：30。理论塔板数按对羟基苯乙酮峰计算应不低于3000。图1对羟基苯乙酮对照品HPL色谱图图2供试品HPL色谱图2.3对照品溶液的制备精细称取对羟基苯乙酮对照品适量，加甲醇制成每1L含0.1g的溶液作为对照品溶液。2.4供试品溶液的制备取滨蒿药材约2g，精细称定，参加甲醇30L，回流提取2次，每次1小时，滤过，每次精细量取续滤液15L，合并续滤液，低温蒸干，残渣加甲醇水浴加热使溶解，转移至10L量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。分别精细汲取10L，注入液相色谱仪，测定，即得。2.5线性关系的考察分别精细汲取对羟基苯乙酮对照品溶液1.0L、2.0L、4.0L、6.0L、8.0L，分别

7、置10L量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取上述对照品溶液各10L，注入液相色谱仪，记录色谱图，以对羟基苯乙酮的量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=6107340141r=0.9993结果说明，在0.0980.786g范围内，有良好的线性关系。2.6精细度试验精细汲取对照品溶液10L，连续进样6次，测定，结果说明6次测定的RSD为1.66%，仪器精细度良好。2.7日内精细度试验精细汲取对照品溶液和供试品溶液各10L，在同一个工作日内的0h、2h、4h、6h、8h分别进展测定，结果说明，对照品RSD为1.60，样品中对羟基苯乙酮RSD为1.46，日内精细度良好。-3-2.8日间

8、精细度试验精细汲取对照品溶液和供试品溶液各10L，于5个工作日内分别测定，结果说明，对照品RSD为1.43，样品中对羟基苯乙酮RSD为1.70，日间精细度良好。2.9重复性试验取同一批滨蒿药材6份，每份约2g，精细称定，按供试品溶液制备方法制备，依法测定，计算样品中对羟基苯乙酮的含量，结果说明RSD为1.66，该方法的重复性良好。2.10加样回收试验取含量的滨蒿药材约1g，精细称定，分别精细参加对照品溶液适量，按供试品溶液的制备方法制备，依法测定，计算回收率。结果见表1。表1加样回收率试验结果编号取样量g样品中对羟基苯乙酮含有量g参加对羟基苯乙酮对照品的量g测得量g回收率%平均回收率%RSD%

9、11.00340.3260.2460.575101.1821.00290.3260.2460.56898.4030.99880.3250.2460.57099.7541.00070.3250.3440.66398.1950.99910.3250.3440.675101.8361.00130.3250.3440.66899.5970.98990.3220.3930.718100.8480.99810.3240.3930.71198.3891.00210.3260.3930.719100.0899.801.32结果说明，平均回收率为99.80，RSD为1.32，该方法可靠性良好。2.11样品的测定

10、取各产地滨蒿药材，按供试品制备方法制备，依法测定对羟基苯乙酮含量。结果见表2。表2不同产地滨蒿中对羟基苯乙酮的测定结果n3药材来源含量平均含量四川0.033广西0.022陕西0.036河南0.016安徽0.028新疆0.021辽宁0.032贵州0.020云南0.025山东0.0270.0263讨论对羟基苯乙酮是滨蒿利胆的药效物质根底之一，易溶于甲醇、乙醚、丙酮等溶剂，分别对不同的提取溶剂甲醇、乙醇、提取方法超声、回流、提取时间1小时、1.5小时、2小时以及提取次数1次、2次、3次进展了考察，最后确定甲醇回流2次，每次1-4-小时提取最为完全。对甲醇-水、甲醇-磷酸以及甲醇-醋酸不同流动相系统进

11、展了比拟，结果发现用甲醇-2醋酸溶液30:70为流动相时，对羟基苯乙酮的保存时间、峰型以及别离效果较好，可用于滨蒿中对羟基苯乙酮的含量测定。参考文献：1中国药典.一部.北京：化学工业出版社，2022：1662张廷模.中药学.北京：高等教育出版社，2002：192.3湖南医药工业研究所.茵陈蒿滨蒿利胆有效成分对羟基苯乙酮的初步药理实验.中华医学杂志，1974，2：101.4楼之岑，秦波.常用中药材品种整理和质量研究(北方编.第1册.北京：北京大学医学出版社，1995：8285曾美怡，张启伟，姚三桃，等.茵陈的化学成分和质量评价研究.国外医学中医中药分册，1987，9(6)：1.6中国医学科学院药用植物资源开发研究所.中药志，二版.北京：人民卫生出版社，1998：524.7刘影，于治国，袁璐，等.茵陈药材中绿原酸的含量测定.西北药学杂志，2022，21(5)：207.8孙秀燕，邢山闽，李明慧，等.用液相色谱质谱联用法测定滨蒿中的茵陈色原酮.沈阳药科大学学报，2022，172：110.9王喜军，孙晖，刘中申.茵陈蒿及其复方制剂中6，7-二甲氧基香豆素和茵陈色原酮的定量研究.中国中药杂志.1994，1911：667.10江纪武.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出