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1、简答题1、按照分子分类方法,生物可分为几个大的类群?真细菌域、古生菌域、真核生物域2、微生物有哪五大共性?体积小、面积大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,变异快;分布广,种类多。3、用具体事例说明人类与微生物的关系。微生物无处不在,我们无时不生活在“微生物的海洋”中;微生物在人们的日常生活、工农业生产和医药、环保等方面有重要的应用;微生物也有可能引起毁灭性的灾害。4、微生物的最基本特性是什么?为什么?体积小,表面积大。有大的营养物质吸收面和代谢产物排除面,能迅速与外界进行物质交换,导致生长旺盛,繁殖速度快。5、简述科赫对微生物学的主要贡献。在微生物病原学和免疫学的贡献:(1)具体证实了
2、炭疽病菌是炭疽病的病原菌;(2)发现了肺结核病的病原菌,这是当时死亡率极高的传染性疾病,因此柯赫获得了诺贝尔奖;(3)提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则柯赫原则。在细菌学研究技术学的贡献:(1)固体培养基分离和纯化微生物的技术;(2)培养基配制技术;(3)发明了一系列微生物染色和观察方法,包括显微摄影技术。1、古生菌的细胞壁有何特点?热原体属(thermoplasma):无细胞壁;其他古细菌:无真正的肽聚糖,而由拟胞壁质(假肽聚糖)、其他的杂多糖、糖蛋白或蛋白质组成。2、细胞壁缺陷类型主要有几类?原生质体:由G+细菌经溶菌酶处理培养在等渗条件下形成的完全失去细胞壁、对渗透压敏感
3、的脆弱细胞。球状体(sphaeroplast):由G-细菌经溶菌酶处理后培养在等渗条件下形成的部分失去细胞壁、对渗透压比较敏感的脆弱细胞。L-型菌(L-form):某些细菌在实验室中自发突变形成的多形态的细胞壁缺陷细胞。支原体:长期进化过程中形成的能自由生活的缺壁原核生物。3、简述肽聚糖单体结构。由二糖骨架、短肽(4肽)和肽桥组成。4、什么是细菌的周质蛋白?它有哪些类型?如何提取它们?存在于G-细菌周质空间的蛋白质,称为周质蛋白。类型:水解酶类合成酶类结合蛋白受体蛋白可用渗透休克法提取。5、试述细菌革兰氏染色的机制。G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障
4、缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。G-菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。1简述生产菌种的要求。菌种能在较短的发酵过程中高产有价值的发酵产品;菌种的发酵培养基应价廉,来源充足,被转化的产品的效率高;菌种对人、动物、植物和环境不应该造成危害,还应注意潜在的、慢性的、长期危害,要充分评估其风险,严格防护;菌种发酵后,不需要的代谢物要少,产品要相对容易与不需要的物质分离,下游技术能用于规模化生产;菌种的遗传特性稳定,利于保存,而且易于进行基因操作。简述连续发酵的优缺点。连续发酵的主要优势是
5、简化了菌种的扩大培养,不需要发酵罐的多次灭菌、清洗、出料,缩短了发酵周期,提高了设备利用率,降低了人力、物力的消耗,增加了生产效率。连续发酵运转的周期长,菌种多退化,容易污染,培养基的利用率一般低于分批发酵,而且工艺中的变量较分批发酵复杂,较难控制和扩大。简述大规模发酵的特征规模大即所用设备庞大,占用场地大,人力、物理投入的规模大;消耗的原料能源多;菌种符合生产菌种的要求,其生产代谢特性与大规模发酵相适应;需要进行成本核算。概述固定化优势细胞固定化载体为微生物生长提供了充足的空间;保证了生物反应器内较高的细胞浓度使得反应速度加快,从而有较高的生产力;由于细胞被载体固定,因而不会产生流失现象,连
6、续反应的稀释率大大提高;分离纯化过程中菌体细胞从发酵液中分离十分容易;由于固定化细胞可以长期多次重复使用,简化了游离细胞过程需不断培养菌体的繁复操作,防止营养基质的浪费。1、病毒区别于其他生物的特点是什么?结构简单,独特的繁殖方式,绝对的细胞内寄生,生命形式的简单性病毒核酸有哪些类型和结构特征有双链DNA,单链DNA,双链RNA,单链RNA四种类型3、病毒壳体结构有哪几种对称形式?毒粒的主要结构类型有哪些?螺旋对称、二十面体对称、复合对称。裸露的螺旋对称毒粒和二十面体毒粒,有包膜的甄旋毒粒和二十面体毒粒、复杂毒粒图像。其优良性状。5、简述溶原性细菌的特点。可稳定遗传:子代细菌都含有原噬菌体,均
7、具有溶原性;可自发裂解:温和噬菌体的核酸也可从宿主DNA上脱落下来,恢复原来的状态,进行大量的复制,变成烈性噬菌体,自发裂解几率IO-210-5;可诱导裂解:用化学、物理方法诱导;溶源转变:由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己产生一些新的生理特征。1、能否精确地确定微生物对微量元素的需求,为什么?不能。微生物对微量元素需要量极低;微量元素常混杂在天然有机化合物、无机化学试剂、自来水、蒸馏水、普通玻璃器皿中;细胞中微量元素含量因培养基组分含量不恒定、药品生产厂家及批次、水质、容器等条件不同而变化,难以定量分析检测。2、为什么生长因子通常是维生素、氨基酸、嘌吟和嘧啶,而葡萄糖通常不是生长因子?
8、维生素、氨基酸或嘌吟(嘧啶)通常作为酶的辅基或辅酶,以及用于合成蛋白质、核酸,是微生物生长所必需且需要量很小,而微生物(如营养缺陷型菌株)自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。而葡萄糖通常作为碳源和能源物质被微生物利用,需要量较大,而且其他一些糖类等碳源物质也可以代替葡萄糖满足微生物生长所需。3、以伊红美蓝(EMB)培养基为例,分析鉴别培养基的作用原理。EMB培养基含有伊红和美蓝两种染料作为指示剂,大肠杆菌可发酵乳糖产酸造成酸性环境时,这两种染料结合形成复合物,使大肠杆菌菌落带金属光泽的深紫色,而与其他不能发酵乳糖产酸的微生物区分开。4、与促进扩散相比,微生物通过主动运输吸收
9、营养物质的优点是什么?主动运输与促进扩散相比的优点在于可以逆浓度运输营养物质。通过促进扩散将营养物质运输进入细胞,需要环境中营养物质浓度高于胞内,而在自然界中生长的微生物所处环境中的营养物质含量往往很低,在这种情况下促进扩散难以发挥作用。主动运输则可以逆浓度运输,将环境中较低浓度什养物质运输进入胞内,保证微生物正常生长繁殖。比较自生和共生生物固氮体系及其微生物类群共生固氮体系:根瘤菌(Rhizobium)与豆科植物共生;弗兰克氏菌(Frankia)与非豆科树木共生;蓝细菌(cyanobacteria)与某些植物共生;蓝细菌与某些真菌共生.自生固氮体系:好氧自生固氮菌(Azotobacter,A
10、zotomonas,etc);厌氧自生固氮菌(Clostridium);兼性厌氧自生固氮菌(Bacillus,Klebsiella,etc);大多数光合菌(蓝细菌,光合细菌).比较光能营养微生物中光合作用的类型.光合细菌一环式光合磷酸化;绿硫细菌的非环式光合磷酸化;嗜盐细菌的光合磷酸化是一种只有嗜盐菌才有的,无叶绿素或细菌叶绿素参与的独特的光合作用.是目前所知的最简单的光合磷酸化.简述化能自养微生物的生物氧化作用.化能自养菌一般为好氧菌电子供体是H2,NH4+,H2S和Fe2+,还原力的获得是逆呼吸链的方向进行传递,同时需要消耗能量(1)氨的氧化.NH3和亚硝酸(NO2-)是作为能源的最普通的
11、无机氮化合物,能被亚硝化细菌和硝化细菌氧化.(2)硫的氧化.硫杆菌能够利用一种或多种还原态或部分还原态的硫化合物作能源.H2S首先被氧化成元素硫,随之被硫氧化酶和细胞色素系统氧化成亚硫酸盐,放出的电子在传递过程中可以偶联产生ATP.(3)铁的氧化从亚铁到高铁的生物氧化,对少数细菌来说也是一种产能反应,但这个过程只有少量的能量被利用.(4)氢的氧化氢细菌能利用分子氢氧化产生的能量同化CO2,也能利用其他有机物生长氢细菌的细胞膜上有泛醌,维生素K2及细胞色素等呼吸链组分在这类细菌中,电子直接从氢传递给电子传递系统,电子在呼吸链传递过程中产生ATP蓝细菌是一类放氧性光合生物,又是一类固氮菌,说明其固
12、氮酶的抗氧保护机制.有两种特殊的保护系统.(1)分化出异形胞,其中缺乏光反应中心II,异形胞的呼吸强度大于正常细胞,其超氧化物歧化酶的活性高.(2)非异形胞的保护方式:时间上的分隔保护,白天光合作用,晚上固氮作用;群体细胞中的某些细胞失去光反应中心II,而进行固氮作用;提高过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性来除去有毒氧化物.1、试述单个细菌细胞的生长与细菌群体生长的区别。单个细菌细胞的生长,是细胞物质按比例不可逆地增加使细胞体积增大的过程;细胞群体的生长,是细胞数量或细胞物质量的增加。细胞的生长和与繁殖两个过程很难绝对分开,接种时往往是接种成千上万的群体数量,因此,微生物的生长一般是指群体生长。
13、2、与分批发酵相比,连续培养有何优点?由于连续培养中微生物的生长一直保持在对数期,生物量浓度在较长时间内保持恒定,因此单批发酵相比,连续培养:能缩短发.酵周期,提高设备利用率;便于自动控制;降低动力消耗体力劳动强度;产品质量较稳定。3、过滤除菌有些什么方法?哪种方法较为经济实惠?过滤除菌有3种:深层过滤、膜过滤和核孔过滤。深层过滤器是由纤维或颗粒状物质制成的过滤板层;膜过滤器是由醋酸纤维素、硝酸纤维素或其他合成物质制成的具有微孔的滤膜;核孔过滤器是由核辐射处理后再经化学蚀刻的薄聚碳酸胶片而制成。深层过滤较为经济实惠,多用于工业发酵,后两种方法主要用于科学研究。4、近年来是什么原因导致抗生素不敏
14、感的抗性菌株的增多?主要有以下5个原因:细胞质膜透性改变使药物不能进入细胞;药物进入细胞后又被细胞膜中的移位酶等泵出胞外;细菌产生了能修饰抗生素的酶使之失去活性;药物作用靶发生改变从而对药物不再具有敏感性;菌株改变代谢途径以绕过受药物抑制的过程或增加靶代谢物的产物。1、请概述质粒、转座因子异同点。质粒和转座因子都是一细胞中除染色体以外的另外两类遗传因子。前者是一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中;后者是位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列,广泛分布于原核和真核细胞中。3、根据突变的光复活修复作用、原理,你认为在进行紫外线诱变处理时,应注意
15、什么?在进行紫外线诱变处理时应注意避光,以防光复活修复作用。一般在红光下操作,在黑暗中培养。在紫外线照射时,盛菌液的培养皿应置于磁力搅拌器上,边照射边搅拌使细胞能均匀受到紫外线照射1、具有甲基化夫机汞能力的的匙形梭菌的维生素B12的缺陷型菌株不能进行汞的甲基化,而且对无机汞比亲株(野生型)要敏感得多,这说明什么?一方面说明维生素B12在汞的甲基化中起重要作用,维生素B12(钻胺素)和甲基形成一种甲基钻胺素复合物,而Hg2+可以夺取甲基钻胺素中的甲基形成甲基汞。另一方面说明甲基汞对梭菌的毒性比无机汞要低,所以不能形成甲基汞的缺陷型菌株对无机汞更加敏感。2、微生物在从绿色植物到草食动物的能量流动中
16、起重要作用,请指出这样说的理由?大部分草食动物都缺乏分解绿色植物的纤维素酶,而草食动物对植物食料的利用依靠的是生长在它们胃肠道中的微生物,微生物分泌的纤维素酶把纤维素分解成脂肪酸及其他营养物质,这些营养物质为动物吸收利用,草食动物(如牛)的瘤胃共生就是微生物帮助草食动物利用绿色植物的明显例证。3、简述微生物作为重要成员在生态系统中所起到的重要作用。微生物在生态系统中可以在多个方面起重要作用,但主要作为分解者。其重要作用可以概括如下:微生物是有机物的主要分解者,微生物分解存在于生物圈内的动物、植物和微生物残体等复杂有机物质,并转化成最简单的无机物,再供初级生产者利用。微生物是物质循环中的重要成员
17、,微生物参与所有的物质循环,大部分元素及其化合物都受到微生物的作用。微生物是生态系统中的初级生产者,光能营养和化能营养微生物具有固定太阳能和化学能的能力,成为生态系统的初级生产者。微生物是物质和能量的贮存者,生态环境中的微生物贮存着大量的物质和能量。微生物是地球生物演化中的先锋种类,微生物是地球上最早出现的生物体,微生物的活动为后来的生物进化打下基础。4、简述生物修复中的强化措施。强化措施主要包括:接种外源微生物,通过接种外源高效的降解微生物,改变降解微生物结构、数量,提高降解能力。添加微生物营养盐,为降解微生物提供充足均衡的营养,提高微生物活性。提供电子受体,提供充足的氧和硝酸盐等作为好氧、
18、厌氧条件下的电子受体。提供共代谢底物,为难降解有机物污染的降解提供代谢底物,促进降解。提高生物可利用性,利用表面活性剂、分散剂提高污染物的溶解度,促进生物降解。添加生物降解促进剂,一般加入各种氧化剂推动污染物的降解过程。论述题2、试用表解法比较革兰氏阴性细菌和兰氏阳性细菌细胞壁的异同。结构性质厚度(nm)G+20-80G-内壁层(2-3),外壁层(8)层次肽聚糖结构与细胞膜的关系单层多层,75%亚单位高联,网格紧密多层1-2层,30%亚单位高联,网格疏松紧密组成肽聚糖磷壁酸质多糖蛋白质脂多糖脂蛋白不紧密5090%有少量有或无少少10%左右无无无多有1、病毒的复制循环分为哪几个阶段,各个阶段的主
19、要过程如何?吸附:病毒吸附蛋白、细胞受体、辅助受体、病毒的吸附过程;侵人:噬菌体、动物病毒、植物病毒的侵人方式;脱壳:病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸;病毒大分子合成:噬菌体、动物病毒、植物病毒大分子合成的特点;装配与释放:噬菌体、动物病毒、植物病毒装配与释放的方式。2、病毒与生产实际的关系。病毒可引起多种传染性疾病;发酵工业中噬菌体污染可导致倒罐;昆虫病毒可用作生物杀虫剂;有些细菌病毒可用于疾病治疗;基因工程中的载体。3、亚病毒因子有哪些类,各类有何特点?类病毒:只含有RNA,不含蛋白质的具侵染性的颗粒,为引起植物病害的病原体;拟病毒:一类包裹在真病毒中的裸露的RNA或DNA,复制必
20、须依赖辅助病毒的协助,植物病毒和动物病毒中都有发现。朊病毒:一类能引起哺乳动物亚急性海绵样脑传染病的致病因子。至今已发现能引起10余种人和动物疾病如人的库鲁病、克雅氏病、羊瘙痒症和疯牛病等。1、以紫色非硫细菌为例,解释微生物的营养类型可变性及对环境条件变化适应能力的灵活性。紫色非硫细菌在没有有机物时可同化CO2进行自养生活,有有机物时利用有机物进行异养生活,在光照及厌氧条件下利用光能进行光能营养生活,在黑暗及好氧条件下利用有机物氧化产生的化学能进行化能营养生活。2、如果要从环境中分离得到能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物,你该如何设计实验?(1)从苯含量较高环境中采集土样或水样;(2)配制
21、培养基,制备平板,一种仅以苯作为唯一碳源(A),另一种不含任何碳源作为对照(B);(3)将样品适当适稀释(十倍稀释法),涂布A平饭;(4)将平板置于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板,置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气CO的自养型微生物);(6)挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得单菌落,初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物;(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验,利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。3、某些微生物
22、对生长因子的需求是具有较高的专一性,可利用它们通过“微生物分析”(microbiologicalassay)对样品中维生素或氨基酸进行定量。试设计实验利用微生物对某一样品维生素B勺含量进行分析。(1)将缺乏维生素B12但含有过量其他营养物质的培养基分装于一系列试管,分别定量接人用于测定的微生物;(2)在这些试管中分别补加不同量的维生素B12标准样品及待测样品,在适宜条件下培养;(3)以微生物生长量(如测定0D600nm)值对标准样品的量作图,获得标准曲线;(4)测定含待测样品试管中微生物生长量,对照标准曲线,计算待测样品中维生素B12的含量。4、某学生利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在
23、酪素培养基平板上发现有几株菌的菌落周围有蛋白水解圈,是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大,就断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大,而将其选择为高产蛋白酶的菌种,为什么?不能。因为,(1)不同微生物的营养需求、最适生长温度等生长条件有差别,在同一平板上相同条件下的生长及生理状况不同;(2)不同微生物所产蛋白酶的性质(如最适催化反应温度、PH、对底物酪素的降解能力等)不同;(3)该学生所采用的是一种定性及初步定量的方法,应进一步针对获得的几株菌分别进行培养基及培养条件优化,并在分析这些菌株所产蛋白酶性质的基础上利用摇瓶发酵实验确定蛋白酶高产菌株。5、以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(PTS)
24、为例解释基团转位。大肠杆菌PTS由5种蛋白质(酶I、酶Ila、酶lib、酶lie及热稳定蛋白质HPr)组成,酶Ila、酶IIb、酶lie3个亚基构成酶II。酶I和HPr为非特异性细胞质蛋白,酶IIa也是细胞质蛋白,亲水性酶lib与位于细胞膜上的疏水性酶lie相结合。酶II将一个葡萄糖运输进入胞内,磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基团逐步通过酶I和HPr的磷酸化和去磷酸化作用,最终在酶II的作用下转移到葡萄糖,这样葡萄糖在通过PTS进入细胞后加上了个个磷酸基团。6、试分析在主动运输中,ATP结合盒式转运蛋白(ABC转运蛋白)系统和膜结合载体蛋白(透过酶)系统的运行机机及相互区别。(1)ABC转运蛋白常由
25、两个疏水性跨膜结构域与胞内的两个核苷酸结合结构域形成复合物,跨膜结构域在膜上形成一个孔,核苷酸结合结构则可结合ATP。ABC转运蛋白发挥功能还需要存在于周质空间(G+菌)或附着在质膜外表面()的底物结合蛋白的帮助。底物结合蛋白与被动运输物质结合后再与ABC转运蛋白结合,借助于ATP水解释放的能量,ABC转运蛋白将被运输物质转运进入胞内。(2)膜结合载体蛋白也是跨膜蛋白,被运输物质在膜外表面与透过酶结合,而膜内外质子浓度差在消失过程中,被运输物质与质子一起通过透过酶进入细胞。(3)被运输物质通过ABC转运蛋白系统和通过透过酶进入细胞的区别在于能量来源不同,前者依靠ATP水解直接偶联物质运输,后者
26、依靠膜内外质子浓度差消失中偶联物质运输。1比较酵母菌和细菌的乙醇发酵.主要差别是葡萄糖生成丙酮酸的途径不同酵母菌和某些细菌(胃八叠球菌,肠杆菌)的菌株通过EMP途径生成丙酮酸,而某些细菌(运动发酵单胞菌,厌氧发酵单胞菌)的菌株通过ED途径生成丙酮酸.丙酮酸之后的途径完全相同.试比较底物水平磷酸化,氧化磷酸化和光合磷酸化中ATP的产生.底物水平磷酸化,发酵过程中往往伴随着一些高能化合物的生成,如EMP途径中的1,3二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸这些高能化合物可以直接偶联ATP或GTP的生成底物水平磷酸化可以存在于发酵过程中,也可以存在于呼吸过程中,但产生能量相对较少.氧化磷酸化,在糖酵解和三羧酸
27、循环过程中,形成的NAD(P)H和FADH2,通过电子传递系统将电子传递给电子受体(氧或其他氧化性化合物),同时偶联ATP合成的生物过程.光合磷酸化,光能转变成化学能的过程当一个叶绿素(或细菌叶绿素)分子吸收光量子时,叶绿素(或细菌叶绿素)即被激活,导致叶绿素(或细菌叶绿素)分子释放一个电子被氧化,释放出的电子在电子传递系统的传递过程中逐步释放能量,偶联ATP的合成.主要分为光合细菌所特有的环式光合磷酸化和绿色植物,藻类和蓝细菌所共有的产氧型非环式光合磷酸化作用.什么是无氧呼吸?比较无氧呼吸和有氧呼吸产生能量的多少,并说明原因.无氧呼吸是微生物在降解底物的过程中,将释放出的电子交给NAD(P)
28、+,FAD或FMN等电子载体,再经电子传递系统传给氧化型化合物,作为其最终电子受体,从而生成还原型产物并释放出能量的过程.一般电子传递系统的组成及电子传递方向为:NAD(P)fFP(黄素蛋白)FeS(铁硫蛋白)fCoQ(辅酶Q)fCytbfCytcfCytafCyta3.无氧呼吸的最终电子受体不是氧,而是像NO3-,NO2,SO42-,S2O32-,CO2等,或延胡索酸(fumarate)等外源受体,氧化还原电位差都小于氧气,所以生成的能量不如有氧呼吸产生的多说明革兰氏阳性细菌细胞肽聚糖合成过程以及青霉素的抑制机制.革兰氏阳性菌肽聚糖合成的3个阶段(1)细胞质中的合成葡萄糖-N-乙酰葡糖胺-U
29、DP(G-UDP)N-乙酰胞壁酸-UDP(M-UDP)MUDPPark核苷酸,即UDPN乙酰胞壁酸五肽(2)细胞膜中的合成.Park核苷酸肽聚糖单体分子(3)细胞膜外的合成.青霉素抑制转肽酶.青霉素是肽聚糖单体五肽尾末端的D丙氨酸D丙氨酸的结构类似物,两者竞争转肽酶的活力中心.说明次级代谢及其特点.如何利用次级代谢的诱导调节机制及氮和磷调节机制来提高抗生素的产量?相对于初级代谢而言,一般认为,微生物在一定的生长时期,以初级代谢产物为前体,合成一些对微生物自身生命活动无明确生理功能的物质的过程,称为次级代谢这一过程形成的产物,即为次级代谢产物次级代谢产物大多是分子结构比较复杂的化合物.根据其作用
30、,可将其分为抗生素,激素,生物碱,毒素,色素及维生素等多种类别.次级代谢特点:(1)次级代谢的生理意义不像初级代谢那样明确,次级代谢途径某个环节发生障碍,致使不能合成某个次级代谢产物,而不影响菌体的生长繁殖.(2)次级代谢与初级代谢关系密切,初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体(3)次级代谢一般发生在菌体指数生长后期或稳定期,也会受到环境条件的影响.(4)次级代谢产物的合成,因菌株不同而异,但与分类地位无关,两种完全不同来源的微生物可以产生同一种次级代谢产物.(5)质粒与次级代谢的关系密切,控制着多种抗生素的合成.(6)次级代谢产物通常都是限定在某些特定微生物中生成,因此与现代发酵产业
31、密切相关.(7)次级代谢产物的合成通常被细胞严密控制某些抗生素的产生可以被加在发酵培养基中的诱导物诱导产生,可在发酵培养基中加入诱导物来增加产量.易代谢氮源如铵盐以及高浓度的磷酸盐,对某些抗生素的产生有抑制作用在发酵培养基避免使用高浓度的铵盐和使用低浓度或亚适量的磷酸盐可以防止抑制作用.如何利用营养缺陷突变株进行赖氨酸发酵工业化生产?在微生物中,以天冬氨酸为原料,通过分支代谢合成赖氨酸,苏氨酸和甲硫氨酸.为了解除正常的代谢调节以获得赖氨酸的高产菌株,工业上选育了谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)的高丝氨酸缺陷型菌株作为赖氨酸的发酵菌种.这个菌种由于不能合成高丝氨
32、酸脱氢酶(HSDH),故不能合成高丝氨酸,也就不能产生苏氨酸和甲硫氨酸.在添加适量高丝氨酸(或苏氨酸和甲硫氨酸)的条件下,在含有较高糖和铵盐的培养基上,能产生大量的赖氨酸.用来测定细菌生长量的直接计数法和间接计数法一般采用什么具体的方法?并从实际应用,优点,使用的局限性3个方面加以具体分析.直接计数法通常是利用细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下直接计算一定容积里样品中的微生物的数量该方法简便,易行,成本低,且能观察细胞大小及形态特征该法的缺点是:样品中的细胞数不能太少,否则会影响计数的准确性,而且该法不能区别活细胞和死细胞.间接计数法又称活菌计数法,一般是将适当稀释的样品涂布在琼脂培养基表面
33、,培养后或细胞形成清晰的菌落,通过计算菌落数就可以知道样品中的活菌数.平板涂布和倾倒平板均可用于活菌计数平板计数简单灵敏,广泛应用于食品,水体及土壤样品中活菌的计数该法的缺点有:可能因为操作不熟练使得细胞未均匀分散或者由于培养基不合适不能满足所有微生物的需要而导致结果偏低,或使用倾倒平板技术时因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定等.封闭系统中微生物的生长经历哪几个生长期?以图表示并指明各期的特点.如何利用微生物的生长规律来指导工业生产?细菌生长曲线图参见教材第六章封闭系统中微生物的生长经历迟缓期,对数期,稳定期和衰亡期等4个生长时期.在迟缓期中细胞体积增大,细胞内RNA,蛋白质含量增高
34、,合成代谢活跃,细菌对外界不良条件反应敏感在迟缓期细胞处于活跃生长中,但分裂迟缓在此阶段后期,少数细胞开始分裂,曲线略有上升对数期中细菌以最快的速度生长和分裂,导致细菌数量呈对数增加,细胞内所有成分以彼此相对稳定的速度合成,细菌为平衡生长由于营养物质消耗,代谢产物积累和环境变化等,群体的生长逐渐停止,生长速率降低至零,进入稳定期稳定期中活细菌数最高并保持稳定,细菌开始储存糖原等内含物,该期是发酵过程积累代谢产物的重要阶段营养物质消耗和有害物的积累引起环境恶化,导致活细胞数量下降,进入衰亡期衰亡期细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物,菌体细胞呈现多种形态,细胞大小悬殊.在工
35、业发酵和科学研究中迟缓期会增加生产周期而产生不利影响,因此需采取必要措施来缩短迟缓朔对数期的培养物由于生活力强,因而在生产上普遍用作种子,对数期的培养物也常常用来进行生物化学和生理学的研究稳定期是积累代谢产物的重要阶段,如某些放线菌抗生素的大量形成就在此时期,因此如果及时采取措施,补充营养物或去除代谢物或改善培养条件,可以延长稳定期以获得更多的菌体或代谢产物.4大肠杆菌在37C的牛奶中每12.5min繁殖一代,假设牛奶消毒后,大肠杆菌的含量为1个/100mL,请问按国家标准(30000个/mL),该消毒牛奶在37C下最多可存放多少时间?G=(t-t0)/n=0.301X(t-t0)/(1gNt
36、-lgN0)T-t0=(1g3000000(1gl)X12.5/0.301269(min)4.5(h)答:最多能放4.5h.与分批发酵相比,连续培养有何优点?由于连续培养中微生物的生长一直保持在对数期,生物量浓度在较长时间内保持恒定,因此与单批发酵相比,连续培养:能缩短发酵周期,提高设备利用率;便于自动控制;降低动力消耗及体力劳动强度;产品质量较稳定.6说明温度对微生物生长的影响,详述温度对微生物生长的影响的具体表现.微生物的生长具有相当高的温度依赖性,有最低,最适和最高生长温度这几个基本温度.最适温度总是更靠近最高生长温度而不是最低生长温度.温度对微生物生长的影响的具体表现在:影响酶活性,温
37、度变化会影响酶促反应速率,最终影响细胞物质合成.影响细胞质膜的流动性,温度高则流动性高,有利于物质的运输;温度低则流动性低,不利于物质的运输.因此,温度变化影响营养物质的吸收和代谢物质的分泌.影响物质的溶解度,温度上升,物质的溶解度升高,温度降低,物质的溶解度降低,机体对物质的吸收和分泌受影响,最终微生物的生长受影响温度过高时酶和其他蛋白质变性,细胞质膜熔化崩解,细胞受到损害温度很低时,细胞质膜冻结,酶也不能迅速工作,因此,在温度高于或低于最适生长温度时生长速度会降低.详述嗜冷菌,嗜温菌,嗜热菌和极端嗜热菌的不同.嗜冷菌生长的温度范围是020C,最适生长温度为15C;嗜温菌生长的温度范围是15
38、45C,最适生长温度为2045C;嗜热菌生长的温度范围是4580C以上,最适生长温度5565C,极端嗜热菌生长的温度范围是80C以上,最适生长温度为80113C,低于55C通常不会生长嗜冷菌的运输系统和蛋白质合成系统在低温下能很好地发挥功能,其细胞膜含有大量的不饱和脂肪酸,能在低温下保持半流质状态当温度高于20C时,细胞膜被破坏,细胞内组分流出嗜热菌具有能在高温条件下发挥功能的酶和蛋白质合成系统,细胞膜脂类物质的饱和程度咼,因此融点咼,能保持咼温下的细胞完整.8哪几种氧形式对细胞有毒性?微生物细胞具有什么酶来解除氧的毒性?氧气受到辐射可被还原为超氧化物自由基,过氧化氢,羟基自由基等,它们是强氧化剂,能迅速破坏细胞组分专性好氧和兼性厌氧微生物的细胞中含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,能破坏超氧化物自由基,过氧化氢.另外,细胞中的过氧化物酶也能降解
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