《同位素分析技术》ppt课件

1、中国农业大学中国农业大学 齐孟文齐孟文只需部分分别，测定只需部分分别，测定 Sm Sm。mxxSSWWWW000)（稀释) 1()(00000mxxmSSWWWWSWS或)(44. 4) 13 .512 .96(07. 5) 1(00mgSSWWmX%91. 2%1006 .15244. 4CmSSWWWW00*0)()(00mmSSSWWmgWx44.321912541917 .10msmAASSmm/,000) 1(00mXAAWWSmssxxSSSSwwwwwwww000000)()( Awswwswwsssx0000m)()(sxwwww0,0sxxsssxsxwmAmAwssw/sx

2、sxwAAwxsmm)()(2211wwswwsxx21mm 1212AAss211122AAwAwAwx127127129uussssanananR%100127ua)(127129sssuaRannexp/ RRftrue)(127129sssuafRann K1 K20)1)(),3)4()4()1)()() 3(),)2() 1 ()()(221KqKqKpFBFBFBFBpPQPQPQFBpFBPQpPQFBPQqKQKFBqpQPPQkkKPQQPQP（整理：）代入（则与度分别为令抗源与抗体的初始浓的，则反应是均一的单价结合与抗体假定抗原0.670.3310.500.5020.50

3、.330.63竞争放射分析原理表示图竞争放射分析原理表示图)100ln()(logitB/ByLogitB%B/B)f(AB)F/(BF/BAA,AAA000g*g0bggbyyy则令函数并转换成为零管计数），作为指示变量（常用，反应剂量曲线。或一定的条件下，和且在，半抗原半抗原 单抗多抗抗源或人工抗原单克隆化免疫动物100%50%50%抗原类似物抗源BB50bbgbg50A1AAAAK3单克隆抗体Monoclonal antibody,McAb: 由单个B细胞克隆产生的针对单一抗原决议簇的同源抗体。制备过程 1.致敏淋巴细胞的预备； 2.骨髓瘤细胞的预备； 3.细胞交融

4、； 4.选择性培育； 5.抗体分泌细胞的挑选； 6.克隆化过程； 7.单克隆抗体的制备取抗原致敏淋巴细胞骨髓瘤 细胞交融选择性 培育抗体分泌细胞挑选克隆化单抗制取单抗纯化单抗鉴定致敏淋巴细胞骨髓瘤细胞离心 1000rpm 10min50%PEG 1ml培育液 10ml离心 1000rpm 7min37。C摇动、由慢渐快1min、静止1.5min参与HAT培育液悬浮细胞，置于培育孔内HAT选择培育原理选择培育原理核苷酸从头合成途径de novo synthesis核苷酸补救合成途径salvage synthesisHAT核苷酸DNA氨基碟呤A次黄嘌呤H胸腺嘧啶核苷TTA：氨基碟呤，叶酸拮抗物；T

5、K：胸腺嘧啶核苷激酶；HGPRT次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转换酶HGPRTTK内源合成外源合成细胞组合 HGPRT 生长形状淋巴细胞 + 骨髓瘤 + 长期生长淋巴细胞 + 淋巴细胞 + 短期生长骨髓瘤 + 骨髓瘤 不能生长未交融淋巴细胞 + 短期生长未交融骨髓瘤 不能生长 选择培育的细胞类型 骨髓瘤细胞HGPRT-，或TK-),淋巴细胞 HGPRT+，或TK+HGPRT；次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核苷转换酶；TK:胸腺嘧啶核苷激酶有限稀释克隆法有限稀释克隆法计数103/ml102/ml10/ml0.5-2/孔单克隆抗体的制取与鉴定单克隆抗体的制取与鉴定制取：制取：体外体外培育罐法培育罐法体内体内腹腔接种

6、腹腔接种纯化：纯化：盐析、层析、制备型盐析、层析、制备型HPLC鉴定：鉴定：特征鉴定特征鉴定Ig类型、亲和力、效价、特异性类型、亲和力、效价、特异性决议簇鉴定决议簇鉴定能否针对同一决议簇能否针对同一决议簇100NSB-BNSB-B%BB0i0i）（结合率结合率%Ag剂量剂量RIAIRMARIAIRMA标记物标记物抗原抗原抗体抗体原理原理竞争性结合竞争性结合非竞争性结合非竞争性结合抗体量抗体量限量限量过量过量标准曲线标准曲线负相关负相关正相关正相关达到平衡的速度达到平衡的速度慢慢快快可测范围可测范围窄窄宽宽应用对象应用对象大分子、小分子大分子、小分子大分子大分子RLLR21, kk0LTRTLT

7、RTRLRLRLRLLTRLRTRLLRkkK212ddK重排：/RLLRLRTKd1RLKKRTLRLddLogLogLnLogKRLRTRLRLLRLRTKRLLnRdnd重排，并取对数. 报报,2021, 34 (2): 170178S(PbEgEgggbAAAAAAAb显色）催化S(PEbgEbgEbAAAAA显色）催化Ag-AbAbAbAgAgAbAbAgAgAbAgAb2E2EAbEE2 比色底物比色产物底物E21AbAbAg显色）酶无活性）：(PS(AgAbAgAbAg:AbAgEEECLIA体系构造图体系构造图波长300 400 500 600 700Stakes吸光度Stak

8、es位移表示图激发光激发光荧光荧光光强度激发短寿命荧光长寿命荧光延迟时间丈量时间铕螯合物的激发、发射光谱中国与国际免疫诊断现状 中国国际欧美为主放射免疫法兴起于20世纪70年代，现仍普遍运用于县级以上医院；产品处于衰退期；厂商试剂与仪器共同开发，试剂根本系列化。兴起于20世纪60年代，现已根本退出临床运用；产品生命周期已终结；厂商试剂和仪器共同开发，试剂根本系列化。酶联免疫法兴起于20世纪80年代，现普遍运用于各级临床机构，为我国临床免疫诊断的根本方法；产品处于成熟期；厂商试剂与仪器共同开发，试剂尚未系列化。兴起于20世纪70年代，现仍在临床运用；产品处于衰退期；厂商试剂与仪器共同开发，试剂根

9、本系列化。化学发光免疫法引入于20世纪90年代，现个别较大医院开展个别工程；产品处于导入期或生长期；无厂商开发消费，完全依赖进口兴起于20世纪80年代，现已被临床普遍运用，成为临床免疫诊断的支柱方法；产品处于成熟期；厂商试剂与仪器共同开发，仪器自动化程度高，试剂系列化形状.4各种体外分析法的比较),(nghabaMNN240 .15245 . 023 21)1)(tteeENI21)1)(ttaeeENMW 21NN212)(NENdtdNttteENeNdtdNe)(122tteENeNdtd)()(12dteENeNdtt)()(12)(; 0, 0)(12112ENCNtCeENeNtt

10、)1()(112teENNssxxWIIW) 4, 2() 2,() 1, 1() 1,(),(),( )2 ,(),(),( AZXAZXAZXAZYAZXnnnpnn)/693. 0exp()0()(2/1TtItI)/693. 0exp()0()(iiiiTtItInjjjWW1jijijWAx ijAWWmjjijjijjjijjijimxwwxWAC)(jmijX在pI 为9.3 的条带中铜、锌的含量分别是癌旁组织的2 倍和3.5 倍。参见：董元兴等.核技术，2006,299：641-645NAAAASXRFESMSIAEANISTNAAAASXRFESMSNMTS和,ki ,yx,

11、iyxiyixMNNTNSN)(kyxkykxMNNTNSN)(ikkykxiyixMTNSNTNSN)(kykxikiyixTNSNMTNSN)()(iikkykikixTMTNSMSN)()(ikikkyikikkxTMTNMSSNYMTMSSMMTXnjyjjknjxjjkikikikik11)()(3. IDMS 3. IDMS 在环境样品分析中的运用在环境样品分析中的运用水水 水是最重要的环境介质，水中微量元素的水是最重要的环境介质，水中微量元素的含量会直接影响人体安康。含量会直接影响人体安康。堆积物堆积物 近年来海近年来海( (河河) ) 底堆积物在环境样品的测底堆积物在环境样品的测试中占有很大的比重。试中占有很大的比重。 参考文献：参考文献： 周霄等周霄等. .同位素稀释质谱法丈量环境样品中的微同位素稀释质谱法丈量环境样品中的微量元素量元素. .质谱学报质谱学报,2001,22(4):1-10,2001,22(4):1-10X-ray(Auger e-)Electron粒子束粒子束靶原子靶原子MLK1S1/22P3