分析化学：第9章 分光光度法

1、第九章第九章 吸光光度法吸光光度法1本章作业（教材）本章作业（教材）P240：例题：例题2本章内容提要：本章内容提要： 一、基本原理一、基本原理 二、光度计二、光度计 三、显色反应及显色条件三、显色反应及显色条件 四、吸光度测量条件的选择四、吸光度测量条件的选择 五、应用五、应用3吸光（或分光）光度法：吸光（或分光）光度法：基于溶液中物质对光基于溶液中物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。的选择性吸收而建立起来的分析方法。比较溶液颜色的深浅来确定物质含量。比较溶液颜色的深浅来确定物质含量。基于物质对可见光的吸收基于物质对可见光的吸收（紫外光）（紫外光）（紫外光、可见光）（紫外光、可见光）（

2、红外光）（红外光）c / g/mL0.00.51.01.52.02.5A0.00.10.20.30.40.54 重铬酸钾法测定铁矿石中铁含量重铬酸钾法测定铁矿石中铁含量 铁矿石中铁含量：铁矿石中铁含量： 70%； 1 g 200 mL，溶液中铁含量：溶液中铁含量：3.5 mg/mL 邻菲罗啉分光光度法测定微量铁邻菲罗啉分光光度法测定微量铁 标准曲线上查出：标准曲线上查出： 未知液浓度：未知液浓度：0.001 mg/mL 原液浓度：原液浓度：0.05 mg/mL5吸光光度法的特点：吸光光度法的特点： 灵敏度较高，检测下限达灵敏度较高，检测下限达10 5 10 6 mol/L，适用于微量组分的测定

3、。适用于微量组分的测定。 测定的相对误差约为测定的相对误差约为2% 5%。 测定迅速，仪器操作简单，价格较便宜。测定迅速，仪器操作简单，价格较便宜。 应用广泛，几乎所有的无机物质和许多有机应用广泛，几乎所有的无机物质和许多有机物质都能用此法进行测定。物质都能用此法进行测定。69.1 9.1 吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理1. 光的基本性质光的基本性质2. 紫外紫外-可见吸收光谱的产生可见吸收光谱的产生3. 物质对光的选择性吸收物质对光的选择性吸收4. 光吸收的基本定律光吸收的基本定律 射射线线x射射线线紫紫外外光光红红外外光光微微波波无无线线电电波波10-2 nm 10 nm 102 n

4、m 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm可可 见见 光光可见光（可见光（visible light）：）：400800 nm，人眼能感觉到人眼能感觉到的光；在可见光区，不同波长的光呈现不同的颜色的光；在可见光区，不同波长的光呈现不同的颜色。紫外光（紫外光（ultraviolet light）：）：200 400 nm9.1.1 光的电磁波性质光的电磁波性质78单色光：单色光：单一波长单一波长复合光：复合光：由不同波长的光组合而成由不同波长的光组合而成光的互补：光的互补：两种单色光以适当的比例混合得到白光；两种单色光以适当的比例混合得到白光； 称这两种单色光为称这两种

5、单色光为互补色光互补色光。物质对光的选择性吸收：物质对光的选择性吸收：白光通过有色溶液时，该白光通过有色溶液时，该溶液会选择性地吸收某些波长的光，呈现透射光的颜溶液会选择性地吸收某些波长的光，呈现透射光的颜色；吸收光和透射光互为补色。色；吸收光和透射光互为补色。光的互补光的互补：蓝：蓝 黄黄9600650780光的互补关系光的互补关系KMnO4溶液：紫红色，吸收溶液：紫红色，吸收500-560 nm的绿光的绿光109.1.2 紫外紫外-可见吸收光谱的产生可见吸收光谱的产生分子内部三种分子内部三种运动形式运动形式分子具有三种分子具有三种不同能级不同能级分子内能分子内能电子相对于原子核的电子相对于

6、原子核的运动运动电子能级电子能级电子能量电子能量E Ee e原子核在其平衡位置原子核在其平衡位置附近的相对振动附近的相对振动振动能级振动能级振动能量振动能量E Ev v分子本身绕其重心的分子本身绕其重心的转动转动转动能级转动能级转动能量转动能量E Er r能级是量子化的，且各自具有确定能量值能级是量子化的，且各自具有确定能量值110.005 0.05 eV，跃迁产生的吸跃迁产生的吸收光谱位于远红外区（远红外光谱或分子转动光收光谱位于远红外区（远红外光谱或分子转动光谱）。谱）。0.05 1 eV，跃迁产生的吸收跃迁产生的吸收光谱位于红外区（红外光谱或分子振动光谱）。光谱位于红外区（红外光谱或分子

7、振动光谱）。1 20 eV。电子跃迁产生的吸电子跃迁产生的吸收光谱在紫外收光谱在紫外-可见光区（紫外可见光区（紫外-可见光谱或分子可见光谱或分子的电子光谱）。的电子光谱）。12电子能级间跃迁的同电子能级间跃迁的同时，总伴随有振动和时，总伴随有振动和转动能级间的跃迁。转动能级间的跃迁。电子光谱中总包含有振动电子光谱中总包含有振动/ /转动能转动能级间跃迁产生的若干谱线，呈现级间跃迁产生的若干谱线，呈现宽谱带（带状光谱）。宽谱带（带状光谱）。139.1.3 物质对光的选择性吸收物质对光的选择性吸收当一束光照射到物质上时，光与物质发生相互作当一束光照射到物质上时，光与物质发生相互作用，于是产生用，于

8、是产生反射、散射、透射、吸收反射、散射、透射、吸收。14光的吸收光的吸收（absorption）：当一束光照射到某物质或其溶液时，分子、离子当一束光照射到某物质或其溶液时，分子、离子与光子发生与光子发生“碰撞碰撞”，吸收光子能量，由基态跃，吸收光子能量，由基态跃迁到激发态。迁到激发态。15光的选择性吸收：光的选择性吸收：u分子、原子或离子具有不连续的量子化能级。分子、原子或离子具有不连续的量子化能级。u仅当光子能量与被照物质基态和激发态能量之仅当光子能量与被照物质基态和激发态能量之差相等时才能发生吸收。差相等时才能发生吸收。 E = E2 E1 = h u不同的物质由于其结构不同而具有不同的量

9、子不同的物质由于其结构不同而具有不同的量子化能级，其能量差也不相同，化能级，其能量差也不相同，物质对光的吸收物质对光的吸收具有选择性具有选择性。16吸收曲线（吸收光谱）：吸收曲线（吸收光谱）：u测量溶液对不同波长光的吸收，以波长为横坐测量溶液对不同波长光的吸收，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到标，吸光度为纵坐标作图，得到。u描述了物质对不同波长光的吸收能力。描述了物质对不同波长光的吸收能力。吸收曲线吸收曲线A (nm)最大吸收波长：最大吸收波长： max17吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：（1 1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。（2 2）吸收

10、曲线可以提供物质的结构信息，并作为物）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质质定性分析定性分析的依据之一。也是定量分析中选择入射的依据之一。也是定量分析中选择入射光波长的重要依据。光波长的重要依据。（3 3）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似。）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似。在某一定波长下吸光度有差异，在在某一定波长下吸光度有差异，在max处吸光度的差处吸光度的差异最大，测定最灵敏，可用于物质异最大，测定最灵敏，可用于物质定量分析定量分析。18不同浓度，同一物质不同浓度，同一物质同一浓度，不同物质同一浓度，不同物质199.1.4 光吸收的基本定律光吸收的基本定律朗伯朗伯-

11、 -比尔定律：比尔定律：布格（布格（Bouguer）和朗伯（）和朗伯（Lambert）先后于）先后于1729年和年和1760年阐明了光的吸收程度和年阐明了光的吸收程度和吸收层吸收层厚度厚度的关系：的关系：A b1852年比尔（年比尔（Beer）又提出了光的吸收程度和）又提出了光的吸收程度和吸光物质浓度吸光物质浓度之间也具有类似的关系：之间也具有类似的关系：A c II020A = lgT = lg(I0/It) = bc A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度：吸光度；描述溶液对光的吸收程度 b：液层厚度（光程长度），单位：液层厚度（光程长度），单位 cm c：溶液的摩尔浓度，单位：溶液的摩尔浓度

12、，单位 molL 1 ：摩尔吸光系数，单位：摩尔吸光系数，单位 Lmol 1cm 1或或: A = lg(I0/It) = abc c：溶液的浓度，单位：溶液的浓度，单位 gL 1 a：吸光系数，单位：吸光系数，单位 Lg 1cm 1 a与与的关系为：的关系为： = aM （M为摩尔质量）为摩尔质量） 21透光度（透光率）透光度（透光率）T：T = It /I0T：描述入射光透过溶液的程度描述入射光透过溶液的程度吸光度吸光度A与透光度与透光度T的关系：的关系： A lgT u朗伯朗伯-比尔定律是吸光光度法的理论基础比尔定律是吸光光度法的理论基础 和定量和定量测定的依据。测定的依据。u吸光度具有

13、加和性：吸光度具有加和性：12总1122nnnAAAAbcbcbc22摩尔吸光系数摩尔吸光系数 的讨论：的讨论：u吸光物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；吸光物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；u不随浓度和光程长度的改变而改变。在温度和不随浓度和光程长度的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，波长等条件一定时， 仅与吸光物质本身的性质仅与吸光物质本身的性质有关；有关；u可作为定性鉴定的参数；可作为定性鉴定的参数；u同一吸光物质在不同波长下的同一吸光物质在不同波长下的不同。在不同。在max处处的的常以常以max表示。表示。max越大，该物质的吸光能力越大，该物质的吸光能力越强，用光度法测定该

14、物质的灵敏度越高。越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。23朗伯朗伯- -比尔定律的适用条件：比尔定律的适用条件：u入射光为单色光；应选用处或肩峰处测定。入射光为单色光；应选用处或肩峰处测定。u吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破坏线性关系，应控制测定的条件（酸度、浓坏线性关系，应控制测定的条件（酸度、浓度、介质等）。度、介质等）。u稀溶液：吸光质点之间不存在相互作用；浓稀溶液：吸光质点之间不存在相互作用；浓度增大，分子之间相互作用增强。度增大，分子之间相互作用增强。24朗伯朗伯- -比尔定律的偏离：比尔定律的偏离：标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：

15、标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时）。标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时）。引起这种偏离的因素（两大类）：引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理因素，即仪器非理想）物理因素，即仪器非理想 （2）化学因素）化学因素25（1 1）物理因素）物理因素难以获得真正的单色光。难以获得真正的单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。入射光：由两种波长入射光：由两种波长1和和2的光组成的光组成 A1 = lg(I01 /It1) = 1bc A2 = lg(I02 /It2) = 2bc故：故：It1 = I01

16、 10 1bc It2 = I02 10 2bc 26 A总总 = lg(I0总总/It总总 ) = lg(I01 + I02)/(It1 + It2) = lg(I01 + I02)/(I01 10 1bc + I02 10 2bc) 若若 1 = 2，A = bc，呈直线关系；，呈直线关系；若若 1 2，A与与c不呈直线关系；不呈直线关系； 1 与与 2差别越大，偏离越严重。差别越大，偏离越严重。克服偏离的措施：克服偏离的措施：1. 选择较好的单色器；选择较好的单色器；2. 选用选用 max处的光作处的光作入射光。入射光。27（2）化学因素）化学因素 朗伯朗伯-比耳定律只适用于稀溶液。高浓

17、度时，吸光比耳定律只适用于稀溶液。高浓度时，吸光粒子之间存在相互作用，改变其吸光能力。粒子之间存在相互作用，改变其吸光能力。 溶液中存在离解、聚合、互变异构、配合物的形溶液中存在离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡，使吸光物质的浓度发生变化。成等化学平衡，使吸光物质的浓度发生变化。 例：例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡：铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： CrO42 2H+ = Cr2O72 + H2O 溶液中溶液中CrO42 、Cr2O72 的颜色不同，吸光性质也的颜色不同，吸光性质也 不相同。故此时溶液不相同。故此时溶液pH 对测定有重要影响。对测定有重要影响。289.2

18、 9.2 光度计及其基本部件光度计及其基本部件1. 基本组成基本组成2. 类型类型29可见分光光度计可见分光光度计尤尼柯尤尼柯 20002000上海上海 723PC30紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计贝克曼贝克曼 U800岛津岛津 UV2550319.2.1 9.2.1 基本组成基本组成1. 1. 光源光源要求：要求：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。的使用寿命。 可见光区：钨灯，可见光区：钨灯，波长范围波长范围320 2500 nm 紫外区：

19、氢灯或氘灯，紫外区：氢灯或氘灯，波长范围波长范围180 375 nm光源光源单色器单色器样品室样品室检测器检测器显示器显示器322. 2. 单色器单色器作用：将光源发射的复合光分解成单色光，并可从作用：将光源发射的复合光分解成单色光，并可从中选出一任波长单色光。中选出一任波长单色光。u入射狭缝：入射狭缝：光源的光由此进入单色器光源的光由此进入单色器u准直透镜：准直透镜：使入射光成为平行光束使入射光成为平行光束u色散元件：色散元件：复合光分解成单色光，棱镜或光栅复合光分解成单色光，棱镜或光栅u聚焦透镜：聚焦透镜：透镜或凹面反射镜透镜或凹面反射镜u出射狭缝：出射狭缝：所需波长的光通过狭缝照射到试液

20、上所需波长的光通过狭缝照射到试液上33棱镜单色器棱镜单色器u棱镜：棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同而依据不同波长光通过棱镜时折射率不同而将不同波长的光分开将不同波长的光分开。u光栅：光栅：利用光的衍射与干涉作用制成。利用光的衍射与干涉作用制成。343. 3. 样品室样品室样品室放置各种类型样品室放置各种类型吸收池（比色皿）吸收池（比色皿）和相应和相应池架附件。池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。354. 4. 检测器检测器利用利用光电效应光电效应将透过吸收池的光信号变成

21、可测的将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有：光电池、光电管、电信号，常用的有：光电池、光电管、光电倍增光电倍增管（管（photomultiplier, PMT）、光电二极管阵列光电二极管阵列（photo-diode array, PDA）。5. 5. 结果显示记录系统结果显示记录系统检流计、微安表、电位计、数字电压表、记录检流计、微安表、电位计、数字电压表、记录仪、示波器及计算机等进行仪、示波器及计算机等进行仪器自动控制和结仪器自动控制和结果处理果处理。369.2.2 9.2.2 分光光度计的类型分光光度计的类型1. 1. 单光束型单光束型简单，价廉，简单，价廉，适于在给定波长处测量

22、吸光度或透光适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。器具有很高的稳定性。参比池参比池372. 2. 双光束型双光束型自动记录，快速全波段扫描。自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 参比池参比池383. 3. 双波长型双波长型u通过波长选择可校正背景吸收：通过波长选择可校正背景吸收：消除吸收光谱重消除吸收光谱重叠干扰，适合于混浊液和多

23、组分分析。叠干扰，适合于混浊液和多组分分析。u只使用一个吸收池：只使用一个吸收池：参比溶液即被测溶液，避免参比溶液即被测溶液，避免单波长法中因两种溶液组成、均匀性差异及吸收单波长法中因两种溶液组成、均匀性差异及吸收池差异所引入的误差。池差异所引入的误差。 1 2不同波长的两束单色光快速交替不同波长的两束单色光快速交替通过同一吸收池后到达检测器。通过同一吸收池后到达检测器。399.3 9.3 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择1. 显色反应的选择显色反应的选择2. 显色条件的选择显色条件的选择3. 显色剂显色剂409.3.1 9.3.1 显色反应的选择显色反应的选择显色反应：显色反

24、应： Mn+ + R = M-R 待测组分待测组分颜色颜色A显色剂显色剂颜色颜色B有色化合物有色化合物颜色颜色C配位显色反应配位显色反应氧化还原显色反应氧化还原显色反应 测定其吸光度测定其吸光度或吸收曲线或吸收曲线橙红色橙红色41显显色反色反应应选选择择需需考考虑的因虑的因素：素：1. 灵敏度高灵敏度高 ：一般一般 1042. 选择性选择性好好3. 显色剂在测定波长处无明显吸收显色剂在测定波长处无明显吸收 试剂空白小，提高准确度试剂空白小，提高准确度；两；两种有色物最大吸收种有色物最大吸收波长之差（对比波长之差（对比度，度， ） 60 nm。4. 生成的有色化合物组成恒定，性质稳定生成的有色化

25、合物组成恒定，性质稳定。Mn+ + R = M-R 429.3.2 9.3.2 显色条件的选择显色条件的选择显色剂用量显色剂用量酸度酸度显色温度显色温度显色时间显色时间干扰的消除干扰的消除Mn+ + R = M-R 1.1.显色剂显色剂用量（用量（cM、pH一定）一定）必须严格控制必须严格控制显色剂用量显色剂用量吸光度与显色剂浓度的关系曲线吸光度与显色剂浓度的关系曲线选择曲线变化平坦处，选择曲线变化平坦处，对显色剂用量要求不对显色剂用量要求不太严格。太严格。432.2.反应体系的酸度反应体系的酸度（cM、cR一定）一定）酸度影响酸度影响HR的存在型体，的存在型体，可能影响金属离子的水解。可能影

26、响金属离子的水解。大多数有机显色剂是有机弱酸：大多数有机显色剂是有机弱酸：HR H+ + RMR +Mn+ 选择曲线中吸光度较大选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应且恒定的平坦区所对应的的pH范围。范围。pH A443.3.显色温度显色温度通过实验找出适宜的温度范围。通过实验找出适宜的温度范围。ATATATATAT4.4.显色时间显色时间通过实验，作通过实验，作A t 曲线，找出适宜的显色时间。曲线，找出适宜的显色时间。455. 5. 干扰离子的消除干扰离子的消除（1 1）掩蔽）掩蔽（配位掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂）（配位掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂） 使干扰离子生成无色配合物或无色离子使干扰离子生

27、成无色配合物或无色离子（2 2）选择适当的显色条件）选择适当的显色条件如：用磺基水杨酸测定如：用磺基水杨酸测定Fe3+时，时，Cu2+与试剂形成黄色配合物，与试剂形成黄色配合物， 干扰测定；控制干扰测定；控制pH在在2.5左右，左右，Cu2+则不与试剂反应。则不与试剂反应。（3 3）分离干扰离子）分离干扰离子（沉淀、离子交换、萃取）（沉淀、离子交换、萃取）（4 4）选择适当的光度测量条件）选择适当的光度测量条件（波长、参比溶液）（波长、参比溶液）Mn+ + R = M-R N 469.3.3 9.3.3 显色剂显色剂1.1.无机显色剂：无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等。硫氰酸盐、钼酸铵

28、、过氧化氢等。2.2.有机显色剂：有机显色剂：种类繁多，应用广泛。种类繁多，应用广泛。偶氮类：偶氮类：性质稳定，显色反应灵敏度高，选择性好，性质稳定，显色反应灵敏度高，选择性好，对比度大，应用最广泛。对比度大，应用最广泛。三苯甲烷类：三苯甲烷类：铬天青铬天青S S、二甲酚橙等、二甲酚橙等。偶氮胂偶氮胂III铬天青铬天青S47（a）发色团（生色团）发色团（生色团） （偶氮基）（偶氮基）NN （亚硝基）（亚硝基）NO（硫羰基）（硫羰基） C=S使化合物产生颜色或在紫外使化合物产生颜色或在紫外-可见光区产生吸收可见光区产生吸收不饱和基团不饱和基团（醌基）（醌基）（b）助色团）助色团不使化合物产生颜色

29、，能使发色团的吸收峰向不使化合物产生颜色，能使发色团的吸收峰向长波方向移动，同时使吸收强度增加；长波方向移动，同时使吸收强度增加；通常由含有孤对电子的原子组成。通常由含有孤对电子的原子组成。 OH、SH、NH2、 Br48红移与蓝移，增色效应与减色效应红移与蓝移，增色效应与减色效应红移红移增色增色减色减色蓝移蓝移波长波长 吸吸收收499.4 9.4 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择1. 入射光波长的选择入射光波长的选择2. 参比溶液的选择参比溶液的选择3. 吸光度读数范围的选择吸光度读数范围的选择50 一般选择一般选择 max 若若max处有共存组分干扰，应考虑选择灵敏度处有共存组分干

30、扰，应考虑选择灵敏度 稍低但能避免干扰的入射光波稍低但能避免干扰的入射光波长。长。9.4.1 9.4.1 入射光波长的选择入射光波长的选择选选500 nm，灵敏度下降，却，灵敏度下降，却消除了干扰，提高了测定的消除了干扰，提高了测定的选择性和准确度。选择性和准确度。A：钴配合物：钴配合物B：显色剂：显色剂51采用参比溶液的目的：采用参比溶液的目的：测得的吸光度真实反映待测溶液对光的吸收。测得的吸光度真实反映待测溶液对光的吸收。试液参比IIIIAlglg09.4.2 9.4.2 参比溶液的选择参比溶液的选择 选择参比溶液的方法：选择参比溶液的方法： 试液、显色剂和条件试剂（如缓冲溶液、掩试液、显

31、色剂和条件试剂（如缓冲溶液、掩 蔽剂等）均无吸收蔽剂等）均无吸收 参比溶液：参比溶液：纯溶剂（水纯溶剂（水) )；Mn+ + R = M-R II052 显色剂或条件试剂略有吸收显色剂或条件试剂略有吸收, ,而试液无吸收而试液无吸收 参比溶液：参比溶液：“试剂空白试剂空白”( (不加试液不加试液) ) Mn+ + R = M-R 显色剂、条件试剂无吸收，而试液有吸收显色剂、条件试剂无吸收，而试液有吸收 参比溶液：参比溶液：“试液空白试液空白”( (不加显色剂和条件试剂不加显色剂和条件试剂) )Mn+ + R = M-R 显色剂、条件试剂、试液中其他组分均有吸收显色剂、条件试剂、试液中其他组分均

32、有吸收 参比溶液：参比溶液：在试液中加入掩蔽剂，将待测组分掩蔽，在试液中加入掩蔽剂，将待测组分掩蔽， 再加显色剂。再加显色剂。Mn+ + R = M-R 539.4.3 9.4.3 吸光度读数范围的选择吸光度读数范围的选择分光光度计测量的是分光光度计测量的是透光度透光度 T；光度计的读数误差（光度计的读数误差（ T）一般为一般为0.2 2%。A = lgT = bc lgT = bc （式（式1）微分：微分：d(lgT) = 0.4343d(lnT) = 0.4343 dT/T = bdc （式（式2）式式2除以式除以式1，得，得0.4343lgcTcTT54c/c：测量结果的相对误差：测量结果的相对误差 ErT ：（0.22）T ：透光度读数：透光度读数不同的透光度读数，产生的误差大小不同。不同的透光度读数，产生的误差大小不同。0.4343lgcTcTT0.00.20.40.60.81.0012345TEr 100T = 0.5%Er 最小值为最小值为 1.4，此时，此时 T = 36.8%，A = 0.434若需保证若需保证Er 2%，则，则 T = 12% 70% A = 0.15 0.92一般：一般：0.2 0.8559.5 9.5 吸光度法的应用吸光度法的应用1. 试样中微量组分的测定试样中微量组分的测定2. 弱酸和弱碱离解常数的测定弱酸和弱碱离解常数的测定3.