微生物的实验室培养学案

1、精品资源专题二微生物的培养与应用【学习导航】本专题包含三个方面的内容：课题 1.微生物的实验室培养；课题 2.土壤中分解尿素的细 菌的分离与计数；课题 3分解纤维素的微生物的分离。课题1介绍了最基本的微生物技术，是开展其他两个课题的基础。课题 2和课题3要求分离某种特定的微生物，难度较大，探究 性也更强。此外，本专题中所强调的无菌操作技术，将有助于“专题3植物组织培养技术”的顺利完成。学生通过本专题的学习，应当掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识，应当掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，并可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物分离与培养等实际问题。

2、课题1微生物的实验室培养【导学诱思】1 .培养基的配制原则是 。培养基可以分为和。2 .培养基一般都含有 、四类营养物 质，另外还需要满足微生物生长对 、以及 的要求。思考：为什么大多数培养基都需要含有四类营养物质？3 .获得纯净培养物的关键是 。4 .避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：5 .消毒是指灭菌是指思考：消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？6 .实验室常用的消毒方法是 ,此外，人们也常使用化学药剂进行 消毒，如用、等。常用的灭菌方法 有、,此外，实验室里还用_或 进行消毒。7 .制备牛肉膏蛋白月东固体培养基的方法步骤是 ，, ，,。思考：培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用

3、来倒平板。你用什么方法来估计培养基 的温度？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？8.微生物接种的方法中最常用的是 和。平板划线法 是指。稀释涂布平板法是指 9 .平板划线的操作步骤如下：(4) (6) 思考：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？10 .系列稀释操作步骤：11 .涂布平板操作

4、步骤：(4) 【疑难点拨】1 .生物的营养营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。在人及动物，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物， 营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类；在微生物，则有水、无机盐、碳源、氮源及 特殊营养物质五类。2 .培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。3 .无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。4 .平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

5、平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。5 .为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍 然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染

6、操作者。 【典例解析】例1.关微生物营养物质的叙述中，正确的是a.是碳源的物质不可能同时是氮源b. 凡碳源都提供能量c.除水以外的无机物只提供无机盐d. 无机氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于a、b选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是 氮源，如 nhhco;有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如 蛋白月东。对于c选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养 型微生物的碳源；nahoq,可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而nacl则只能提供无机盐。又于d选

7、项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如nh可为硝化细菌提供能量和氮源。答案：d例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是a.防止杂菌污染b.消灭杂菌c.培养基和发酵设备都必须灭菌d.灭菌必须在接种前解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。a说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌)，所以是正确的；b是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。c是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭 菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。答案：b编

8、p成分含量粉状硫10g(nh) 2sc40.4g&hpo4.0gmgsc9.25gfesc0.5gcacl20.5gh2c100ml例3.右表是某微生物培养基成分，请据此回答:(1)右表培养基可培养的微生物类型是。如不想浪费此培养基，可再加入 用于培养(2)若不慎将过量 nacl加入培养基中。(3)若除去成分，加入(cho),该培 养基可用于培养(4)表中营养成分共有 类。(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化 后分装前，要进行的是 。(6)右表中各成分重量确定的原则是 一(7)若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是解析：对于一个培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。分析化学成分要从营养物质的类型出发。右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳 源和特殊营养物质。对特殊营养物质，有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源 的。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可培养的微生物就 是自养型微生物了。该培养基中加入了过量食盐，就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培养基, 但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基就还需要加入有机碳源。该培养基若加入（chq,培养基中就有了碳源，但