《沈玲龙开题报告》PPT课件.ppt

1、开题报告,毕业答辩,姓名：沈玲龙 学号：200706217123 指导老师：蔡成岗 学院：生物与环境工程学院 班级：07级食品科学与工程1班,目录,研究选题的背景与意义 研究的基本内容与拟解决的主要问题 研究的方法与技术路线 研究的总体安排与进度 主要参考文献 致谢,研究选题的背景与意义,在人们生活水平不断提高的今天，由于人们的饮食结构和生活环境的变化，一些营养素缺乏而引起的疾病相对减少，而冠心病，糖尿病等发病率则越来越高。因此，对于这些疾病的预防和治疗受人们的关注，已成为医药和食品工作者研究的热点。随着研究工作的不断深入和科学技术的进步，人们对葡聚糖（-葡聚糖最具生理活性）所具有的各种重要生

2、理功能越来越关注。 -葡聚糖作为葡萄糖的高聚物，因其葡萄糖苷键为-1，3键而得名，可以区别葡聚糖（Dextran）（E.J 旺达姆等，2004）。 -1,3-葡聚糖(glucan)是-类广泛存在于微生物（细菌、真菌、藻类、地衣）和植物中的大分子多糖，主链以-1,3-D-葡萄糖苷键连接，通常还具有一定比例和大小的-1，6支链。在酵母等真菌细胞壁中含量较高，达20-25%细胞干重（Nguyen et al，1998），对于生物保持自身结构完整和防御外来侵害具有重要作用。在植物细胞壁中-葡聚糖称作callose，是植物组织的重要结构成分，同时也存在于粮食作物大麦、燕麦中，与-1，4葡聚糖共存，在燕麦

3、和大麦中含量分别为(2%-4%)和(2%-10%)。,研究选题的背景与意义,医药,-葡聚糖应用领域,化工,食品,化妆品,研究的基本内容与拟解决的主要问题,酵母是最古老、最常用的食品工业微生物之一，且葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的主要多糖，通常占细胞干物质总量20-25%。 主要研究内容： 1.酵母培养优化 2.葡聚糖提取、分离纯化（为主） 3.检测与性质研究 拟解决的主要问题： 从酵母细胞壁中提取葡聚糖。,研究的方法与技术路线,研究方法: 通过对酵母细胞的培养和优化获得酵母菌后，研究酵母细胞的自溶条件，使细胞壁和细胞内容物分离，之后对碱提取溶液浓度、提取时间、温度等过程进行条件优化；在获得葡聚糖

4、粗品的基础上，研究纯化方法，获得纯品-葡聚糖。,研究的方法与技术路线,葡聚糖提取:,提取，分离纯化步骤： 自溶裂解：理化处理（工艺控制）碱提取酸中和离心去上清液洗涤得粗品测多糖含量,研究的方法与技术路线,工艺确定: 自溶裂解 温度：确定最佳温度(54) 外加破壁酶：复合酶（主要包括蛋白酶和葡聚糖酶） 原料预处理：自溶促进剂（乙醇：质壁分离剂，质量分数1%-3%比较合适）NaCl添加：（渗透压，质量分数以2.5%为佳） 碱提取工艺条件的确定 用单因素实验确定碱用量（加碱比：碱溶液体积：酵母残渣重量）、提取温度、提取时间对酵母细胞壁多糖的提取。 酸中和种类的选择 分别用盐酸、硫酸、醋酸进行中和，比

5、较三者的多糖得率与相对纯度。 脱蛋白方法比较 分别用等电点沉淀法、三氯乙酸法和Sevag法脱除蛋白。,研究的方法与技术路线,检测与性质研究:,定性分析： 结构确定：酸水解、纸层析确定单糖组成；紫外、红外光谱确定结构组成。 定量分析： 总糖含量测定：苯酚-硫酸法 蛋白质含量测定：凯氏定氮法 分子量：凝胶层析、离子色谱 本实验主要以葡聚糖的提取以及所提取的葡聚糖多糖含量的测定为主。,研究的方法与技术路线,技术路线:,酿酒酵母自溶处理，条件优化碱法提取温度、时间、浓度优化酸中和，干燥分离纯化，脱蛋白，凝胶层析工艺确定和-葡聚糖制备,研究的总体安排与进度,2009.6-2009.9： 酵母培养优化；

6、酵母自溶工艺条件确定； 2009.10-2010.2： -葡聚糖的提取条件优化，获得温度、碱浓度、时间等条件； 探索-葡聚糖纯化条件； 整理数据投稿 2010.3-2010.5： -葡聚糖的纯化； 整理数据并结题。,主要参考文献,1 王淼,酵母免疫活性葡聚糖的研究也开发J.无锡轻工业大学 2 E.J. 旺达姆比等主编.生物高分子.第5卷.多糖.原核生物多糖M.化学工业出版社.2004.5:305-329 3 Nguyen T.H, Fleet G.H Rogers P.L, Composition of the cell walls of several yeast species.Appli

7、ed Microbiology and Bbiotechnology.1998.50:206-212 4 邵明丽等. 酵母细胞壁对动物机体的免疫作用及作用机理J.浙江大学饲料科学研究所.2002.(05):26-27 5 王淼,玉添,母葡聚糖在肉制品中的应用研究J.食品与机械.2001.(02):32-33 6 傅冠民.羧甲基-1，3-葡聚糖在护肤品中的功能羧甲基J.日用化学品科学.2000.23(5):4-6 7 Phaff,H.J.,The Yeast,Vol.2,Academic Press,New York,pp.135-210,主要参考文献,8 王亚军,姚善泾,吴天星,响应面法优化S

8、accharomyces cerevisiae FL-1培养基J.化学反应工程与工艺.2003.19(04):300-305 9 杨永涛,涂国全,响应面法优化弗氏链霉菌S-221 变种发酵培养基J.物加工过程.2005, 3(2):36-40 10 王亚军, 2004,浙江大学博士论文,浙江，杭州。 11 赵光远,钟文辉,殷蔚申,用废啤酒酵母自溶残渣制碱不溶性葡聚糖的研究J.食品科学.1997.18(02):23-27 12 张晓鸣,袁信华,章克昌,理化处理对啤酒酵母自溶的影响J.无锡轻工业大学学报.2001.20(02):154-157 13 万萍,自溶促进剂乙醇自溶酵母最佳条件的研究J.酿酒.