2025年牛津上海版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年牛津上海版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、牛奶消毒及细菌检测实验的过程如下图所示；下列相关叙述不正确的是（）

A.步骤①为巴氏消毒法，步骤②为系列梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨均可提供碳源、氮源B.实验中对试管、培养皿的灭菌是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品C.实验中的培养基适宜的灭菌方法是高压蒸汽灭菌D.实验中采用平板划线法计数，最可能导致实验结果偏低2、科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响；结果如图。相关叙述错误的是（）

A.培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性B.培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段C.实验结果表明茎尖越小脱毒率越高，成苗率越低D.根据本实验，培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0．27mm3、科研工作者利用禽流感病毒蛋白制备单克隆抗体，下列步骤中叙述不正确的是（）A.用适宜浓度相同抗原多次免疫小鼠，以获得更多的浆细胞B.用培养液培养禽流感病毒，通过离心获得抗原蛋白C.可以用电融合法或PEG融合法诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞D.单克隆抗体相比血清抗体特异性更强，并且可以大量制备4、下面是哺乳动物受精过程示意图；数字表示过程，字母表示结构。下列有关叙述正确的是（）

A.a结构的名称是透明带B.受精之前，精子需在睾丸的曲细精管中获能C.精子发生顶体反应释放的顶体酶，由高尔基体合成D.c、d分别为雄原核和雌原核5、高等哺乳动物受精后不久；受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚；囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程。下图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述不正确的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.②将来发育成胎儿的各种组织，③将来发育成胎盘和胎膜6、“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程。以下说法不正确的是（）

A.用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁时，酶溶液的渗透压略大于细胞液B.“白菜—甘蓝”培养过程中，要用到不同浓度的细胞分裂素和生长素C.“白菜—甘蓝”相对于白菜、甘蓝，发生了染色体变异，不具有可育性D.植物体细胞杂交打破了不同种生物之间的生殖隔离7、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术成功培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎不一定都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究8、如图所示为植物体细胞杂交的流程；两种植物细胞都为二倍体，它们的基因型分别为AABB；ddee。下列叙述正确的是（）

A.图中“去壁”要使用淀粉酶和果胶酶B.①过程常采用的物理法有离心、振动、聚乙二醇C.③过程和④过程分别表示再分化和脱分化D.杂种植株的基因型为AABBddee9、菊花是一种常见的观赏花卉，易感桃蚜。桃蚜不但直接影响菊花生长，还是多种病毒的传播媒介。雪花莲凝集素基因GNA的表达产物能有效抑制桃蚜生长。某科研团队利用农杆菌转化法获得了转基因菊花。下列有关叙述不正确的是（）A.受体细胞可以选择菊花叶片细胞或桃蚜细胞B.需将含GNA的片段插入到Ti质粒的T-DNA上C.需经过植物组织培养过程获得转基因菊花D.可通过接种桃蚜对转基因菊花进行抗性鉴定评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（）A.在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进排卵B.从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精C.受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵D.设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害11、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面12、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致13、扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图实验，其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①~⑤号部位，其中⑤为剩余部分。测定病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如下。下列说法正确的是（）

A.该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小B.可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染C.病斑越大，靠近腐烂部位的果肉中Pat含量越高D.由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后可放心食用14、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理15、长春花是野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。研究人员利用已免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞通过杂交技术生产出能够同时特异性识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体，制备过程如图所示。下列说法错误的是（）

A.①过程要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠产生更多的抗体B.经③过程获得的杂交瘤细胞都能产生抗癌胚抗原的特异性抗体C.图中“?”处只能使用PEG融合法和电融合法来诱导细胞融合D.制备双特异性抗体的目的是使长春碱能定向地作用于癌细胞评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)16、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。17、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。18、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。19、假设PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有个这样的_______个DNA片段，一共需要加入______________个引物。20、纯化DNA，去除杂质有________________个方案。评卷人得分四、实验题(共3题，共24分)21、（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点；因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。22、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。23、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________评卷人得分五、综合题(共4题，共32分)24、炭疽病是一种由炭疽杆菌引发的急性传染病；炭疽杆菌主要以孢子形式存在，其孢囊具有保护功能，能使细菌不受阳光；高温和消毒剂的影响而在自然界中长期存活。通过空气传播的呼吸性炭疽病后果最为严重，致死率为95%～100%。因此，炭疽杆菌是一种重要的生物武器。请回答下列相关问题。

（1）生物武器多具有_______________________（答出两点即可）等特点。

（2）下列有关炭疽杆菌致病特点的叙述，不正确的是________。

A．传染性极强。

B．感染者死亡率极高。

C．仅0.001mg炭疽杆菌就能引发炭疽病。

D．使人精神失常。

（3）1998年6月27日，中美联合声明中重申了在任何情况下________、不生产、________生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。25、用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示。据图回答下列问题：

（1）①过程所需的酶是____________。在构建基因表达载体过程中，构建的重组质粒上启动子的本质是__________，作用是_________________________。

（2）实现②过程常用PCR技术，该技术中需用到的酶是__________，该技术的前提是要有____________________________；以便合成引物。

（3）过程③将基因表达载体导入大肠杆菌时，首先用________处理大肠杆菌，目的是_____________________。26、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白的转基因玉米，回答下列问题。

(1)利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因，需要的引物有______________（从A；B、C、D四种单链DNA片段中选择）。

(2)培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图2所示（Ti质粒上的T-DNA可转移到被侵染的细胞，并整合到该细胞的染色体DNA上）。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用______________酶组合，理由是_____________；不选用图中其它限制酶的原因是_____________。

(3)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入_____________（填潮霉素/卡那霉素/潮霉素或卡那霉素）进行筛选。

(4)P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示，可作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究实验材料的有_____________。27、针对新冠病毒（SARS-CoV-2）的重组蛋白疫苗；核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研发当中。下图为其中一种疫苗的研发思路；图中①～⑦表示过程，虚线箭头表示NcoI、SphI、NheI、BamHI的酶切位点（四种酶的识别序列详见表），标记基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。

。限制酶NcoⅠSphⅠNheⅠBamHⅠ识别序列和切割位点C↓CATGGGCATG↓CG↓GATCCG↓CTAGC

（1）图中①过程需要使用___________酶先得到cDNA，再使用___________技术扩增得到S基因。

（2）为使③过程顺利进行，需先使用限制酶___________和___________切割质粒B，选用两种限制酶对新冠病毒的S基因进行切割的目的是___________（答出1点即可）。

（3）图中表示筛选的过程是___________（填编号），筛选时应使用以___________为唯一碳源的培养基。

（4）重组疫苗注入志愿者体内后，S蛋白基因指导合成的S蛋白作为___________，刺激机体产生能与之相结合的抗体，抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是___________（选填“有”或“无”）SARS-CoV-2感染史，理由是___________。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

无菌技术。

1．无菌技术的主要内容①对实验操作的空间；操作者的衣着和手；进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

2．实验室常用的消毒方法：煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒。

3．实验室常用的灭菌方法。

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具；如接种环；接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；

②干热灭菌：能耐高温的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管；培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；

③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】

A；步骤①为巴氏消毒法；这种消毒法的特点是既能杀死牛奶中的微生物，又不破坏牛奶中的营养成分，步骤②采用无菌水进行梯度稀释，步骤③中的牛肉膏蛋白胨都能为微生物的生长提供碳源和氮源，A正确；

B；实验中对试管、培养皿的灭菌可采用的方法是干热灭菌；这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品，B正确；

C；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；C正确；

D；平板划线法不能对微生物进行计数；应该用稀释涂布平板法，D错误。

故选D。

【点睛】2、A【分析】【分析】

分析题图：图示表示茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响。茎尖越小；脱毒率越高，成苗率越低。在茎尖外植体大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm。

【详解】

A；马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒；因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗，所依据的原理是细胞全能性，A错误；

B；培育脱毒苗的过程中利用了植物组织培养技术；涉及脱分化和再分化两个阶段，B正确；

C；据图可知；实验结果表明茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，C正确；

D；茎尖外植体大小为0.27mm时；脱毒率和成苗率均较高，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm，D正确。

故选A。3、B【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，可用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；多次给小鼠注射适宜浓度的抗原；引起小鼠发生体液免疫，可以获得更多的浆细胞，A正确；

B；禽流感病毒没有细胞结构；不能在培养液中独立生存，B错误；

C；用灭活的病毒可诱导浆细胞与骨髓瘤细胞发生融合形成杂交瘤细胞；除外还可以用聚乙二醇诱导融合，C正确；

D；杂交瘤细胞既具有浆细胞能合成抗体的特点；也具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点，骨髓瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，因此单克隆抗体相比血清抗体特异性更强，并且可以大量制备，D正确。

故选B。4、D【分析】【分析】

1．图中a是放射冠，b是卵细胞间隙；c是雄原核，d是雌原核。

2．图中数字表示的过程是：①精子穿过放射冠；②精子穿过透明带；③精子进入卵细胞膜；④精卵原核融合。

3．在精卵相遇之前；精子在雌性动物生殖道发生相应的生理变化，具有了受精能力，这个过程叫做精子获能。卵子一般在排出后都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。

4．在精卵相遇时精子发生顶体反应；释放出顶体酶，该酶可溶解透明带外面的卵丘细胞群和细胞间的物质，形成越放射冠的通道。在精子触及到卵细胞的瞬间会发生透明带反应，这是防止多精入卵的第一道屏障；同时精子膜卵细胞膜融合，精子进入卵的第二道屏障。同时精子的头部和尾部分离，由此看出精子进入卵子的部分几乎只有头部的细胞核。

【详解】

A；看图；a结构的名称是放射冠，A错误；

B；受精之前；精子在雌性动物生殖道发生相应的生理变化，具有了受精能力，这个过程叫做精子获能，B错误；

C；在精卵相遇时精子发生顶体反应；释放出顶体酶，由核糖体合成，C错误；

D；由上述分析可知c是雄原核；d是雌原核，D正确。

故选D。5、D【分析】【分析】

题图分析：图示表示囊胚期胚胎示意图；其中①为透明带，在囊胚期后期会破裂；②为滋养层，将来分化成胎盘和胎膜；③为内细胞团，将来分化形成各种组织。

【详解】

A；由分析可知；图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；图示为囊胚期；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于该时期，终止于生命结束，B正确；

C；孵化是指胚胎（囊胚）从①透明带中伸展出来的过程；C正确；

D；图示为囊胚期；其中②滋养层将来发育成胎盘和胎膜，③内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，D错误。

故选D。

【点睛】6、C【分析】【分析】

题图分析：利用植物体细胞杂交技术培育杂种植物细胞；具体过程包括诱导植物细胞融合成杂种细胞和植物组织培养技术培育成杂种植株两过程，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；植物体细胞杂交的去壁过程；需要将植物组织置于含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液中，或略大于细胞液渗透压，否则原生质体可能吸水涨破，A正确；

B；杂种细胞组织培养形成杂种植物；需用不同浓度的细胞分裂素和生长素诱导，如诱导生根的过程中需要培养基中含有较多的生长素，而在诱导生芽的过程中需要在培养基中加入较多的细胞分裂素，B正确；

C；“白菜—甘蓝”相对于白菜、甘蓝；发生了染色体数目变异，属于异源四倍体，可育，C错误；

D；有性杂交不能突破生殖隔离；需在同一物种的雌雄个体之间进行，而植物体细胞杂交打破了这个障碍，D正确。

故选C。7、D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中；使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。

【详解】

A；用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术成功培育出克隆疾病猴；该过程是属于无性繁殖，所以基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；胚胎发育会受到环境因素的影响；受精卵经基因编辑后形成的胚胎不一定都成功发育为克隆疾病猴，B正确；

C；克隆特定疾病模型的动物；还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助，所以克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物，C正确；

D；不可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究；D错误。

故选D。8、D【分析】【分析】

据图分析；①是诱导原生质体融合的过程；②是再生出新的细胞壁的过程；③是脱分化；④是再分化。

【详解】

A；植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶；根据酶的专一性，图中“去壁”要使用的酶为纤维素酶和果胶酶，A错误；

B；①过程常采用的物理法有离心、振动、电激等；用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合是化学法，B错误；

C；③是杂种细胞形成愈伤组织的过程；④是愈伤组织形成杂种植株的过程，故③过程和④过程分别表示脱分化和再分化，C错误；

D；分析题意可知；两种植物细胞都为二倍体，它们的基因型分别为AABB、ddee，杂种植株能集中两个亲本的遗传物质，其基因型为AABBddee，D正确。

故选D。9、A二、多选题(共6题，共12分)10、A:C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；在采集卵母细胞之前；需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A正确；

B；从卵巢中吸取的卵母细胞；必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

C；受精过程中；卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；

D；以治疗为目的的设计试管婴儿技术；是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】12、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；据图分析可知；①号部位为病斑区域，即腐烂部位，①与②交界处为“病键交界处”，是腐烂部位与未腐烂部位交界的地方，②③④⑤均为未腐烂部位，且距离腐烂部位依次变远。

2；在曲线图中；病班部位的Pat含量最高，而距离病班部位越来越远，Pat含量就会越来越少。

【详解】

A；由曲线图可知；该实验自变量是腐烂苹果中的病斑大小和离病斑距离大小，A正确；

B；青霉素可以抑制细菌生长；可向扩展青霉培养液中加入青霉素以防止杂菌污染，B正确；

C；病斑越大；说明病斑中扩展青霉素的密度就越大，产生的Pat就越多，C正确；

D；如果只去除腐烂部位；那么未腐烂部位中的Pat仍然会对人体造成伤害，存在健康风险，故窝烂苹果去除腐烂部位后不能食用，D错误。

故选ABC。14、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。15、A:B:C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融台，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基坮养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；①过程要多次注射抗原；其目的是刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞，A错误；

B；③为选择培养基；经选择培养基获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，要产生所需抗体还要进行抗体检测阳性和克隆化培养，B错误；

C；诱导动物细胞融合可以使用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等；C错误；

D；双特异性抗体中的癌胚抗原抗体能将药物定向引导至和癌细胞结合；从而避免对其他细胞的破坏，D正确。

故选ABC。三、填空题(共5题，共10分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2030×22030×2－220、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3四、实验题(共3题，共24分)21、略

【分析】【分析】

1；大肠杆菌属于细菌；是原核生物。微生物营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，另外还需要注意渗透压、温度、pH等条件。大肠杆菌常作为遗传学研究的实验材料．微生物培养的关键是无菌技术，防止外来杂菌的污染。

2；微生物培养的关键是无菌操作。使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌；常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。

【详解】

（1）大肠杆菌具有体积小；结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点；培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物；所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（4）对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状；大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。

（5）培养大肠杆菌时；在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（6）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素；并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

【点睛】

本题主要考查微生物培养的相关知识，要求考生能够识记大肠杆菌的培养条件以及其作为遗传实验的优点，区分掌握不同材料消毒和灭菌的方法，识记菌种鉴定的方法等，属于基础题。【解析】①.温度②.酸碱度③.易培养④.生活周期短⑤.灭菌⑥.消毒⑦.损伤DNA的结构⑧.比例合适⑨.鉴定(或分类)⑩.将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生.⑪.灭菌22、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用五、综合题(共4题，共32分)24、略

【分析】【分析】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员；牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来；给人类的生存安全构成了严重威胁。

【详解】

（1）生物武器多具有致病力强；传染性大；有潜伏期，一般在潜伏期症状不明显，难以及时发现；传染面积广，危害时间长；传播途径多；造价低，技术难度不大；隐秘性强等特点。

（2）ABCD；炭疽杆菌致病特点包括传染性极强、感染者死亡率极高、仅0.001mg炭疽杆菌就能引发炭疽病等；不包括使人精神失常。ABC正确，D错误。

故选D。

（3）1998年6月27日；中美联合声明中重申了在任何情况下不发展；不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。

【点睛】

本题考查生物武器的特点和对待生物武器的态度，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。【解析】①.致病力强，传染性大；有潜伏期，一般在潜伏期症状不明显，难以及时发现；传染面积广，危害时间长；传播途径多；造价低，技术难度不大；隐秘性强②.D③.不发展④.不储存25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：

①目的基因的获取：包含基因文库和部分基因文库；其中部分基因文库常用的是cDNA文库，当使用cDNA作为目的基因来源时，因cDNA不包含启动子和终止子，常常需要将目的基因插入在质粒载体的启动子与终止子之间。

②基因表达载体的构建：需要用到限制酶和DNA连接酶以及基因运载体；常见运载体有λ噬菌体的衍生物，动植物病毒，质粒。

③将目的基因导入受体细胞；对不同的受体细胞所采用方法不同，对双子叶植物和裸子植物采用农杆菌转化法，对植物还可以采用花粉管通道法和基因枪法；对动物常采用显微注射技术导入目的基因导入受体细胞；对于微生物，如大肠杆菌，常用感受态细胞法。

④目的基因的检测与鉴定：可采用分子杂交；DNA分子杂交，抗原—抗体杂交技术，或者个体生物学水平的抗虫，抗病毒接种实验来进行。

【详解】

（1）题图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA的过程；需要逆转录酶的催化。基因表达载体的组成包括目的基因；标记基因、启动子、终止子，复制原点等，其中启动子的本质是一段有特殊结构的DNA片段，其作用是供RNA聚合酶的识别、结合以驱动目的基因的转录。

（2）利用PCR技术扩增目的基因时需要热稳定性的DNA聚合酶（常用Taq酶）。PCR扩增目的基因的前提是要有