2025年冀教新版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，必须用显微镜观察菌体的形状7、《诗经》中“十月获稻，为此春酒，以介眉寿”记录了古人用新鲜稻米酿酒，以求延年益寿的习俗。米酒酿造主要包括蒸米、拌酒曲、发酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉转化成葡萄糖）。下列说法错误的是（）A.酿造米酒的过程中，酵母菌可进行有氧呼吸和无氧呼吸B.蒸米后通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物C.米酒发酵初期，霉菌可以通过糖化作用，为酵母菌的呼吸作用提供底物D.腐乳发酵过程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用8、某国外科研小组把人的诱导多能干细胞注入猪的早期胚胎中，成功培育出人猪嵌合体胚胎，并在猪体内发育了3～4周后才终止妊娠。下列有关叙述错误的是（）A.实验过程需利用体外受精、胚胎移植等胚胎工程的相关技术B.诱导多能干细胞可以由成体的成纤维细胞、B细胞转化而来C.若成功培育出“人猪嵌合体”将会面临巨大的伦理道德挑战D.该研究为在动物体内培育出可供移植的人类器官提供了可能9、下列有关微生物培养的叙述正确的是A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后进行C.用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量D.倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、下表有关基因表达的选项中；能够表达的有（）

。基因表达的细胞表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白A.AB.BC.CD.D11、培养胡萝卜根组织可获得试管苗；获得试管苗的过程如图所示。

有关叙述正确的是（）A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B.步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织C.从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累D.步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用12、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，需要用科学的方法测定微生物数量。下列相关叙述不正确的是（）A.利用以尿素作为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出分解尿素的细菌B.平板划线法可以分离得到单菌落，也可用来测定样品中的活菌数C.样品的稀释度直接影响平板上的菌落数目，因此稀释度越大越好D.利用显微镜进行直接计数，可快速直观地测定样品中的活菌数13、植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是A.诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用纤维素酶和果胶酶酶解得到原生质体B.可用高Ca2+-高pH诱导原生质体融合，细胞膜融合是细胞融合完成的标志C.若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同D.两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长14、下列有关PCR的叙述，正确的有（）A.PCR所需引物和体内DNA复制所需引物不同B.引物长度和复性温度均会影响PCR扩增的特异性C.PCR产物电泳时的迁移速率与DNA分子的大小有关，与凝胶的浓度无关D.PCR预变性的目的是增加大分子模板DNA彻底变性的概率15、GAL4基因的表达产物能识别启动子中的UAS序列，从而驱动UAS序列下游基因的表达。野生型雌雄果蝇均为无色翅，且基因组中无GAL4基因和含UAS序列的启动子。科研人员利用基因工程在雄果蝇的一条Ⅲ号染色体上插入GAL4基因，雌果蝇的某条染色体上插入基因M（含有UAS序列启动子的绿色荧光蛋白基因），利用杂交实验对雌果蝇中基因M插入的位置进行判断：将上述雌雄果蝇杂交得到F1，让F1中绿色翅雌雄果蝇随机交配，观察并统计F2个表型和比例。下列说法正确的是（）A.同时含有GAL4基因和基因M的果蝇才能表现出绿色性状B.若F1中绿色翅：无色翅为1：3，则基因M插入Ⅲ号染色体上C.若F2中绿色翅：无色翅=9：7，则基因M插入Ⅲ号以外的其他常染色体上D.若F2中绿雌：无雌：绿雄：无雄=6：2：3：5，则基因M插入X染色体上评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、醋酸菌的最适生长温度为____________________℃。17、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。18、___________（简称PCR）是一种____________迅速_______________的技术，它能以极少数的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。19、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。20、请回答有关植物细胞工程的问题：

（1）在植物中，一些分化的细胞，经过________的诱导，可以脱分化失去其__________而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中，将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温_________（填：“光照”或“黑暗”）条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到_________培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到__________的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含_____的培养基上，获得所需个体。21、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____评卷人得分四、判断题(共1题，共8分)22、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共4分)23、“掌心对掌心；手心压手背，十指交叉摩，手握关节搓，拇指围轴转，指尖掌心揉，手腕别放过。”七步洗手法可以清除手部的污物和微生物，是预防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物实验小组设计了“比较洗手前后手上细菌分布情况”的探究活动：各小组成员分别将拇指在甲组培养基上轻轻按一下，然后用肥皂将该手洗干净，再将洗净后的拇指在乙组培养基上轻轻按一下。将这两组培养基放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养24小时后，统计两组培养基中菌落数目。

（1）该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以为微生物的生长提供__________________________等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入__________。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量_________的高压灭菌锅内灭菌15－30min。

（2）实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的_______，该操作应该在酒精灯火焰附近进行，原因是__________________________。

（3）统计甲乙两组培养皿中的菌落，乙组中菌落数比甲少得多，实验结果说明肥皂洗手不能彻底清除手上的微生物。为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基，洗过的手还应进行________________________等方法处理（答出1种即可）。

（4）有同学认为乙中也有菌落产生，是因为培养过程受到杂菌污染，请你在本实验的基础上设计一个简单的方案验证他的猜想是否正确，并预期结果和结论。________________________________。24、某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X；Y和Z）；每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞；需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过___________次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是___________小鼠，理由是______________。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有________，体系中出现多种类型细胞的原因是________________。

（3）杂交瘤细胞中有______个细胞核，染色体数目最多是_________条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是_____________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)25、科研人员发现了抗胰高血糖素受体的单克隆抗体具有降血糖的功能。为制备抗胰高血糖素受体的单克隆抗体；科研人员以小鼠为实验材料设计了如下实验流程。请回答下列问题：

（1）为制备抗胰高血糖素受体的单克隆抗体，科研人员以_________作为抗原处理小鼠使其成为免疫小鼠。制备单克隆抗体时，需将该抗原先后多次接种于小鼠体内，其目的是_____________。

（2）与植物细胞融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素是_____________。经过第一次筛选获得______细胞，将其转移到含_________（天然成分）的培养基中，并置于含________+5%CO2的混合气体的恒温培养箱中培养，CO2的主要作用是_____________。该实验过程中第二次筛选的原理是__________。

（3）请从激素调节的角度分析，抗胰高血糖素受体的单克隆抗体具有降血糖功能的原因是_____________。26、腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品；该食品味道鲜美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存，所以深受人们的喜欢。如图是腐乳制作的流程，根据流程回答问题：

（1）在豆腐上长出毛霉时；温度控制在_____℃，毛霉是_____核生物，代谢类型为_________________。流程图中未写出的流程是_____。

（2）含水量为_____左右的豆腐适合用来做腐乳。制作过程中；加盐的作用是_____________。

（3）制作腐乳的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成___________和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解为___________。

（4）传统工艺制作腐乳；豆腐块上的毛霉来自_____，现代工艺生产腐乳是在严格________________的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上。

（5）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，这层“皮”是____________；影响腐乳风味和质量的因素是_____________（至少列举两项）。27、叶绿体基因工程是将外源基因导入叶绿体中的一项工程技术；烟草叶绿体基因工程在基础研究；遗传改良以及生物反应器研究等方面都发挥了极为重要的作用，表现出巨大的应用前景。请回答下列问题：

(1)叶绿体基因工程常将含有外源基因的质粒包裹在金粉上，通过轰击进入叶绿体中从而实现目的基因的导入，这种目的基因导入的方法称为________。检测目的基因是否转录出mRNA的方法是______。

(2)烟草对壮观霉素（一种抗生素）具有较强的敏感性，构建基因表达载体时，质粒上的壮观霉素抗性基因可作为______，其作用是___________________。

(3)某抗病基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗病特性，需要做________实验，以确定是否具有抗性及抗性程度。如果把某抗病基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中_________（填“一定”或“不一定”）含有抗病基因。

(4)与细胞核基因相比，叶绿体基因工程能防止细胞质内的蛋白酶对目标蛋白的消化作用，其原因是______________。28、肿瘤坏死因子（TNF）在体内；体外均能杀死某些肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞的增殖作用。科研人员利用乳腺生物反应器大量生产肿瘤坏死因子。已知限制酶BamHI、HindⅢ、PstI、BglⅡ的识别序列及切点分别是G↓GATCC、A↓AGCTT、CTGC↓AG、A↓GATCT。回答下列问题：

(1)在构建基因表达载体时，能否选用PstI切割质粒和含肿瘤坏死因子基因的DNA片段，其原因是____________________；若用HindⅢ和BglⅡ切割含肿瘤坏死因子基因的DNA片段，除选用HindⅢ和BglⅡ组合外还可以选用__________________组合切割质粒。

(2)利用PCR技术扩增TNF基因时，扩增过程可以在__________中自动完成。已知DNA复制时，只能从子链的5′端向3′端开始延伸，据此可知应选择下图甲、乙、丙、丁四种引物中的__________作为引物，若扩增4次，共需要引物__________个。

(3)科学家需将TNF基因与__________重组在一起，通过__________等方法，导入哺乳动物的_________中，由其发育成的转基因动物进入泌乳期后，可以在其分泌的乳汁中获取所需要的TNF。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】试题分析：用茎尖；根尖等分生组织进行植物组织培养能获得的脱毒苗；A错误；白菜和甘蓝经体细胞杂交过程培育出杂种植株，植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株．B错误；转入抗虫基因的烟草细胞培育出转基因植株，涉及到基因工程和植物组织培养技术，C错误；二倍体水稻的种子经秋水仙素处理后培育出四倍体，属于多倍体育种，不需要采用植物组织培养技术，D正确．

考点：植物克隆2、D【分析】【分析】

酿酒时必须要用酒曲；加入酒曲的目的是：接种酵母菌，酵母菌首先将糯米中的淀粉分解成葡萄糖，然后让酵母菌在无氧的条件下，将葡萄糖分解生成酒精和二氧化碳。酵母菌的生活需要适宜的温度，防止温度太高将酵母菌杀死，过低又会降低酵母菌的活性，因此一般需将煮熟的糯米冷却到常温后再接种酵母菌。

【详解】

A；酒曲中含有酵母菌和霉菌；它们属于微生物，能分泌多种酶，把淀粉转化为葡萄糖，再把葡萄糖转化为酒精，A正确；

B；用水浸泡酒曲后；其内的微生物吸收水分，代谢能力增强，代谢加快，B正确；

C；酵母菌在无氧的条件下；将葡萄糖分解生成酒精和二氧化碳，C正确；

D；酵母菌的生活需要适宜的温度；用煮沸的水浸泡酒曲会将酒曲内的微生物杀死，D错误。

故选D。3、D【分析】【分析】

1；卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加。2、桑葚胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）。3、囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘（可用于性别鉴定）；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。4、原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；囊胚的内细胞团将来可发育成胎儿的各种组织；A错误；

B；囊胚期的滋养层细胞可用于性别鉴定；B错误；

C；囊胚期细胞分化是由于基因的选择性表达；C错误；

D；囊胚的进一步扩大会导致透明带的破裂；D正确。

故选D。

【点睛】4、C【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，细胞分化在胚胎期达到最大限度。

【详解】

A；卵裂期细胞分裂方式为有丝分裂；A错误；

B；胚胎总体积不变甚至略微减小；B错误；

C；随着细胞分裂；细胞数目增多，每个细胞的DNA含量不变，但胚胎总DNA增加，C正确；

D；卵裂期没有吸收外来的有机物；消耗的是细胞中原有的有机物，因此，胚胎有机物总量减少，D错误。

故选C。

【点睛】5、B6、B【分析】【分析】

微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个或几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态、大小、颜色等特征，D错误。

故选B。7、D【分析】【分析】

葡萄酒制作过程中；将装配好的发酵瓶放在25℃～30℃环境条件下发酵，当发酵瓶中停止出现气泡，表示发酵完毕。若发酵过程温度高于30℃，则需及时采取降温措施，主要为了防止影响酒的风味。

【详解】

A；参与果酒制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，所以米酒发酵过程中，酵母菌进行细胞呼吸的类型是有氧呼吸和无氧呼吸，A正确；

B；蒸米后；温度较高，通常需要进行冷却，再加入酒曲，其目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物，B正确；

C；酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌；霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉转化成葡萄糖，葡萄糖能为醇母菌的呼吸作用提供底物，C正确；

D；腐乳发酵过程中；起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D错误。

故选D。8、A【分析】【分析】

胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸；丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；本研究主要涉及早期胚胎培养、胚胎移植等现代生物技术；没有体外受精技术，A错误；

B；诱导多能干细胞原理是细胞的增殖；所以可以利用成体的成纤维细胞、B细胞诱导多能干细胞，B正确；

C；在伦理层面；人猪嵌合体会面临巨大的挑战，C正确；

D；人猪嵌合胚胎研究为解决移植器官来源不足和免疫排斥问题带来光明前景；D正确。

故选A。9、D【分析】【详解】

A．常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落；液体培养基无法分离，A错误；

B．若培养基需要调节pH；应该在灭菌前进行，B错误；

C．显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法；固体培养基上用稀释涂布法直接计数单个菌落数，C错误；

D．平板倒置是避免冷凝的液体掉到培养基上；污染培养基，D正确；

答案选D。二、多选题(共6题，共12分)10、A:B:C【分析】【分析】

基因工程的原理是基因重组；把一种生物的基因转入另一种生物后，目的基因可以在受体细胞中表达出相应的蛋白质。

【详解】

A；细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入棉花体内；在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫蛋白，使棉花具有抗虫能力，A正确；

B；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因；人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶，B正确；

C；动物胰岛素基因可通过转基因技术转移到大肠杆菌体内；在大肠杆菌工程菌细胞中合成动物胰岛素，C正确；

D；兔属于哺乳动物；其成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器，所以不可能表达出血红蛋白，D错误。

故选ABC。

【点睛】11、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养过程：离体的植物器官；组织或细胞→愈伤组织→胚状体→植物体。常用的植物激素生长素和细胞分裂素。

【详解】

A；图中对根段进行消毒；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，防止培养过程中杂菌污染，又减少消毒剂对细胞的伤害，A正确；

B；步骤③切取的组织块中要带有形成层；形成层的细胞保持分裂和分化能力，全能性相对容易表现出来，形成层容易诱导形成愈伤组织，B正确；

C；从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为诱导愈伤组织形成的植物激素和诱导愈伤组织分化的植物激素的种类和比例不同；C错误；

D；步骤⑥要进行照光培养；诱导叶绿素的形成，因为叶绿素的形成需要光照，使试管苗能够进行光合作用，D正确。

故选ABD。12、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时；主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。

【详解】

A；以尿素作为唯一氮源的培养基为选择培养基；可从土壤中分离出分解尿素的细菌，A正确；

B；平板划线法能将单个微生物分散到培养基上；从而分离得到单菌落，但是不可以用来测定样品中的活菌数，稀释涂布平板法可以计数，B错误；

C；样品的稀释度太大；会导致微生物数量太少，一般要求稀释后平板上的菌落数在30到300之间比较合适，C错误；

D；利用显微镜进行直接计数；可快速直观地测定样品中的活菌数和死菌数，D错误。

故选BCD。13、A:D【分析】【分析】

植物体细胞杂交过程：1；酶解法去壁获取原生质体；2、人工诱导原生质体融合；3、再生出新细胞壁；标志着原生质体融合完成；4、经脱分化和再分化过程，通过组织培养把杂种细胞培育成杂种植株。

【详解】

A；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；因此先用纤维素酶和果胶酶酶解得到原生质体，A正确；

B；植物细胞融合完成的标志是再生形成新的细胞壁；B错误；

C；若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长；说明两种突变体的植物体细胞杂交后代能够合成硝酸还原酶，即两种突变体的突变基因位点不同，杂交后未突变的基因重新组合在一起，控制了硝酸还原酶的合成，C错误；

D；据题可知；植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，两种突变体烟草硝酸还原酶都缺失，因此均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长，D正确。

故选AD。14、A:B:D【分析】【分析】

PCR原理：在高温作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

A；PCR所需引物是一小段DNA；体内DNA复制所需引物是一小段RNA，A正确；

B；由于引物的序列具有特异性；所以PCR扩增的特异性一般是由引物的特异性决定的，当复性温度高时，只有引物与模板碱基匹配程度高，才能结合到模板上，而引物与模板匹配度低的区域则不能结合，所以引物长度和复性温度均会影响PCR扩增的特异性，B正确；

C；PCR产物电泳时的迁移速率与DNA分子的大小有关和凝胶的浓度有关；C错误；

D；在循环之前；常要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率，D正确。

故选ABD。15、A:D【分析】【分析】

分析题意可知，GAL4基因可以控制GAL4蛋白的表达，它能够与特定的DNA序列UAS结合，并驱动UAS下游基因的表达。将GAL4基因插入到雄果蝇的Ⅲ号染色体上(一条常染色体上)，UAS绿色荧光蛋白基因随机插入到雌果蝇某条染色体上，但无法表达(亲代雌果蝇缺乏GAL4蛋白)。同时具备GAL4和UAS-绿色荧光蛋白基因的果蝇，才能合成GAL4蛋白驱动UAS下游的绿色荧光蛋白基因表达，从而表现出绿色性状。为便于理解，假设插入GAL4基因用A表示(没有该基因用a表示)，插入UAS绿色荧光蛋白基因用B表示(没有该基因用b表示)。UAS-绿色荧光蛋白基因插入的位置有3种可能：Ⅲ号染色体上(则雄、雌基因型可表示为Aabb×aaBb，遵循连锁定律)，其他常染色体上(则雄、雌基因型可表示为Aabb×aaBb，遵循自由组合定律)、X染色体上(则雄、雌基因型可表示为AaXbY×aaXBXb；遵循自由组合定律)。

【详解】

A；同时具备GAL4和UAS-绿色荧光蛋白基因（M基因）的果蝇；才能合成GAL4蛋白驱动UAS下游的绿色荧光蛋白基因表达，从而表现出绿色性状，A正确；

B、若绿色荧光蛋白基因（M基因）插入Ⅲ号染色体上，发生基因连锁，假设插入GAL4基因用A表示(没有该基因用a表示)，插入UAS绿色荧光蛋白基因用B表示(没有该基因用b表示)，则亲本为Aabb×aaBb，则F1中绿色翅（AaBb）：无色翅（Aabb、aaBb、aabb）为1：3，若插入Ⅲ号染色体以外的染色体上，两对基因遵循基因组合定律，则亲本仍为Aabb×aaBb，F1中绿色翅（AaBb）与无色翅（Aabb、aaBb、aabb）比例仍为1：3；B错误；

C、若F2中绿色翅：无色翅=9：7，则说明两种基因自由组合，故绿色荧光蛋白基因（M基因）没有插入Ⅲ号染色体上，但不能确定荧光蛋白基因的具体位置，不一定就在常染色体上，也可能在X染色体上，C错误；

D、若F2中绿色翅雌性：无色翅雌性：绿色翅雄性：无色翅雄性=6：2：3：5；雌雄中绿色翅和无色翅比例不同，说明与性别相关，则可以得出荧光蛋白基因（M基因）插入X染色体的结论，D正确。

故选AD。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】30～3517、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】多聚酶链式反应体外扩增DNA片段19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7520、略

【分析】【分析】

植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

（1）在植物中；一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中；将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温黑暗条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含一定浓度的盐的培养基上，获得所需个体。

【点睛】

本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的过程、原理及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确分析，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.激素②.特有的结构和功能③.黑暗④.分化⑤.培养条件和外界压力⑥.一定浓度的盐21、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。四、判断题(共1题，共8分)22、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。五、实验题(共2题，共4分)23、略

【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。

2；微生物实验中无菌技术的主要内容：

（1）对实验操作的空间；操作者的衣着和手；进行清洁和消毒。

（2）将用于微生物培养的器皿；接种用具和培养基等器具进行灭菌。

（3）为避免周围环境中微生物的污染；实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

【详解】

（1）该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏；蛋白胨、NaCl和水；蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，故蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入琼脂。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量水的高压灭菌锅内灭菌15-30min。

（2）实验中“将拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的接种；该操作应该在酒精灯火焰附近进行，这样能够保证接种时处于一个无菌的环境，防止周围环境中的微生物污染培养基。

（3）为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基；洗过的手还应酒精棉球擦拭双手；带消毒手套等方法处理。

（4）有同学认为乙中也有菌落产生；是因为培养过程受到杂菌污染，若要验证乙培养基是否被污染，需要再加一个不接种的相同培养基作为对照，与甲乙在相同条件下培养，若该培养基上没有生长菌落，说明培养过程中未被杂交污染，故猜想错误；若该培养基上生长菌落，则说明猜想正确。

【点睛】

本题主要考查微生物的分离和培养，解题关键是识记培养基的概念、微生物实验中无菌技术和实验操作等知识，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。【解析】碳源、氮源和维生素琼脂水接种避免周围环境中的微生物污染培养基酒精棉球擦拭双手、戴消毒手套等再加一个不接种的相同培养基（空白培养基），与甲乙在相同条件下培养，若该培养基上没有生长菌落，说明培养过程未被杂交污染，猜想错误；若该培养基上生长菌落，说明培养基中被杂菌污染，猜想正确24、略

【分析】【详解】

本题以杂交瘤细胞为背景；考查了动物细胞融合；细胞分裂和细胞分化。

（1）在第四次免疫后；Y的血清抗体效价大于16000，所以最少需要经过四次免疫.由图可知，血清抗体效价均达到16000以上时，Y的效价最大，最适合用于制备B淋巴细胞。

（2）B细胞与骨髓瘤细胞在一起融合时；可能发生B细胞与骨髓瘤细胞融合，B细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和B细胞与骨髓瘤细胞融合。由于细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故体系中会出现多种类型的细胞。

（3）由于核膜也具有流动性；故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。B细胞有40条染色体，骨髓瘤细胞有60条染色体，融合后的杂交瘤细胞有100条染色体。

（4）未融合的B淋巴细胞是已分化的细胞；不能无限增殖，所以多次培养后不能存活。

【点睛】

本题考查动物细胞工程，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。【解析】4YY小鼠的血清抗体效价最高B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%1100不能无限增殖六、综合题(共4题，共20分)25、略

【分析】【分析】

1；单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。

2；诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。

【详解】

（1）制备单克隆抗体时；应注射相应的抗原，则制备抗胰高血糖素受体的单克隆抗体时，以胰高血糖素受体作为抗原处理小鼠使其成为免疫小鼠。制备单克隆抗体时，多次接种抗原可加强免疫，增加抗体和记忆细胞的数量。

（2）与植物细胞融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。经过第一次筛选可以获得杂交瘤细胞，将其转移到含动物血清的的培养基中，细胞培养应在含95%空气加5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的主要作用是调节培养基的pH。第二次筛选的目的是获得能产生抗胰高血糖素受体的抗体的杂交瘤细胞；依据的原理是抗原和抗体的特异性结合。

（3）抗胰高血糖素受体的单克隆抗体与胰高血糖素受体结合；使胰高血糖素不能发挥升血糖的作用，从而起到降血糖的功能。

【点睛】

本题结合单克隆抗体制备的流程图，主要考查单克隆抗体的制备过程，要求考生识记单克隆抗体制备的具体步骤，能结合题图和所学知识准确答题。【解析】胰高血糖素受体加强免疫，增加抗体和记忆细胞的数量灭活的病毒杂交瘤动物血清95%空气维持培养液的pH抗原和抗体特异性结合抗胰高血糖素受体的单克隆抗体与胰高血糖素受体结合，使胰高血糖素不能发挥升血糖的作用26、略

【分析】【分析】

腐乳的制作：

1；原理：

（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。

（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

2；流程：

3；注意的问题：

（1）腐乳制作所需豆腐的含水量及意义：豆腐含水量以70%为宜。毛霉为异养需氧型真菌；若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水。

（2）配制卤汤时酒量的控制：加酒的目的之一是杀死微生物。如果过少；达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味。一般应控制在12%左右。

【详解】

（1）在豆腐上长出毛霉时，温度控制在15~18℃，并保持一定的湿度。毛霉属于真菌，是真核生物，代谢类型为异养需氧型。腐乳制作流程为流程图中未写出的流程是加卤汤装瓶。

（2）含水量为70%左右的豆腐适合用来做腐乳。制作过程中；加盐的作用是析出水分使豆腐块变硬，同时抑制微生物生长。

（3）制作腐乳的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解为甘油和脂肪酸。

（4）传统工艺制作腐乳；豆腐块上的毛霉来自空气中的毛霉孢