2024年鲁人新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年鲁人新版选择性必修3生物上册阶段测试试卷594考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、生产中培育香蕉脱毒苗的常用方法是（）A.选择与优良品种杂交B.进行远缘植物体细胞杂交C.取一定大小的茎尖进行组织培养D.人工诱导基因突变2、在不损伤植物细胞内部的结构的情况下，下列可用于去除细胞壁的物质是（）A.蛋白酶B.纤维素酶C.盐酸D.淀粉酶3、下图是利用DNA重组技术生产能降解农药马拉硫磷的CarE制剂的流程；下列叙述正确的是（）

A.重组DNA技术的核心是将CarE基因导入受体细胞B.过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的C.过程②获取的CarE基因中不含有启动子和终止子D.重组表达载体的制备过程中需要限制酶和DNA聚合酶4、基因工程自20世纪70年代兴起后得到了飞速发展，目前已经成为生物科学的核心技术，下列有关基因工程的应用的描述正确的是（）A.利用农杆菌转化法培育得到的转基因植物，可能会引起基因污染B.从人类基因组文库中获得胰岛素基因导入大肠杆菌，可获得具生物学功能的胰岛素C.用基因枪法将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，可培育出产低乳糖牛乳的奶牛D.若将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者进行基因治疗，该基因可遗传给子代5、下列叙述正确的是（）A.家庭酿果酒，一般不对果实进行严格消毒，主要是保留水果的原味B.变酸的酒表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的C.果酒制作过程中在果汁里加入人工培养的酵母菌会降低果酒的品质D.工业制作腐乳时，豆腐块上的毛霉主要是来自于空气中的毛霉孢子6、黄酒是中国特产，与啤酒、葡萄酒并称世界三大古酒。关于黄酒酿造方法，古遗六法中描述道∶黍米必齐、曲蘖必时、水泉必香、陶器必良、湛炽必洁、火剂必得（注∶曲蘖主要指酒曲，湛炽是指浸泡和蒸煮）。下列叙述错误的是（）A.黄酒中的酒精是酵母菌利用"黍米"经无氧呼吸产生的代谢产物B."曲藜"制作的季节不同，可能会影响到酵母菌的种类和数量C."陶器必良"和"火剂必得"是为了控制发酵过程的环境条件D."湛炽"的目的是灭菌，确保发酵过程中无杂菌污染7、为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0．9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表，phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。转化后的大肠杆菌提取质粒，再用选中的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2．下列叙述错误的是（）

相关限制酶的识别序列及切割位点（注：箭头表示切割位点）。名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢ

A↓AGCTT

TTCGA↑AEcoRIG↓AATTC

CTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTG

GTC↑GACPstICTGC↓AG

GA↑CGTCKpnIG↓GTACC

CCATG↑GBamHIG↓GATCC

CCTAG↑G

A.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因B.为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列C.需用CaCl2处理大肠杆菌制备感受态细胞，以提高转化率D.图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)8、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器9、下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-）；在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（）

A.可用灭活病毒诱导细胞融合B.未融合的细胞和融合的同种核细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的选择透过性是细胞融合的基础10、下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是（）A.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程C.出现接触抑制现象后接下来的细胞培养过程D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程11、基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA；限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正确的是（）

A.构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体B.构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体C.图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA12、某实验室做了下图所示的实验研究；有关叙述正确的是（）

A.与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较高B.过程②是诱导干细胞中基因选择性表达的结果C.过程③得到的Z细胞还需进行克隆化培养和抗体检测及多次筛选D.图中的肝细胞、神经细胞及Y细胞具有相同的基因组成13、野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述正确的是（）

A.图中①②④为完全培养基，③为基本培养基B.A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量C.B的正确操作是用涂布器蘸取菌液后均匀地涂布在②表面D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养14、让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。下列说法不正确的是（）

A.图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等B.进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状D.通过上述技术得到小羊a和b的过程为有性生殖15、培养胡萝卜根组织可获得试管苗；获得试管苗的过程如图所示。

有关叙述正确的是（）A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害B.步骤③切取的组织块中要带有形成层，因为形成层容易诱导形成愈伤组织C.从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为有害代谢产物积累D.步骤⑥要进行照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用16、甲流试剂盒中的抗血凝素单克隆抗体能与甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗HA单克隆抗体的流程如图，下列叙述正确的是（）

A.制备抗HA单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过HA的小鼠脾脏B.在特定的选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡C.放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能产生所需抗体D.将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)17、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地说，就是按照_____，把一种生物的_____提取出来，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遗传性状。18、功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中______部位的两个核苷酸之间的______断开，因此具有______。19、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。20、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。21、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、判断题(共1题，共3分)22、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。（选择性必修3P94）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共16分)23、单克隆抗体特异性强；灵敏度高，用于诊疗疾病具有准确；高效等特点。下图表示单克隆抗体制备过程。

回答下列问题：

（1）若细胞B是小鼠的骨髓瘤细胞；则A是_________________细胞，诱导d过程常用的因素是_________________（答出一个即可）。

（2）用于筛选细胞D的培养基必需满足两个条件：一是_________________细胞都会死亡；二是保证_________________细胞能生长。

（3）使用合成培养基体外培养杂交瘤细胞时；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合气体的培养箱中进行培养。

（4）制备抗新冠病毒单克隆抗体检测试剂，可用_________________（选填数字标号：①新冠病毒灭活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒灭活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以获得图中的A细胞。24、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。25、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。26、新冠病毒竟然是友军？近日有媒体报道称感染新冠病毒可以治疗肺癌；该报道中的结论是基于美国科学家发表的一篇论文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可缓解肺癌发展》。该研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1进行了体内和体外实验，分析回答下列问题：

(1)体外实验：首先培养肺癌细胞，在细胞培养液中除了加入必要的营养物质外，还加了一定浓度的________以防止杂菌污染，细胞瓶放在37℃的________中培养。随后用刺突蛋白S1处理肺癌细胞并检测细胞的凋亡率，结果如图1。结果表明________。

(2)小鼠体内实验：流程如图2，实验结果如图3。其中NNK是尼古丁的衍生物亚硝胺酮，长时间对小鼠进行NNK处理的目的是________。

(3)对比体内实验和体外实验的结果发现刺突蛋白S1在体内抑癌的效果比体外的效果好得多，推测原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系统的________功能激活。为了进一步确认肺部肿瘤比例的减少到底是不是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用，还应增加一组对照为NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以证明感染新冠病毒可以治疗肺癌？请做出判断并说明理由________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)27、养殖家禽的饲料中富含谷物；纤维素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加于饲料中，以提高家禽养殖效率。

（1）枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶；这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙链为转录模板链，转录时mRNA自身延伸的方向为5'→3'。

①很多启动子具有物种特异性，在图1质粒中插入W基因，其上游启动子应选择___________（填正确选项前字母）。

A．枯草芽孢杆菌启动子B．乳酸杆菌启动子C．农杆菌启动子。

②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点；图1；图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

。限制酶。

EcoRI

BamHI

KpnI

MfeI

HindIII

识别序列及切割位点。

根据上述信息，应使用限制酶___________切割图1中质粒，使用限制酶___________切割图2中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含抗生素_______的培养基筛选；以得到转入W基因的乳酸杆菌。

（2）为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力；研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上，另取部分菌液上清液测定酶活力，实验方案及测定结果如下表所示。

。菌种酶活性相对值乳酸杆菌未检出X未检出导入了重组质粒的乳酸杆菌0．96表中的X应为___________。若要检测导入重组质粒的乳酸杆菌是否合成了纤维素酶的方法是_____________。

（3）解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中，使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。采用显微注射的方法将重组质粒导入_________细胞中，上述研究方法与该思路相比，有哪些优点_________________（写出2点）。28、新冠疫情出现后；病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。

(1)新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是______；再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。

(2)为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的______来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是______。

(3)某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明______（答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明______。

(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是______。29、重症联合免疫缺陷（SCID）是一种罕见的遗传病；该病可能为腺苷脱氨酶ADA缺陷所致，ADA活性下降将使淋巴细胞损伤或死亡，导致细胞；体液免疫缺陷。ADA活性缺陷性疾病为常染色体隐性遗传病。请回答：

(1)某医疗小组利用一种经过修饰的腺病毒作为运载体，将治疗SCID的正常基因导入取自病人体内的造血干细胞内，然后移植给病人，这些造血干细胞再经____________形成淋巴细胞，可正常发挥免疫功能。这种对SCID患者进行治疗的方法称为____________。

(2)有一对正常的夫妇生了一个患SCID的儿子，他们希望通过设计试管婴儿再生一个不携带致病基因的健康的孩子。设计试管婴儿的基本程序：首先为女性注射______________，进行促排卵，然后从卵巢中吸取卵母细胞，培养到MⅡ期；再将成熟的卵子与获能的精子经______________形成受精卵，然后继续培养受精卵获得早期胚胎；从早期胚胎中取出______________细胞进行______________；选择无致病基因的胚胎进行移植。

(3)这对夫妇用该试管婴儿的脐带血救治患病孩子。大多数人认为，用设计试管婴儿的办法救治自己的孩子是符合伦理道德的，理由是____________________________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、C【分析】【分析】

该题主要考察了植物细胞工程的应用；制备脱毒苗需要用到植物组织培养技术，通过无性繁殖繁育没有病毒侵染的植株，该过程需要培养的细胞本身没有病毒或者有少量病毒。

【详解】

A；选择优良品种进行杂交会使子代获得优良性状；不会消除病毒，A不符合题意；

B；进行远缘植物体细胞杂交；会使得两个亲本的原生质体进行融合，该过程中细胞内的病毒不会消失，B不符合题意；

C；植物长期无性繁殖；病毒在体内积累，植物的茎尖无毒或病毒极少，可以组织培养获得无病毒植株，C项符合题意；

D；基因突变只会获得优良性状；不会使得体内的病毒消失，D不符合题意。

故选C。

【点睛】2、B【分析】【分析】

植物细胞工程中在不损伤植物细胞的结构的情况下除去细胞壁的方法是酶解法；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，即用纤维素酶和果胶酶处理，使细胞壁溶解。

【详解】

植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；在不损伤植物细胞内部结构的情况下，可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，以去除细胞壁，B正确。

故选B。3、C【分析】【分析】

根据题意和图示分析可知：图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。

【详解】

A；重组DNA技术的核心是构建基因表达载体；A错误；

B；过程①表示通过反转录法合成目的基因；该过程是在体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，B错误；

C、目的基因是通过逆转录法获得的，该方法获得的目的基因不含启动子和终止子，因此过程②获取的CarE基因中不含有启动子和终止子；C正确；

D；重组表达载体的制备过程中需要限制酶和DNA连接酶；D错误。

故选C。

【点睛】4、A【分析】【分析】

基因工程是指按照人类的愿望；将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术，其原理是基因重组。

【详解】

A；农杆菌转化法把目的基因导入到受体细胞的染色体DNA上；目的基因有可能通过减数分裂进入精子，若果精子与野生型同种生物的卵细胞受精则会造成基因污染，A正确；

B；从人类基因组文库中获得胰岛素基因有内含子；在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出胰岛素，B错误；

C；动物基因工程常用的是显微注射技术；基因枪法属于植物转基因方法之一，C错误；

D；由于此处基因治疗是把表达载体导入淋巴细胞；而淋巴细胞不会产生配子，故目的基因不会传给子代个体，D错误。

故选A。5、B【分析】【分析】

1.果酒制作菌种是酵母菌；代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

2.果醋制作菌种是醋酸菌；属于原核细胞，适宜温度为30～35℃，需要持续通入氧气。

3.腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉；酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。

【详解】

A；家庭酿果酒；一般不对果实进行严格的消毒，主要是保留水果的酵母菌原种，A错误；

B；在有氧条件下醋酸菌能将酒精转变为醋酸；据此可知，变酸的酒表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；

C；果酒制作过程中在果汁里加入人工培养的酵母菌会提高果酒的品质；因为人工培养的酵母菌纯度较高，C错误；

D；传统工艺制作腐乳时；豆腐块上的毛霉来自于空气中的毛霉孢子，而工业制作腐乳时，豆腐块上的毛霉是人工获得的优良的毛霉菌种，D错误。

故选B。

【点睛】6、D【分析】【分析】

果酒和果醋的制作原理。

【详解】

A；酵母菌无氧呼吸产酒精；黄酒中的酒精是酵母菌利用"黍米"经无氧呼吸产生的代谢产物，A正确；

B."曲藜"制作的季节不同；温度；湿度等环境条件会有所改变，可能会影响到酵母菌的种类和数量，B正确；

C."陶器必良"是为了有良好的容器从而控制好发酵过程气体条件；"火剂必得"也是为了控制发酵过程的环境条件，C正确；

D."湛炽"的目的是消毒；发酵过程酒精的产生和培养液的酸性环境会抑制其他杂菌生长，D错误。

故选D。7、B【分析】【分析】

限制酶的选择不能破坏目的基因；不能破坏载体上的关键结构，比如启动子；终止子、复制原点等。

【详解】

A、需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因；A正确；

B；目的基因应导入启动子和终止子之间。图中看出；两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶的识别序列，B错误；

C、需用CaCl2处理大肠杆菌制备感受态细胞；以提高转化率，C正确；

D；用EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶切割质粒；会获得一大一小两个片段，图2中3号的质粒酶切后得到一大一小两个片段，很可能是含目的基因的重组质粒，D正确。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)8、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。9、A:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等；A正确；

B；两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步通过专一抗体阳性检测，把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的；D错误。

故选AC。

【点睛】10、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养时；取幼龄动物的组织，剪碎后，用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入细胞培养液中进行的培养是原代培养；当细胞贴满瓶壁，在用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬浮液，转入培养液中进行的是传代培养。

【详解】

A；通常将动物组织经处理后的初次培养称为原代培养；A正确；

B；从机体取得细胞后立即进行培养过程是原代培养；B正确；

C；出现接触抑制现象后；接去下的细胞的培养过程是传代培养，C错误；

D；无论原代培养和传代培养细胞过程；细胞都有在培养基中的悬浮生长过程，D错误。

故选AB。11、A:B:C【分析】【分析】

一种限制酶只能识别一种核苷酸序列且在特定的位点对DNA分子进行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端两种，具有相同黏性末端的DNA片段之间可以在DNA连接酶的作用下连接到一起。

【详解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；

B；由于Sau3AI的切割位点在EcoRI的左侧；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌体载体也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；

C；P1噬菌体载体为环状DNA；其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；

D；从图甲看出；用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，D错误。

故选ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

据图分析；①过程导入外源基因，类似于植物组织培养过程中的脱分化，②表示细胞分裂和分化，③表示动物细胞融合成杂交瘤细胞，④是动物细胞培养。

【详解】

A；①过程是通过诱导基因作用使纤维母细胞（高度分化）脱分化为干细胞（具有分裂和分化能力）；与纤维母细胞相比，干细胞的全能性较高，A正确；

B；②过程是干细胞再分化为其他组织器官细胞；是基因选择性表达的结果，B正确；

C；③过程是细胞融合形成杂交瘤细胞过程；需要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，需进行克隆化培养和抗体检测及多次筛选，C正确；

D；图中的肝细胞、神经细胞均来自于甲鼠；具有相同的基因组成，Y细胞来自于乙鼠，其基因组成不同，D错误。

故选ABC。13、A:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；图中首先利用培养基扩增菌体，然后在涂布在平板上，再通过影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基；完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。

【详解】

A；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长；氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题干信息和图形分析，图中①②④中含有菌落，①②④为完全培养基，③中影印处无菌落，③为基本培养基，A正确；

B；紫外线可以提高突变的频率；而A操作即培养的目的是提高已经突变菌株的浓度（A操作不能提高突变率），即增加突变株的数量，B错误；

C；B操作是将菌液滴加到培养基表面；再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；

D；从图中可看出；D在③基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。

故选AD。14、B:C:D【分析】【分析】

分析图解：图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab。

【详解】

A、图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab；故图中涉及的现代生物技术有动物体细胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，A正确；

B；进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚；因囊胚期细胞未分化，而原肠胚已经分化，不能进行胚胎分割，B错误；

C；通过图解分析可知；小羊只获得了羊N的细胞核，其细胞质中的基因不会遗传给小羊，C错误；

D；上述核移植技术得到克隆动物；属于无性生殖，D错误。

故选BCD。15、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养过程：离体的植物器官；组织或细胞→愈伤组织→胚状体→植物体。常用的植物激素生长素和细胞分裂素。

【详解】

A；图中对根段进行消毒；消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，防止培养过程中杂菌污染，又减少消毒剂对细胞的伤害，A正确；

B；步骤③切取的组织块中要带有形成层；形成层的细胞保持分裂和分化能力，全能性相对容易表现出来，形成层容易诱导形成愈伤组织，B正确；

C；从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基主要是因为诱导愈伤组织形成的植物激素和诱导愈伤组织分化的植物激素的种类和比例不同；C错误；

D；步骤⑥要进行照光培养；诱导叶绿素的形成，因为叶绿素的形成需要光照，使试管苗能够进行光合作用，D正确。

故选ABD。16、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；抗原与抗体的结合具有特异性；为制备抗HA单克隆抗体，则使用的B淋巴细胞应取自注射过HA的小鼠脾脏，A正确；

B；在特定的选择培养基上；未融合的亲本细胞（B淋巴细胞类型、骨髓瘤细胞类型）和融合的具有同种核的细胞（B淋巴细胞-B淋巴细胞型和骨髓瘤-骨髓瘤细胞型）都会死亡，B正确；

C；将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后；放入96孔板，不一定都能产生所需抗体，还需进行抗体阳性检测，C错误；

D；据图可知；图中细胞群a在加入HA抗原后呈阳性，说明细胞群a产生了抗HA抗原的抗体，故将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗HA单克隆抗体，D正确。

故选ABD。三、填空题(共5题，共10分)17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因重组基因拼接技术DNA重组技术人们意愿某种基因修饰改造另一种生物细胞里定向18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】特定磷酸二酯键特异性19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质20、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。21、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、判断题(共1题，共3分)22、A【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。

故正确。五、实验题(共4题，共16分)23、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养注意事项：

（1）原理：细胞增殖。

（2）培养基性质：液体培养基。动物细胞培养所用的培养基的成分与体内细胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清或血浆，还有适量的抗生素以保证无菌环境。

（3）需要使用动物血清。

（4）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

（5）无菌条件下进行。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素；以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（6）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

2；单克隆抗体的制备：

（1）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体。②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（2）单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖。②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体。③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

（4）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖。动物细胞融合诱导手段有电刺激、聚乙二醇、灭活的病毒等；结果产生杂交细胞。

【详解】

（1）若细胞B是小鼠的骨髓瘤细胞；则此过程可以为单克隆抗体的制备过程。故A是已经免疫的B淋巴细胞或能产生特定抗体的B细胞。动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖。动物细胞融合诱导手段（诱导d过程）有电刺激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞。

（2）一般来说；诱导A细胞和B细胞融合，形成C细胞后，必须利用选择培养基来筛选出目的细胞。那么满足的条件必须是：未融合的（亲本）细胞和融合的同种（核的）细胞都会死亡，而杂交（瘤）细胞（或杂种细胞）能够在选择培养基上生长。

（3）动物细胞培养注意事项：一是液体培养基。动物细胞培养所用的培养基的成分与体内细胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清或血浆，还有适量的抗生素以保证无菌环境。二是气体环境：95%空气+5%CO2。

（4）选用免疫原性好的细菌；病毒、立克次体、螺旋体等；经人工培养，再用物理或化学方法将其杀灭制成疫苗，即为灭活疫苗。而新冠病毒为RNA病毒，选用RNA疫苗都可以。故选③新冠病毒灭活疫苗或RNA疫苗。

【点睛】

本题考查动物细胞培养、单克隆抗体制备的相关知识，意在考查考生理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识与观点，对某些现实生活中的生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。【解析】经过（抗原、病原体）免疫的（小鼠）B（淋巴）细胞（或浆细胞，或已免疫的B细胞，或能产生特定抗体的B细胞）聚乙二醇（PEG）、灭活的（仙台）病毒、电激（或电融合）未融合的（亲本）细胞和融合的同种（核的）细胞杂交（瘤）细胞（或杂种细胞））血清（或血浆）95%空气和5%CO2③24、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体26、略

【分析】【分析】

在动物细胞培养过程中，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的抗生素。培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

【详解】

（1）培养动物细胞时，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的抗生素。培养肺癌细胞需要提供适宜温度和维持培养液的pH，因此要放在37℃的含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中培养。

根据题干“新冠刺突蛋白S1可缓解肺癌发展”及图可知；刺突蛋白能促进细胞凋亡，且在一定范围内，随着所用的刺突蛋白的浓度增大，其促进凋亡的效果越明显。

（2）NNK是尼古丁的衍生物亚硝胺酮；是致癌物，用其长时间处理小鼠目的是诱导小鼠肺部肿瘤产生，即侯建肺癌小鼠模型。

（3）由题干“刺突蛋白S1在体内抑癌的效果比体外的效果好得多”可知；在体内环境下，刺突蛋白S1激活了免疫系统的免疫监视功能，进而识别和杀伤以及清除体内的突变细胞,防止肿瘤的发生。为探究肺部肿瘤比例的减少是不是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用，还应该设计一组对照：NNK+等量其他外源蛋白，若实验组肺部肿瘤比例的减少量大于对照组，说明肺部肿瘤比例的减少确实是因为新冠病毒刺突蛋白S1的作用。

（4）由题干“媒体报道称感染新冠病毒可以治疗肺癌”可知，其自变量为是否感染新冠病毒，而论文中自变量为刺突蛋白S1处理的浓度，二者不是同种变量，刺突蛋白并不能模拟新冠病毒的感染，无法做出上述推测，因此结论并不可靠。【解析】(1)抗生素含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱刺突蛋白能促进细胞凋亡；且在一定范围内，浓度大的促进凋亡效果好。（答出自变量和因变量的定性和定量关系即可）

(2)建立肺癌小鼠模型（诱导肺部肿瘤产生）

(3)免疫监视等量其他外源蛋白。

(4)不合理（1分）自变量不同，媒体的报导中的自变量是新冠病毒的感染，论文中的是刺突蛋白S1，刺突蛋白并不能模拟新冠病毒的感染/对照设置不合理，结论不可靠（与不合理偶联，从自变量或实验设计角度合理即可）六、综合题(共3题，共9分)27、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活