检验科肌钙蛋白I测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-XZ-002版本/修订号：C/0主题内容2012新增作业指导书生效日期：20120301第4页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2012-03-01李永臣2012-03-01章林华2012-03-01肌钙蛋白I测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血浆或血清肌钙蛋白I（缩写TNI）；组合项目申请：心肌标志物组合。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约3ml，置普通试管中。采用血清标本的也可采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科，标本运送时应冷藏保温。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.5ml的全血标本，或少于0.3ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血浆或血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白，并应尽快将血浆或血清与血细胞分离。2.2.2标本保存时间：标本置2～8℃可稳定24h，需较长时间保存应将血清存放于-20℃。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，清晨禁食状态下采血。2.3.2标本应注意始终置于冷藏，并在4h内完成检测,一般急诊30分钟报告。3方法原理微粒子酶免疫测定（MEIA）：待测标本中的cTnI与包被鼠抗人cTnI单克隆抗体的微粒子反应后，加入碱性磷酸酶（AP）标记的鼠抗人cTnI抗体，形成抗体-抗原-酶标记抗体复合物，在玻璃纤维柱上洗涤，游离的抗原、抗体被洗掉，结合的抗原抗体的微粒子则被保留在纤维柱滤膜表面，加入底物4-甲基伞型酣磷酸盐(4-Mup)，在AP酶作用下，脱磷酸后形成荧光物质－甲基伞型酮(4-Mu)，其荧光强度与待测标本中的cTnICK-MB浓度成正比，由标准曲线可计算待测物的浓度。4试剂及其他用品4.1试剂盒名称:cTnI。4.2试剂盒来源/产品号：美国雅培公司。4.3试剂盒保存：在2~8℃冰箱保存下可稳定至有效期内，不可冰冻。在仪器试剂仓内可稳定336h。4.4试剂盒准备：液体试剂，开盖后即可使用。4.5试剂盒主要成分：R1a：磁性微粒子结合的单克隆抗cTnI抗体R1b：0.1NNaOHR1c：包被AP酶的单克隆鼠抗cTnI抗体4.6其他用品准备：RV杯、样品杯、1号液MUP底物、3号液MatrixCell洗涤液、4号液Line稀释液。5校准品与校准模式采用美国雅培公司提供的定标液和标准曲线校正模式。6质控品与室内质控规则6.1每星期或更换新瓶或新批号试剂时做室内质控。6.2根据每批号质控品的BNP的均值及失控线，作Levey-Jennings控制图。质控结果如超过失控线，查找原因纠正。7适用仪器Architecti1000SR美国雅培公司。8标本检测步骤检测的阶段步骤：装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数自动进行分析。标本用量50µL。10结果计算由于是非线性标准模式，仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。结果单位以ng/mL表示。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0～50ng/mL，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV3.0%～5.1%，批间CV3.9%～5.2%。12.2分析范围：0～30ng/mL。12.3分析灵敏度：0.42ng/mL。12.4准确性：回收试验结果，回收率96%～106%。12.5方法的有限性及干扰因素：CK-MB至50000ng/mL未见钩状效应。血红蛋白512mg/dL或甘油三酯3000mg/dL时，在允许精度范围内无影响。胆红素的浓度超过100mg/L时，产生负干扰。13参考范围及医学决定水平0-0.4ng/mL14临床意义14.1存在形式：心肌肌钙蛋白有三种存在形式,cTnT，cTnI，cTnC，故cTn是心肌细胞所特有的成分，其血清浓度增高是心肌损伤的特异性生化标志。14.2cTnI是最重要的心肌标志物之一，在证实急性心肌梗塞（AMI）的4-6小时，血清水平即可升高，随着坏死的肌原纤维不断崩解破坏，固定于其上的cTnI不断释放入血，常于11-24小时后达峰值，约1周后降至正常水平。14.3监控AMI融栓治疗时再灌注情况有确切功。成功的溶栓疗法使冠脉复通后30、60分钟后血清cTnI还会继续升高。14.4cTnI可敏感地测出不稳定型心绞痛的微小心肌损伤和非Q波心肌梗死。不稳定型心绞痛病人血中cTnI阳性率20-40%，明显优于CK-MB。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与其他肾上腺或垂体功能有关的等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16有关引用程序与文件16.1Architecti1000SR分析仪仪器标准操作规