2024-2025学年广东省广州市越秀区荔湾区高三下第六次模拟考试生物试题含解析

2024-2025学年广东省广州市越秀区荔湾区高三下第六次模拟考试生物试题注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．为探究酵母菌的呼吸方式，在连接CO2和O2传感器的100mL锥形瓶中，加入40mL活化酵母菌液和60mL葡萄糖培养液，密封后在最适温度下培养。培养液中O2和CO2相对含量变化见图。有关分析正确的是（）A．t1→t2，酵母菌的繁殖速率不断上升B．t3时，酵母菌产生ATP的场所只有细胞溶胶C．若适当提高温度，O2相对含量达到稳定所需时间会缩短D．到t3时，酵母菌需氧呼吸强度才为零2．如图表示机体由T1环境进入T2环境的过程中产热量和散热量的变化。下列叙述不正确的是（）A．根据图示信息可知T2<T1B．曲线A表示散热量，曲线B表示产热量C．a～b是因为进入T2环境中散热量增加D．T2环境中机体产热量和散热量均高于T1环境3．高危型HPV（一种病毒）的持续感染是引起子宫颈癌的最主要因素之一，某人宫颈分泌物的高危型HPV的DNA检测报告如下表所示，下列说法完全正确的是（）检测项目检测方法检测比值正常比值高危型HPV的DNA检测分子杂交法2．29<2．22①HPV的遗传物质主要是DNA②被检测者未感染高危型HPV③分子杂交法涉及碱基互补配对原则④若检测比值等于2，则可判断被检测者是宫颈癌患者A．①③ B．①④ C．②③ D．②④4．在逻辑数学中，若由甲推不出乙而由乙可以推出甲，则称甲是乙的必要不充分条件。下列不满足甲、乙这种关系的是（）A．甲表示细胞癌变，乙表示细胞内的遗传物质发生了改变B．甲表示细胞处于分裂后期，乙表示染色体的着丝点断裂C．甲表示基因遵循分离定律，乙表示基因遵循自由组合定律D．甲表示内环境稳态，乙表示机体进行正常的生命活动5．已知赤霉素（GA）能调节α-淀粉酶基因的表达。研究人员用GA处理大麦糊粉层细胞并检测发现细胞中SLN1蛋白在5min后开始减少，而GAMYB基因和α-淀粉酶基因的mRNA则分别在1h和3h后开始增加。据此，为进一步确定SLN1基因、GAMYB基因在GA调节α-淀粉酶基因表达过程中是否发挥作用及相互关系，研究人员用GA处理相应的大麦糊粉层细胞材料后，检测SLN1基因、CAMYB基因、α-淀粉酶基因的mRNA含量变化。则实验中不需要的材料是（）A．仅敲除SLN1基因的大麦糊粉层细胞B．仅敲除GAMYB基因的大麦糊粉层细胞C．敲除SLN1基因和CAMYB基因的大麦糊粉层细胞D．敲除SLN1基因、GAMYB基因和α-淀粉酶基因的大麦糊粉层细胞6．科研人员研究赤霉素（GA3）对NaCl胁迫下红小豆种子萌发过程中芽长和根长的影响，实验处理方法和实验结果如下表所示。下列叙述正确的是处理方法芽长(cm)根长(cm)蒸馏水（D组）5.604.26150mmol/LNaCl溶液（S组）1.961.86S组+10mmol/LGA33.043.06S组+30mmol/LGA34.083.12S组+50mmol/LGA34.843.42A．该实验只有D组为对照组B．50mmol/LGA3是缓解胁迫的最适浓度C．与盐胁迫下相比，实验范围内GA3的浓度均具有缓解胁迫的作用D．实验说明加入一定浓度的GA3能使红小豆种子在盐胁迫下正常萌发二、综合题：本大题共4小题7．（9分）基因工程是上世纪70年代出现的一门生物技术。不论你是“挺转派”还是“反转派”，都改变不了“基因工程是生物学最具生命力和最引人注目的前沿科学之一，是现代生物技术的代表”这一事实。回答下列问题：（1）基因工程是在____________水平上进行设计和施工的。（2）基因工程的基本工具包括____________、____________和载体。通常使用的载体除质粒外，还有____________、____________等。（3）DNA分子经切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。在“缝合”双链DNA片段时，只能将互补的黏性末端连接起来的酶是____________；既可以将互补的黏性末端“缝合”，又可以将平末端“缝合”的酶是____________。（4）最近“基因编辑婴儿——露露和娜娜”事件备受关注。2018年11月27日，122位国内科学家在微博发布“科学家联合声明”，对此表示坚决反对和强烈谴责。据研究者声称“这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后能天然抵抗艾滋病”。但此事件中两个婴儿的诞生严格意义上讲并不属于基因治疗的范畴。基因治疗是把____________，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病最有效的手段。8．（10分）徒步探险是一种惊险、刺激的户外运动．在户外复杂条件下，人体内环境依靠“信息传递和反馈调节”维持各器官、系统的协调活动．请回答下列有关问题：（1）在高寒山区徒步探险中，下丘脑的神经分泌细胞加强分泌______激素，最终使甲状腺激素含量上升，增加产热抵御寒冷，此过程甲状腺激素分泌的调节属于______调节。（2）在丛林探险中，人体容易感染森林脑炎病毒，它是一种嗜神经性较强的病毒．其遗传物质RNA进入细胞在______的催化下合成DNA并在细胞中增殖后大量释放引发病毒血症。某些位于突触间隙的病毒与突触结构中的______上受体识别后进入神经末梢，在细胞中移动方向与反射活动中兴奋的传递方向反向进行，最终入侵到神经中枢。（3）正常人体水平衡调节和体温调节中激素含量能够保持相对稳定的原因是存在______调节。在缺少水源的荒漠戈壁中，若头部受伤失血且下丘脑水平衡中枢受损，从激素调节角度分析伤者血量恢复正常更难的原因是______。9．（10分）种群密度是种群最基本的数量特征，而丰富度是群落中物种数目的多少，请回答种群密度和丰富度的调查相关问题。（1）在调查分布范围较小、个体较大的种群时，可以逐个计数；在多数情况下，逐个计数非常困难，需要采取估算的方法。若要调查一块农田中农作物植株上蚜虫的种群密度可采用____法，此法取样的关键是____；若要调查一块农田中某种鼠的种群密度可采用____法，鼠被捕获一次以后更难捕捉到，由此推测该调查结果与真实结果相比____（偏大/相等/偏小）；若要调查农田中某种趋光性昆虫的种群密度可用_______法。（2）若要调查农田土壤中小动物类群的丰富度，常用____的方法，丰富度的统计方法通常有两种：____和目测估计法，而样方法常用的取样方法有：等距取样法和五点取样法。（3）将酵母菌接种到装有10ml液体培养基的试管中，培养一段时间后，若要测定培养液中的菌体数，可在显微镜下用_______直接计数，计数后发现，试管中该种菌的总数达到a时，种群数量不再增加。由此可知，该种群增长曲线为S型，且种群数量为时_______，种群增长速度最快。10．（10分）回答下列（一）、（二）小题。（一）镇江香醋素以“酸而不涩、香而微甜、色浓味鲜”而蜚声中外。下图是镇江香醋的生产工艺简化流程：（1）蒸煮的目的：使原料在高温下灭菌，同时_________，淀粉被释放出来，淀粉由颗粒状变为溶胶状态。（2）由于酵母菌缺少淀粉水解酶系，糯米需经蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化，后加入糖化酶糖化，目的是_________。30min后，装入发酵罐再接入酵母进行_________。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高_________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。（3）醋酸发酵时酒精应先_________，否则会因浓度过高抑制醋杆菌的增殖。发酵过程需敞口操作，麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料，其目的是_________。发酵过程中可通过高效液相色谱技术对多种有机酸组成及动态变化进行研究。将_________在相同的色谱条件下进行检测，绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。（4）黑曲霉可产生a-淀粉酶用于液化，还可以产生果胶酶将果胶彻底分解为_________。（二）请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。（1）质粒的抗性基因是常用的_________标记，如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。当外源基因插入这样的酶切位点时，会使该抗性基因失活，这时宿主菌变为对该抗生素_________的菌株，容易检测出来。（2）双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端，但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把_________连接起来，从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。影响DNA连接反应的因素有_________（写出两点）。（3）花药培养是单倍体克隆的主要方法。花药再生植株的产生有两条途径：一是烟草等植物通过形成花粉胚的_________途径，二是水稻等植物通过产生芽和根的_________途径，最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物，还可以得到来源于花药体细胞的_________植株，因此需要对后代进行进一步的筛选。11．（15分）在适宜的温度和光照条件下，将A、B两种绿色植物分别置于相同的密闭容器中，测量容器中CO2浓度的变化情况，结果如图所示。回答下列问题：（1）A、B两种植物细胞固定CO2的场所是____________。当CO2浓度约为0.8mmol/L时，有人认为此时A、B两种植物的光合作用强度一定相等，你是否认同该说法，并说明理由：____________________。（2）在0~15min内，A、B两种植物的光合速率均逐渐下降，其原因是___________。（3）在25~40min内，A、B两种植物所在玻璃容器中CO2含量均没有发生变化的原因是___________。（4）若将A、B两种植物置于同一密闭玻璃容器中，在光照等其他条件适宜的情况下，一段时间内，生长首先受影响的植物是______________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

酵母菌是真核生物，具有线粒体，既能进行有需呼吸也能进行厌氧呼吸，其需氧呼吸消耗氧气产生二氧化碳，厌氧呼吸不消耗氧气产生少量二氧化碳。据图分析，0-t2氧气含量减少，二氧化碳增加，但是氧气的下降速率大于二氧化碳的增加速率，代表此时既可以进行需氧呼吸也可以进行厌氧呼吸；t2后氧气基本含量不变，说明此时只能进行厌氧呼吸。【详解】A、酵母菌通过需氧呼吸繁殖，而图中t1→t2期间酵母菌的需氧呼吸逐渐减弱，说明其繁殖速率逐渐减小，A错误；B、t3时，酵母菌只能进行厌氧呼吸，因此产生ATP的场所只有细胞溶胶，B正确；C、该实验是在最适宜温度下进行的，若适当提高温度，酶的活性会降低，则O2相对含量达到稳定所需时间会延长，C错误；D、到t2时，氧气含量不在变化，说明酵母菌需氧呼吸强度为零，D错误。故选B。2、B【解析】

1、人体体温调节：（1）机理：产热═散热；（2）寒冷环境下：①增加产热的途径：骨骼肌战栗、甲状腺激素和肾上腺素分泌增加；②减少散热的途径：汗腺分泌减少、皮肤毛细血管收缩等；（3）炎热环境下：主要通过增加散热在维持体温相对稳定，增加散热的措施主要有汗液分泌增加、皮肤血管舒张。2、寒冷环境下产热量和散热量均增加。【详解】A、由曲线情况可知，机体由温度为T1的环境进入到温度为T2的环境时产热和散热量都增加，所以T2＜T1，A正确；B、进入温度为T2的环境，短时间内B曲线上升比A曲线迅速，曲线A表示产热量，曲线B表示散热量，B错误；C、由图示可知，a～b是因为进入T2环境中散热量增加所致，C正确；D、由图示可以看出，和T1相比，T2环境中机体产热量和散热量均高于T1环境，D正确。故选B。本题考查体温调节的相关知识，要求考生掌握人体体温维持相对稳定的机理，识记人体体温调节的具体过程及该过程中涉及到的机理，能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断。3、C【解析】

由题意知，HPV含有DNA，则DNA是其遗传物质；DNA分子杂交技术的原理是碱基互补配对原则。由于DNA分子中碱基对的排列顺序具有特异性，因此可以用DNA分子杂交技术检测高危型HPV。【详解】①HPV是病毒，只含有一种核酸，其遗传物质是DNA，①错误；②由表格数据可知，被检测者高危型HPVDNA检测比值远远低于正常值，因此被检测者未感染高危型HPV，②正确；③DNA分子杂交技术的原理是碱基互补配对原则，③正确；④若检测比值等于l，则可判断被检测者感染了高危型HPV，但是不一定是宫颈癌患者，④错误。综上所述，答案选C。本题解题关键是理解应用DNA分子杂交技术的原理，学会通过实验数据进行推理、判断。4、A【解析】

1、细胞癌变是指细胞受到致癌因子的作用，细胞中的遗传物质发生变化使细胞变成受机体控制的、连续分裂的恶性增殖的细胞。2、只有在减数第二次分裂后期和有丝分裂后期，着丝点分裂，姐妹染色单体分开。3、内环境稳态是机体进行正常生命活动的必要条件。【详解】A、细胞癌变可以推出细胞内的遗传物质发生了改变，但细胞中遗传物质发生改变，其结果不一定导致细胞癌变，A正确；B、细胞处于分裂后期，染色体的着丝点不一定断裂，如减数第一次分裂后期。而染色体的着丝点分裂发生在有丝分裂后期和减数第二次分裂后期，即可以推出细胞处于分裂后期，B错误；C、基因遵循分离定律，不一定遵循自由组合定律，如同一对同源染色体上的基因。位于非同源染色体上的非等位基因遵循自由组合定律，而对于其中的任何一对等位基因，都遵循分离定律，C错误；D、“内环境稳态是机体进行正常生命活动的必要条件”，此处的“必要条件”即“必要不充分条件”。内环境稳态，推不出机体可以进行正常的生命活动，例如植物人内环境稳态，但不能进行正常的生命活动。内环境稳态是机体能够进行正常生命活动的前提条件，机体能够进行正常的生命活动，其内环境一定是稳态的，D错误。故选A。5、D【解析】

该题结合了信息题和实验理念，综合性较强。突破点为先确定该实验的实验目的，由题干信息可知，实验目的为“为进一步确定SLN1基因、GAMYB基因在GA调节α-淀粉酶基因表达过程中是否发挥作用及相互关系”，由此分析该实验需要的实验材料即可。【详解】由于该实验是为了“进一步确定SLN1基因、GAMYB基因在GA调节α-淀粉酶基因表达过程中是否发挥作用及相互关系”，所以要保证α-淀粉酶基因正常表达的前提下，研究另外两个基因的相互作用。因此实验材料选择为：正常的大麦糊粉层细胞、仅敲除SLN1基因的大麦糊粉层细胞、仅敲除GAMYB基因的大麦糊粉层细胞这三组对照组，和敲除SLN1基因和CAMYB基因的大麦糊粉层细胞的实验组，通过对比获得实验结果。而α-淀粉酶基因的有无不是该实验的自变量，不可以敲除，这是进行该实验的前提；故选D。6、C【解析】

根据实验的目的“研究赤霉素（GA3）对NaCl胁迫下红小豆种子萌发过程中芽长和根长的影响”可知，该实验的自变量是赤霉素的浓度，因变量是芽长和根长。分析表格中实验设计思路，D组相当于空白对照组，S组相当于在高盐溶液处理后的对照组，其他三组为不同浓度的GA3的实验组，进一步分析实验结果可知：盐胁迫会抑制芽和根的生长，但一定的GA3浓度范围内，随GA3的浓度逐渐增大，红小豆种子对盐胁迫的缓解作用越大，但从表中数据还不能得出缓解作用最大的最适GA3浓度或者能否使种子萌发恢复正常的GA3浓度。【详解】A、结合前面的分析可知，根据实验目的分析，设计中D组和S组都是对照组，A错误；

B、由于实验中GA3对盐胁迫的缓解作用没有出现波峰，所以无法确定50mmol/LGA3是不是缓解胁迫的最适浓度，B错误；

C、根据前面的分析可知，在盐胁迫下，红小豆萌发的根和芽生长变短，但在实验范围内GA3的浓度均具有缓解胁迫的作用，C正确；

D、由于从实验结果分析，没有显示出那个GA3浓度下与D组的结果相同，同时实验也没有设计更高浓度的GA3处理盐胁迫下的红小豆种子，所以此实验还不能说明加入一定浓度的GA3能使红小豆种子在盐胁迫下能恢复正常萌发，D错误。

故选C。

分析本题实验关键要明确设置的D组和S组都是对照组。二、综合题：本大题共4小题7、DNA分子限制酶DNA连接酶λ噬菌体的衍生物动植物病毒E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能【解析】

基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。【详解】（1）基因工程是对基因进行操作，是在DNA分子水平上进行设计和施工的。（2）基因工程的基本工具包括限制性内切酶、DNA连接酶和载体。通常使用的载体除质粒外还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。（3）在“缝合”双链DNA片段时，E·coliDNA连接酶能将互补的黏性末端连接起来，T4DNA连接既可以将互补的黏性末端“缝合”，又可以将平末端“缝合”。（4）基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病最有效的手段。熟悉基因工程的概念、基本步骤是解答本题的关键。8、促甲状腺激素释放

（TRH）分级逆转录酶突触前膜反馈调节下丘脑（水平衡中枢）受损导致抗利尿激素分泌减少，尿量增加，失水较多【解析】

下丘脑中有渗透压感受器，是体温调节、水平衡调节、血糖调节的中枢，还与生物节律等的控制有关；下丘脑分泌促甲状腺激素释放激素，促甲状腺激素释放激素运输到垂体，促使垂体分泌促甲状腺激素．促甲状腺激素随血液运输到甲状腺，促使甲状腺增加甲状腺激素的合成和分泌。【详解】（1）寒冷条件下，下丘脑分泌促甲状腺激素释放激素，促进垂体释放促甲状腺激素，再作用于甲状腺，促进甲状腺激素的分泌，从而加快物质的氧化分解，增加产热量来维持体温恒定。该过程中，甲状腺激素的调节方式是分级调节。（2）RNA指导DNA合成的过程为逆转录过程，需要逆转录酶的催化。根据题意分析，病毒进入神经细胞移动的方向与兴奋传导的方向相反，说明该病毒是与突触前膜上的受体结合，进入神经末梢，最终入侵到神经中枢。（3）水盐平衡的中枢和体温调节中枢都在下丘脑；下丘脑（水平衡中枢）受损导致抗利尿激素分泌减少，尿量增加，失水较多，所以头部受伤失血且下丘脑水平衡中枢受损，伤者血量恢复正常更难。本题考查神经体液调节，综合考查了反射弧、体温调节、水平衡调节内容，理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。9、样方随机取样标志重捕偏大黑光灯诱捕（灯光诱捕）；取样器取样记名计算法血细胞计数板（血球计数板）a/2【解析】

1.种群密度的调查方法有：样方法和标记重捕法。一般植物和个体小、活动能力小的动物以及虫卵常用的是样方法，其步骤是确定调查对象→选取样方→计数→计算种群密度；样方法的注意点：①随机取样；②样方大小适中；③样方数量不易太少；④一般选易辨别的双子叶植物（叶脉一般网状）；⑤常用五点取样法和等距取样法。活动能力大的动物常用标志重捕法，其步骤是确定调查对象→捕获并标志个体→重捕并计数→计算种群密度；标志重捕法的计算公式：种群中个体数（N）/标记总数=重捕总数/重捕中被标志的个体数。2.“土壤中小动物类群丰富度的研究”实验中，由于土壤小动物身体微小，活动能力强，不能用标志重捕法调查丰富度，可采用取样器取样的方法进行调查，为调查不同时间土壤中小动物类群的丰富度，应分别在白天和晚上取同一地块的土样作为对照。3.调查酵母菌种群数量变化采用抽样检测法，即直接使用血球计数板计数法。【详解】（1）由于蚜虫活动能力弱、活动范围小，因此采用样方法进行种群密度的调查，样方法使用时关键要做到随机取样；鼠的活动能力较强、活动范围广，因此采用标志重捕法进行种群密度的调查，根据标志重捕法的计算公式：种群中个体数（N）/标记总数=重捕总数/重捕中被标志的个体数，如果鼠被捕获一次以后更难捕捉到，那么第二次捕获的鼠中标记的个体数偏低，由此推测该调查结果与真实结果相比偏大；若要调查农田中某种趋光性昆虫的种群密度，根据昆虫的趋光性特点可用黑光灯诱捕法。（2）调查土壤中小动物的丰富度可以采用取样器取样法，丰富度的统计方法通常有两种：记名计算法和目测估计法。（4）测定培养液中酵母菌的种群数量可以采用血球计数板计数法，计数后发现，试管中该种菌的总数达到a时，种群数量不再增加，则a值为该种群的K值，那么该种群增长曲线为S型，且种群数量为a/2时种群增长速率最快。本题考查种群密度和群落丰富度的调查方法的知识点，要求学生掌握样方法和标志重捕法的使用条件和注意事项，把握标志重捕法的计算公式，识记土壤中小动物丰富度的调查方法和丰富度的统计方法，把握探究培养液中酵母菌种群数量的变化实验的原理和方法步骤，理解酵母菌的计数方法和S型曲线的特点，这是解决该题的关键。10、使植物细胞破裂将淀粉分解成糖酒精发酵酵母菌（用水）稀释增加通气性各种有机酸的标准溶液半乳糖醛酸筛选敏感相同的粘性末端温度、酶的用量、反应时间胚胎发生器官发生二倍体【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。【详解】（一）（1）蒸煮的目的：使原料在高温下灭菌，同时高温可以破坏细胞膜，使细胞中的淀粉被释放出来。（2）淀粉在a-淀粉酶的作用下变成糊精，糊精在β-淀粉酶的作用下变成麦芽糖，麦芽糖在糖化淀粉酶的作用下变成葡萄糖。加入糖化酶糖化，目的是糖化。30min后，装入发酵罐再接入酵母进行酒精发酵，酵母菌利用葡萄糖进行厌氧呼吸可产生酒精。酵母菌繁殖需要能量，而需氧呼吸能提供更多的能量，通气能提高酵母菌的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。（3）酒精含量过高，醋杆菌容易死亡，因此醋酸发酵时酒精应先（用水）稀释。发酵过程需敞口操作，麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料，都是为了增加通气性。将各种有机酸的标准溶液在相同的色谱条件下进行检测，绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。（4）果胶是半乳糖醛酸的高聚物，果胶酶可将果胶彻底分解为半乳糖醛酸。（二）（1）质粒常含有抗性基因用于重组质粒的筛选。当外源基因插入这样的酶切位点时，会使该抗性基因失活，抗性基因无法表达，这时宿主菌变为对该抗生素敏感的菌株，容易检测出来。（2）双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端，但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把相同的粘性末端连接起来，避免单酶切使目的基因或质粒自连或反向