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DB34DB34/T2814—2017玉蜀黍赤霉检疫鉴定方法DetectionandidentificationofGibberellazeae(Schwein.)Petch2017-03-30发布2017-04-30实施安徽省质量技术监督局发布I1GB/T6682分析实验室用水规学名：Gibberellazeae(Schwei分类地位：真菌界（Fungi），子囊菌门（Ascomycota)，粪壳菌纲(Sordariomycetes)根据玉蜀黍赤霉在寄主上的为害症状（参见附录A），培养基上生长的菌落、菌丝、分生孢子等形5.2.1除另有规定外，所有试剂均为分析纯或生20mmol/LEDTA-Na2蛋白酶K（20mg/mL苯酚：氯仿：异戊醇(25：2425.2.4PCR试剂：10×PCRbuff），5.2.6马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA马s，无菌水洗涤3次，灭菌滤纸吸干水分后置于3隔的分生孢子28μm～40μm×4μm～5μm、5隔的分生孢子30μm～55μm9)隔的分生孢子45μm～60μm×4.5μm～6μm。子囊壳卵圆形或圆锥形，深蓝至紫黑色，顶端有瘤状μm～11μm，内含8个子囊孢子。子囊孢子无色，纺锤形，两端钝圆，多为三个隔膜，大小18μm~3从检测样品中分离并鉴定为玉蜀黍赤霉的菌株，应妥善保存。将菌株接种PDA培养基斜面上，25℃~28℃培养5d，然后4℃冰箱保存，或将菌丝块转入20％灭菌甘油并混匀，-80℃长期保存。4(资料性附录)56B.1.1.3加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)溶液，颠倒混匀，12000rpm离CCCACTCAGGTTGATTTTCPCRbuffer(含25mmol/LM7PCR扩增产物检测，阳性对照出现一条192

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