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DB34DB34/T2814—2017玉蜀黍赤霉检疫鉴定方法DetectionandidentificationofGibberellazeae(Schwein.)Petch2017-03-30发布2017-04-30实施安徽省质量技术监督局发布I1GB/T6682分析实验室用水规学名:Gibberellazeae(Schwei分类地位:真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),粪壳菌纲(Sordariomycetes)根据玉蜀黍赤霉在寄主上的为害症状(参见附录A),培养基上生长的菌落、菌丝、分生孢子等形5.2.1除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生20mmol/LEDTA-Na2蛋白酶K(20mg/mL苯酚:氯仿:异戊醇(25:2425.2.4PCR试剂:10×PCRbuff),5.2.6马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA马s,无菌水洗涤3次,灭菌滤纸吸干水分后置于3隔的分生孢子28μm~40μm×4μm~5μm、5隔的分生孢子30μm~55μm9)隔的分生孢子45μm~60μm×4.5μm~6μm。子囊壳卵圆形或圆锥形,深蓝至紫黑色,顶端有瘤状μm~11μm,内含8个子囊孢子。子囊孢子无色,纺锤形,两端钝圆,多为三个隔膜,大小18μm~3从检测样品中分离并鉴定为玉蜀黍赤霉的菌株,应妥善保存。将菌株接种PDA培养基斜面上,25℃~28℃培养5d,然后4℃冰箱保存,或将菌丝块转入20%灭菌甘油并混匀,-80℃长期保存。4(资料性附录)56B.1.1.3加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)溶液,颠倒混匀,12000rpm离CCCACTCAGGTTGATTTTCPCRbuffer(含25mmol/LM7PCR扩增产物检测,阳性对照出现一条192
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