《核酸检测试剂盒质量评价技术规范GBT+37871-2019》详细解读

《核酸检测试剂盒质量评价技术规范GB/T37871-2019》详细解读contents目录1范围2规范性引用文件3术语和定义、缩略语3.1术语和定义3.2缩略语4质量评价要求5质量评价指标和方法contents目录5.1质量评价指标5.2定量检测试剂盒质量评价方法5.3定性检测试剂盒质量评价方法6文件要求6.1包装标识6.2指导性文件6.3溯源性文件011范围核酸检测试剂盒的质量评价本规范适用于核酸检测试剂盒的质量评价，确保试剂盒的性能指标符合相关要求。研发、生产和应用环节涵盖核酸检测试剂盒的研发、生产和应用等各个环节，为各阶段的质量控制提供指导。适用范围非核酸类检测试剂盒本规范不适用于非核酸类检测试剂盒的质量评价。其他类型生物样本检测对于非核酸检测方法或其他类型生物样本的检测，本规范可能不适用。不适用范围022规范性引用文件体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性GB/T21415-2008核酸检测试剂盒溯源性技术规范GB/T37868-2019主要引用的文件YY/T1182-2010核酸扩增检测系统用对照物质YY/T1436-2016医疗器械风险管理对医疗器械的应用注以上规范性引用文件是制定本标准的技术基础和依据，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。在标准实施过程中，应密切关注相关引用文件的更新情况，以确保本标准的时效性和适用性。同时，对于辅助引用的文件，虽然在本标准的制定过程中起到了参考作用，但其具体条款并非必须强制执行，应根据实际情况进行选择和适用。辅助引用的文件“033术语和定义、缩略语术语和定义溯源性通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家测量标准或国际测量标准联系起来的特性。标示值在核酸检测试剂盒上标示的，用于描述试剂组分特性值或量值的信息。核酸检测试剂盒用于检测核酸的试剂盒，通常由核酸提取试剂、扩增试剂和检测试剂组成，用于定性或定量检测特定病原体的核酸。030201国家标准推荐性标准。聚合酶链式反应，一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术。实时荧光定量聚合酶链式反应，一种在PCR反应中通过荧光信号实时监测DNA扩增的技术。符合欧洲体外诊断医疗器械指令要求的标志，表示产品符合相关法规要求，可以在欧洲市场销售和使用。缩略语GB/TPCRqPCRCE-IVD043.1术语和定义核酸检测试剂盒是指用于体外定性检测人样本中特定病原体的核酸序列的试剂组合，包括必要的检测引物、探针、酶等组分。定义通过特定的核酸提取、扩增和检测流程，实现对目标病原体的快速、准确检测。功能核酸检测试剂盒定义质量评价是指对核酸检测试剂盒的性能指标进行系统的评估，以确保其符合相关标准和要求。目的通过对核酸检测试剂盒的质量评价，可以确保其准确性、可靠性、稳定性和安全性，从而为临床诊断和治疗提供有力支持。质量评价技术规范作用技术规范为核酸检测试剂盒的研发、生产和应用提供了明确的指导和依据，有助于保障试剂盒的质量和可靠性，促进相关行业的健康发展。定义技术规范是指对核酸检测试剂盒的研发、生产、质量控制和应用等方面所制定的统一标准和要求。053.2缩略语PCR聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。qPCRPCR实时荧光定量PCR，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程。0102RT-PCR逆转录PCR，是将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术，即首先以RNA为模板，在逆转录酶作用下合成cDNA，再以cDNA为模板通过PCR反应来扩增DNA片段。RT-PCRdNTPs脱氧核苷三磷酸，是合成DNA的原料，包括dATP、dTTP、dCTP和dGTP。dNTPsTaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶一种耐高温的DNA聚合酶，从水生栖热菌中分离得到，是PCR技术中的关键酶，用于催化DNA链的延伸。064质量评价要求应通过参考物质或已知浓度的样本对核酸检测试剂盒的准确性进行验证。准确性验证应评估试剂盒与可能存在的交叉反应物质之间的反应，以确保准确性不受干扰。交叉反应应确定试剂盒的灵敏度和特异性，以评估其在实际应用中的准确性表现。灵敏度与特异性4.1准确性评价010203在同一实验室内，使用同一批次试剂盒对同一样本进行多次检测，评估结果的重复性。重复性在不同时间、不同实验人员、不同设备条件下，使用同一批次试剂盒对同一样本进行检测，评估结果的中间精密度。中间精密度4.2精密性评价VS评估试剂盒在规定存储条件下的稳定性，包括长期稳定性和开封稳定性。样本稳定性评估样本在不同存储条件下的稳定性，以确定样本的有效期和保存方法。试剂盒稳定性4.3稳定性评价生物安全性评估试剂盒的生物安全性，包括对操作人员的潜在风险和防范措施。环保性评估试剂盒在使用和废弃处理过程中对环境的影响，以及相应的环保措施。4.4安全性评价075质量评价指标和方法同一样品在相同条件下重复检测时，结果的变异程度。精密性试剂盒能够检测到的最低病毒载量或浓度。灵敏度01020304核酸检测试剂盒的检测结果与标准品或参考方法的符合程度。准确性试剂盒能够正确区分目标病毒与其他病原体的能力。特异性5.1质量评价指标对比试验将核酸检测试剂盒的检测结果与已知的标准品或参考方法进行对比，以评估其准确性。重复性试验对同一样品进行多次重复检测，以评估试剂盒的精密性。最低检测限试验通过稀释病毒样品，确定试剂盒能够检测到的最低病毒载量或浓度，以评估其灵敏度。交叉反应试验使用其他相关病原体样品进行测试，以评估试剂盒的特异性。5.2质量评价方法085.1质量评价指标准确性是指核酸检测试剂盒检测结果与被检测样本真实情况的一致性程度。准确性定义通过对比核酸检测试剂盒检测结果与已知真实结果的样本，计算检测结果的符合率或误差率来评价准确性。准确性评价方法5.1.1准确性灵敏度是指核酸检测试剂盒在检测低浓度或微量目标核酸时的能力。灵敏度定义通常采用不同浓度的标准物质或临床样本，评估核酸检测试剂盒在最低检测限附近的检测性能。灵敏度评价方法5.1.2灵敏度特异性定义特异性是指核酸检测试剂盒在检测过程中对非目标核酸的识别能力，即不产生非特异性反应的程度。特异性评价方法通过检测含有非目标核酸的样本，观察核酸检测试剂盒是否产生假阳性反应，以评估其特异性。5.1.3特异性稳定性定义稳定性是指核酸检测试剂盒在规定条件下保存和运输过程中，其性能保持不变的能力。015.1.4稳定性稳定性评价方法通过对不同保存条件和运输方式下的核酸检测试剂盒进行定期检测，观察其性能变化，以评估稳定性。02095.2定量检测试剂盒质量评价方法绝对准确度指检测结果与真实值或参考值之间的接近程度，可通过与已知浓度的标准物质进行比较来评估。相对准确度指不同浓度样品检测结果之间的相对误差，可通过检测一系列不同浓度的样品并计算其回收率来评估。准确度精密度中间精密度在同一实验室内，不同时间由不同操作者使用不同设备，按相同的测试方法，对同一被测对象进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不应超过一定限值。重复性在同一实验室内，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不应超过一定限值。线性范围与可报告范围指实验室在保证准确度、精密度和可重复性的前提下，能够定量报告的被测物浓度范围。可报告范围指检测结果与样品中被测物的浓度呈线性关系的范围，应在此范围内选择适当的浓度点进行测试，以评估线性关系是否符合要求。线性范围交叉反应应评估试剂盒与可能干扰物质之间的交叉反应，以确保检测结果的准确性。干扰实验应通过实验确定可能干扰检测的物质，并在产品说明书中注明。对于已知的干扰物质，应评估其干扰程度并给出相应的处理建议。特异性105.3定性检测试剂盒质量评价方法准确性评价阳性参考品符合率使用国家参考品或经标化的阳性参考品进行检测，要求阳性参考品符合率≥95%。若存在不符合的情况，应明确原因并采取措施进行改进。阴性参考品符合率使用国家参考品或经标化的阴性参考品进行检测，要求阴性参考品符合率≥95%。对于不符合的阴性参考品，应进行深入分析，以避免假阳性结果的出现。灵敏度评价通过对阳性参考品进行梯度稀释，检测试剂盒在不同浓度下的检测效果。这有助于评估试剂盒的灵敏度和动态范围。梯度稀释检测应确定试剂盒的最低检测限，即能够可靠检测出目标核酸的最低浓度。这有助于了解试剂盒对于低浓度样本的检测能力。最低检测限应评估试剂盒与可能引起非特异性反应的物质的交叉反应性。这些物质可能包括其他病原体、人类基因组DNA等。通过交叉反应实验，可以了解试剂盒的特异性程度。交叉反应应评估常见干扰物质对试剂盒检测结果的影响。这些干扰物质可能包括血液、血清、血浆等样本中的常见成分，以及可能用于治疗的药物等。了解这些干扰物质对检测结果的影响，有助于提高试剂盒的准确性和可靠性。干扰物质特异性评价116文件要求质量管理体系文件应建立并维护一套完整的质量管理体系文件，包括质量手册、程序文件、作业指导书等，以确保核酸检测试剂盒的质量可控。技术文件应提供与核酸检测试剂盒相关的详细技术文件，如产品标准、设计文档、验证报告等，以支持产品的安全性和有效性。6.1文件体系可追溯性文件中应明确记录核酸检测试剂盒的研发、生产、检验等过程的信息，以确保产品的可追溯性。准确性文件内容应准确反映核酸检测试剂盒的实际情况，包括产品组成、性能指标、生产工艺等，不得有误导性信息。完整性文件应包含所有必要的信息，以便用户能够正确理解和使用核酸检测试剂盒，同时便于监管部门进行审查。6.2文件内容要求应对文件进行版本控制，确保文件的变更得到有效管理和追踪。版本控制涉及商业机密或技术秘密的文件应得到妥善保管，防止泄露。保密性文件应按照规定的保存期限进行保存，以便在需要时能够提供相关证据。保存期限6.3文件管理要求126.1包装标识6.1.1标识内容产品名称应清晰标示核酸检测试剂盒的产品名称。型号规格应明确标示产品的型号和规格，以便用户和医疗机构选择和采购。生产厂家应标示出生产厂家的名称、地址和联系方式，以便在需要时进行联系和咨询。批号和生产日期每个批次的核酸检测试剂盒都应有唯一的批号和生产日期，以便进行质量追踪和管理。外包装标识如试剂盒内有多个组件或试剂，则内包装上也应相应标示各组件或试剂的名称、规格和数量等信息。内包装标识标识清晰度所有标识内容应清晰、易读，不得有模糊、涂改等现象。产品外包装上应清晰印刷或粘贴上述标识内容，确保在运输和储存过程中不易脱落或模糊。6.1.2标识位置和要求6.1.3特殊要求如试剂盒包含有毒或有害物质，应在包装上明确标示，并提供相应的安全警示和使用说明。对于有潜在生物安全风险的试剂，应在包装上标示相应的生物安全警示标志和使用注意事项。对于需要在特定条件下储存的试剂，如需要冷藏或冷冻保存的试剂，应在包装上明确标示储存条件和有效期。010203136.2指导性文件溯源性定义溯源性是指通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准联系起来的一种特性。核酸检测试剂盒溯源性标准为确保核酸检测试剂盒的准确性，需建立相应的溯源性标准，规范试剂盒的研发、生产、应用等过程，确保试剂组分的标称特性值和量值可追溯。核酸检测试剂盒溯源性相关标准国内外相关技术规范国外技术规范国际标准化组织（ISO）也发布了与核酸检测试剂盒溯源性相关的技术规范，如ISO17511等，为试剂盒的国际化应用提供了参考。国内技术规范《核酸检测试剂盒溯源性技术规范》（GB/T37868-2019）是中华人民共和国国家标准，规定了核酸检测试剂盒溯源性的术语和定义、技术要求、溯源性建立等内容。核酸检测试剂盒中的试剂组分，如引物、探针、酶等，其标称特性值和量值应具有溯源性，以确保检测结果的准确性。试剂组分溯源通过建立完善的溯源性体系，可对核酸检测结果进行溯源，查找可能存在的误差来源，提高检测的可靠性和准确性。检测结果溯源溯源性在核酸检测中的应用随着科技的不断进步，溯源性技术将更加完善，为核酸检测试剂盒的研发、生产、应用等提供更加有力的支持。溯源性技术不断完善国内外在核酸检测试剂盒溯源性方面的合作将进一步加强，推动相关标准的国际化和统一化，提高试剂盒的国际化应用水