临床实验室生物安全培训专家讲座

临床试验室生物安全防护培训临床实验室生物安全培训第1页一、术语和定义（1）.气溶胶：悬浮于气体介质中粒径普通为0.001~1000um固态或液态微小粒子形成相对稳定分散体系。（2）.生物安全柜：具备气流控制及高效空气过滤装置操作柜，可有效降低试验过程中产生有害气溶胶对操作者和环境危害。临床实验室生物安全培训第2页二.试验室生物安全防护水平分级

将试验室生物安全防护水平分为一级、二级、三级和四级，一级防护水平最低，四级防护水平最高：A.生物安全防护水平为一级试验室适合用于操作在通常情况下不会引发人类或者动物疾病微生物B.生物安全防护水平为二级试验室适合用于操作能够引发人类或者动物疾病，一般情况下对人、动物或者环境不组成严重危害，传输风险有限，试验室感染后很少引发严重疾病，而且具备有效治疗和预防办法微生物C.生物安全防护水平为三级试验室适合用于操作能够引发人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传输微生物D.生物安全防护水平为四级试验室适合用于操作能够引发人类或者动物非常严重疾病微生物，以及我国还未发觉或者已经宣告毁灭微生物临床实验室生物安全培训第3页三、临床试验室生物安全管理A.生物安全柜应安放在试验室中什么地方比较适当：1.远离人员活动，物品流动以及可能会扰乱气流地方，防止放在离门口很近地方。2.进入生物安全柜低速率定向气流，极易受到干扰，包括人员走进生物安全柜所形成气流、打开窗户、送风系统调整以及开关门等都可能造成影响。临床实验室生物安全培训第4页B.生物安全柜性能检测

1.个体防护能力

2.样品保护能力3.交叉污染防护能力临床实验室生物安全培训第5页

C.个体防护装备

包含：眼镜、口罩、帽子、防护衣、手套、鞋套、听力保护器。临床实验室生物安全培训第6页D.微生物危害评定：

1.当建设使用传染性或有潜在传染性材料试验室前，必须进行微生物危害评定。2.确定对象微生物应在那一级生物安全防护试验室中进行操作。3.制订对应操作规程，试验室管理制度和紧急事故处理方法，必须形成书面文件并严格恪守执行。临床实验室生物安全培训第7页四、各类紧急情况处理A.手部清洗消毒

1.推荐使用肘动式或者自动式洗手开关2.流动水冲洗手部屡次，然后用液体皂滴在手上，重复撮手，在用水彻底冲洗3.清洗完成再用洁净纸巾或手巾擦干4.可用75%酒精擦手来去除双手轻度污染5.在没有洗手池地方，能够使用含酒精“免洗”手部清洁产品代替临床实验室生物安全培训第8页B.刺伤、切割伤或擦伤应急处理：1.保持镇静，马上停顿试验，脱掉手套。2.用清水或肥皂水清洗伤口。3.尽可能挤出伤口处血液，取出抢救箱，用碘酒或75%酒精擦洗伤口适当包扎。4.及时就医，通知医生受伤原因及可能微生物污染，必要时要进行医学处理。5.向试验室安全员汇报，进行事故统计。临床实验室生物安全培训第9页C.生物安全柜内益处处理1.处理益撒物时不要将头伸入安全柜内，也不要将脸直接面对前操作口，而应处于前视面板后方。2.选择消毒剂时需要考虑消毒剂对生物安全柜腐蚀性。3.假如溢洒量不足1ml时，可直接用消毒剂浸湿纸巾擦拭。4.如溢洒量大或容器破碎，按操作规程消毒。5.假如溢洒物流入生物安全柜内部，则视情况，如需要可队生物安全柜进行熏蒸。临床实验室生物安全培训第10页D.衣物污染：1.尽快脱掉最外层防护衣，并注意预防感染物质深入扩散。2.将已污染防护服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌3.脱掉手套，到污染区出口洗手4.更换防护服和手套5.必要时对发生污染及托防护服地方进行消毒处理6.假如内衣被污染，应马上脱掉易污染衣物，消毒处理临床实验室生物安全培训第11页E.皮肤粘膜被污染

1.感染性液体外溢到皮肤（1）马上停顿工作，脱掉手套（2）用75%酒精进行皮肤消毒（2）再用大量水冲洗

2.感染性液体溅入眼睛（1）马上停顿工，脱掉手套(2)快速到缓冲区用洗眼器冲洗（3）用生理盐水冲洗

3.两种情况都应做适当预防治疗和医学观察，并汇报试验室安全员进行事故统计临床实验室生物安全培训第12页五、离心机内有感染性物质破裂处理A.非封闭离心机内带有感染性物质离心管发生破裂：

1.离心机正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭电源，密闭30分钟使气溶胶沉淀，离心机停顿后发生破裂，应马上盖上盖子密闭30分钟。2.带坚固手套或口罩（防止吸入气溶胶）3.使用镊子清理玻璃碎片，或用镊子夹着棉花来清理。4.破碎离心管及离心筒、转轴或转子都应放在屋腐蚀性、对相关微生物含有杀灭作用消毒剂内浸泡60分钟以上。临床实验室生物安全培训第13页

B.在可封闭离心筒内离心管发生破裂：

1.假如怀疑封闭离心筒内有管子破裂，应在生物安全柜内打开离心筒盖子查看。2.确有破裂时，松开离心筒盖子，但不要打开，放入黄色垃圾袋，直接高压灭菌。3.或者采取化学消毒法：将离心筒及内容物放到对该种微生物有效无腐蚀性消毒剂里浸泡60分钟以上4.离心杯在使用消毒剂浸泡后5.应再用清水洗净后干燥6.向试验室安全员汇报7.进行事故统计临床实验室生物安全培训第14页C.运输途中发生泄漏应急操作：1.现将污染区域隔离，物管人员撤离2.穿好防护装备3.能够用土、沙或其它不燃性物质吸收漏出物质，同事防止直接接触4.用吸收材料覆盖遗洒物质，从外围向中性倾倒适当量消毒剂，使消毒剂与溢洒物混合并作用30-60分钟5.将污染材料置于防漏、防穿透废弃物溶剂中密封6.对溢出区域再次清洁并消毒，并消毒手套和防护衣7.全部处理材料和防护服都放入废弃物溶器中密封8.向主管部门汇报溢出情况和消除污染情况。出现严重泄漏时要向当地疾病预防疾控中心汇报。临床实验室生物安全培训第15页六、微生物试验室消毒要求

1.试验室假如发觉微生物污染了试验环境应马上停下试验，用试验前备好消毒剂进行消毒处理。2.如试验室被空气和气溶胶传输微生物污染，应马上关闭试验室进行消毒处理。3.盛装污染微生物试验耗材容器应有足量消毒剂，用过耗材马上侵泡在消毒剂中。4.试验结束后应马上对试验环境进行消毒处理，擦洗、消毒工作台面、地面，开启紫外线灯等照射1小时以上。生物安全3级和4级试验室、层流试验室应在试验结束后继续开启空气循环系统30分钟以上。临床实验室生物安全培训第16页5.试验废弃物应马上进行灭菌或消毒灯无害化处理。6.试验人员在试验结束后应马上清洗消毒双手，必要时应洗澡，更衣。7.对需消毒物品应采取彻底消毒办法，不留死角。8.用消毒剂浸泡消毒时要确保消毒物品全部浸没在消毒剂中。9.用消毒剂擦拭消毒时要确保全部需要消毒表面都被均匀擦拭到10.全部消毒方法均应确保消毒时间临床实验室生物安全培训第17页11.要依据消毒对象和微生物种类选择适当消毒和灭菌方法：（1）对受到细菌芽孢、真菌孢子和枝杆菌污染物品，选取高水平消毒法或灭菌法。（2）对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体和病毒微生物污染物品，选取中水平以上消毒方法（3）对受到普通细菌和亲脂病毒等污染物品，可选取低水平或中水平消毒法（4）对从在较多较多有机物物品消毒时，应加大消毒剂使用剂量或延长消毒作用时间。（5）消毒物品上微生物污染特比严重时，应加大消毒药剂使用剂量和延长消毒作用时间。（6）选择表面消毒方法，应考虑表面性质，光滑表面可选择紫外线消毒器近距照射，或体液消毒剂擦拭；多孔材料表面可采取喷雾消毒法临床实验室生物安全培训第18页八、惯用消毒方法A.试验室内空气消毒：1.普通可加强开窗通风，自让通风换气，条件许可时采取排气扇人工机械通风，做到每小时换气10-15次。2.紫外线灯管适合用于室内空气，无疑表面消毒。惯用室内悬吊式紫外线灯对室内空气消毒时安装数量为平均1.5W每立方米，照射时间不少于30分钟。3.使用循环风紫外线空气消毒器连续开机器到达使用说明书要求时间即可起到空气消毒作用。临床实验室生物安全培训第19页B.试验室地面物体表面消毒：

试验室、办公室等场所地面要湿式拖扫，禁止干拖干扫。可用0.1%过氧乙酸拖地或0.2%-0.5%过氧乙酸喷洒或拖地消毒剂用量不少于100ml每立方米，拖把应专用，污染区和清洁区不得混用。临床实验室生物安全培训第20页C.物体表面消毒：

1.试验台面、桌子、椅子、凳子、床头柜、门把手、实验统计夹等可用0.2%~0.5%过氧乙酸喷洒或有效氯为1.0g/L~2.0mg/L含氯消毒剂喷洒、擦拭，消毒作用10~15min。2.若试验室台面等显著被传染性标本污染，应马上用0.2%~0.5%过氧乙酸喷洒或有效氯为1.0g/L~2.0g/L汗氯消毒剂喷洒于污染表面，保持30~60min。临床实验室生物安全培训第21页D.普通试验器材消毒：1.凡直接或间接接触临床标本或试验微生物器材均应视为有传染性，均应作消毒处理。金属器材、玻璃器皿可用压力蒸汽和干燥灭菌方法使用于耐高温、高湿医用器械和物品灭菌。2.玻璃器材使用过玻璃吸管、试管、离心管、玻片、玻璃棒、三角瓶和平皿等应马上浸入有效氯为2.0g/L含氯消毒剂中1小时以上，消毒后用超声波清洗方法洗净沥干，使用前再进行高压灭菌处理。临床实验室生物安全培训第22页E.污染冰箱和冰柜消毒处理：1.将可能污染冰箱冰柜外表面用0.2%过氧乙酸擦拭，作用30min。2.将冰箱冰柜放置在特制PVC板制成大托盘上，托盘面积大于冰箱冰柜底面积，边缘高度为10cm，托盘内放入适量含氯消毒粉剂，是消毒粉和化冻水混合后有效氯含量大于1.0g/L。临床实