重度宫腔粘连分离术后薄型子宫内膜之干细胞治疗

重度宫腔粘连分离术后薄型子宫

内膜之干细胞治疗

overview在辅助生殖技术中，薄型子宫内膜是指子宫内膜厚度不

足以支持胚胎着床及临床妊娠目前，国际上对薄型子宫内膜的评价标准尚未统一，最

新的一项Meta分析认为子宫内膜厚度超过7mm的患者

妊娠率明显高于不足7mm者（Mazdak

Momeni，2011）重度宫腔粘连是导致薄型子宫内膜的重要原因之一临床对薄型子宫内膜治疗的方式较多：药物、搔刮刺激、

宫腔内注射粒细胞集落刺激因子、电生理刺激

。。。。。。但总体治疗效果欠佳！

overview干细胞具有多向分化和自我更新的潜能具有广阔的发展

前景很多研究显示干细胞可诱导向子宫内膜细胞定向分化，

促进子宫内膜生长，治疗薄型子宫内膜，包括：骨髓间质干细胞（BMSCs）子宫内膜干细胞（EDSCs）人胚胎干细胞（hESCs）人脐带华通胶间充质干细胞（WJ-MSCs）。。。。。。

overview子宫内膜中干细胞具有高度增殖、分化潜能以及较低的

免疫源性，但是直接获取子宫内膜具有一定的侵入性月经血源性子宫内膜干细胞(menstrual

blood-derived

mesenchymal

stem

cells,

MenSCs)[1]从经血获得MenSCs不具有侵入性，不会对供者造成伤

害,

且来源广泛[1][1]1Meng

X,

et

al.,

Endometrial

regenerative

cells:

a

novel

stem

cell

population2007;

5:57overview

每个月经周期子宫内膜快速的修复与重建与

高度增值和快速血管生成的MenSCs有关a

ba

超声下月经期子宫内膜薄

3.8mm；

b

超声下排卵期子宫内膜厚

11.2mm

overview与BMSC相比，MenSCs具有以下特征：

1）更快的增殖速率；2）不表达STRO-1；3）表达胚胎干细胞多能性标记物OCT-4；4）高表达MMP。能够分化为三胚层组织，故也称之为子宫内膜再生细胞

（Endometrial

Regenerative

Cells，ERCs)

［1］研究显示与BMSCs相比，ERCs高表达血管生成因子，如

PDGF、EGF、VEGF和MMP，所以更适合再生医学[2]。[1]Meng

X,

et

al.,

Endometrial

regenerative

cells:

a

novel

stem

cell

population2007;

5:57

[2]Bockeria

L,

et

al..

Endometrial

regenerative

cells

for

treatment

of

heart

failure:

a

new

stem

cell

enters

the

clinic.

J

Transl

Med

2013.overview在I期临床实验中

静脉和鞘内注射EnSCs治疗4例多发性硬化患者未发现

免疫反应和毒副反应[1]。

肌肉注射EnSCs治疗杜氏肌营养不良患者，未发现毒副

反应，并且增强了肌张力和减少呼吸道感染[2]。静脉注射EnSCs治疗充血性心力衰竭的患者，增加了射

血分数，减少利尿钠肽数值，降低心衰评分[3]。美国Medistem团队正在致力于II期临床实验评价EnSCs

治疗心衰患者的潜能[4]。[1]

Zhong

Z,et

al.2009；

[2]

Ichim

TE,et

al.,2010；[3]

Ichim

TE,

et

al.,2010；

[4]

Bockeria

L

et

al.,2013。我们中心的研究原代培养正常MenSCs24h、72h、7d、14d可见细胞克隆样生长我们中心的研究MenSCs倍增24次没有发生染色体畸变a

MenSCs倍增24次细胞染色体核型分析示正常；b原代培养和传第4代冻存前后的细胞

生长曲线我们中心的研究MenSCs

标记物

OCT4、STRO-1、CD45、HLA-DR的免疫细胞化学和流式分析平（A：a、b：诱导前我们中心的研究MenSCs体外诱导分化后RT-PCR及Westernblot检测CK、VIMmRNA及蛋白表达水MenSCs免疫细胞化学可染色以；诱c、导分化子宫内膜细胞

d：诱导后免疫细胞化学染色；e：免疫细胞化学评分；B：RT-PCR检测CK、VIM

mRNA的相对表达量C：Wetsern

blot检测CK、VIM

蛋白的相对表达量）肪组织内见散在腺色未见脂肪组织内MenSCs体样结构；B：HE可染

以在NOD/SCID小鼠体内

重建子宫内膜组织我们中心的研究MenSCs皮下移植后

重建子宫内膜组织

的HE及免疫组化分

析。A：HE染色见脂见散在腺体样结构；

C、D：空白对照；E：

CK强阳性表达；F：

VIM弱表达；G：

CD31强表达；H：ER

几乎不表达；I：PR

中等强度表达；J：

使用孕激素处理后

ER强阳性表达。

（A×4，B-H×20）我们中心的研究IUA子宫内膜干细胞严重减少！！！我们中心的研究MenSCs治疗前4.9mm，治疗后12.4mm我们中心的研究患者编号年龄治疗前内膜厚度（mm)治疗后内膜厚度

(mm)1413.672385.4733547.54364.79.95435.112.4平均子宫内膜厚

度4.56±0.758.76±2.36p0.014自体MenSCs治疗前后子宫内膜厚度变化,

p<0.05MenSCs可以促进大鼠模型薄型子宫内膜

生长，并恢复生殖能力我们中心的研究ab

cd

ea

、b

双侧宫角造IUA模型，

左侧宫角移植干细胞，右侧宫角未移植干

细胞，左侧宫角孕见胚囊，右侧宫角萎缩无胚囊c

左侧宫角造IUA模型移植干细胞，右侧宫角未做手术，双侧胚囊数相同

d

造模后未移植干细胞宫腔内膜病理；e

造模后移植干细胞宫腔内膜病理未孕Provincial

Hospital）内源性子宫内膜干细胞

G-CSF编号年龄治疗前EM厚度(mm)/

形态治疗后EM厚度

（mm)/形态妊娠结Anhui局1457A+8.6A未孕(2016.10-2017.8)2328456.9A+11.5A8.5A8.5A+妊娠4265.8A+7.6A+未孕妊娠5448.3A单层3.4（宫腔全层极

少量积液，憩室积液6730397.8A+6.1B8.4A+8.5A妊娠8415.7C8.2B未孕94410.2A9.7A未孕10316.8A+7.1A+未孕11395.5C7.0A+未孕12358.4C7.9A妊娠13395.7A+6.8A妊娠14287.5B8.0A+妊娠15296.9A+6.8A+未孕16318.9A6.9A未孕17389.9C9.7B未孕总妊率=35.3%未孕娠

6/17=<40岁妊娠率=6/12=50%编号年龄治疗前子宫内膜厚度/形态治疗后子宫内膜厚度/形态Anhui

Provincial妊娠结局1457.0

A+8.6

A未孕2286.9

A+8.5

A妊娠4265.8

A+7.6

A+妊娠7396.1

B8.5

A未孕8415.7

C8.2

B未孕10316.8

A+7.1

A+未孕11395.5

C7.0

A+妊娠13395.7

A+6.8

A妊娠15296.9

A+6.8

A+未孕平均EM厚度6.27±0.627.68±0.78p0.00066412<0.01妊娠率总妊娠率：4/9=44.4%；

<40岁妊娠率：4/7=57.1%G-CSF治疗薄型子宫内膜后数据统计Hospital

G-CSF作用机制有研究认为G-CSF可能是通过自分泌或旁分泌方式促进

间质细胞分化和内膜蜕膜化，而不是通过释放入外周血

中发挥作用[1]。Zhao等

[2]

研究发现，G-CSF能够诱导损伤部位的干细

胞定向分化，促进薄型子宫内膜大鼠模型的子宫内膜生

长。[1]

Tanaka

T，et

al．GynecolEndocrinol，2000,14(6):399-404.

[2]

Zhao

J，et

al.

PLoS

One,2013,8(12):e82375.G-CSF作用机制

体外实验表明G-CSF通过促进胚胎种植有关的标志物（G-

CSF受体、整合素αɣβ3、纤溶酶原激活物尿激酶受体、胸

苷磷酸化酶、CD40及其配体等）mRNA的表达，重塑子

宫内膜血管、调节局部免疫和细胞粘附等机制影响内膜基

因表达[1]。G-CSF可促进早期胚胎发育和提高胚胎种植潜能，现已有

商业化含G-CSF的胚胎培养液用于培养人类胚胎[2],也为

G-CSF治疗薄型子宫内膜的安全性提供佐证。[1]

Rahmafi

M，et

a1．PLoSOne，2014，9(9)：e102286．[2]