促透剂对复方酮康唑乳膏中酮康唑体外透皮作用的影响

促透剂对复方酮康唑乳膏中酮康唑体外透皮作用的影响

作为一种承受着抗真菌、抗过敏、抗炎止痒等作用的外用制剂，南方医院已经开发出具有抗真菌、抗过敏、抗炎巴比妥等主要成分的丙酮丙酸氯仿等。笔者参考文献采用自制扩散装置,以离体鼠皮为透皮屏障,以5种不同促透剂对其渗透性进行研究。1材料和方法1.1药品、试剂与仪器LC-10A型高效液相色谱仪(日本岛津);体外扩散装置(自制),ZD-85双功能气浴恒温振荡器(江苏金坛市富华仪器有限公司),定量毛细管(美国DrummondscicoUSA)。酮康唑对照品(中国药品生物制品检定所提供),双戊烯(DP,同济微量元素研究所),薄荷醇(M,上海香料厂),氮酮(azone,北京第二制药厂),白油、霍巴油、维生素E、二甲基硅油、辅来松、尿素、杰马防腐剂、亚硫酸钠、丙酸氯倍他索、甘油均为药用,其他试剂为分析纯。昆明种小白鼠,SPF级,体重(20±2)g,雌雄兼用,第一军医大学动物实验中心提供。1.2方法1.2.1混合分配均匀①取白油80g、霍巴油、维生素E、二甲基硅油各20g、辅来松30g置烧杯中混合均匀;②尿素10g、杰马防腐剂0.6mL、亚硫酸钠2g,纯化水适量共溶(50℃);③酮康唑20g、丙酸氯倍他索0.5g加甘油6mL研细。将②加至①中低温乳化至凝后,缓缓加入③搅拌均匀即得乳膏。1.2.2促透剂b.nb.选择不同的促透剂加入到乳膏中制成含不同促透剂的样品乳膏。Ⅰ号样品(不含促透剂);Ⅱ号样品(1.5%DP+1.5%azone);Ⅲ号样品(1.5%DP+1.5%M);Ⅳ号样品(3%M);Ⅴ号样(2%azone);Ⅵ号样品(3%DP)。1.2.3皮肤、皮下脂肪、溶解药物健康小鼠,处死后立即剃除其腹部毛,剥离腹部皮肤,去除皮下脂肪,用纯化水反复冲洗干净,再用0.9%氯化钠注射液冲洗几遍,泡于0.9%氯化钠注射液中,置4℃冰箱冷藏24h内使用。1.2.4检测波长及流速色谱柱:Zobax-ODS(4.6mm×250mm,10μm);流动相:甲醇-0.02mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH7.40)(75∶25);检测波长:239nm;流速:1.2mL·min-1。精密称取干燥至恒重的酮康唑适量,用甲醇溶解稀释成0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mg·mL-1的梯度溶液,进样10μL,以峰面积积分值(Y)对浓度(X)线性回归,回归方程:Y=1305481.7X+5987.3,R2=0.9992,表明酮康唑在0.2～1.0μg范围内线性关系良好。1.2.5透皮吸收百分率测定方法按文献方法采用双室扩散池,释放池为长10cm,内径1.5cm开口的玻璃管。接受池为50mL的锥形瓶,内装0.01mol·L-1的盐酸溶液40mL。将试验乳膏均匀涂布于预先处理好的鼠皮然后置于玻璃管下端开口处后用丝线和防水胶布固定在释放池下端(角质层朝向玻璃管侧),将鼠皮端置于接受液液面下再将整个透皮吸收装置置于气浴恒温振荡器中,振荡方式为回旋式,振荡速度200次·min-1,试验温度(37±0.2)℃,扩散面积1.5cm2,在5,10,15,25,35,45,60min自接受池内各精密吸取4mL,同时补加等量0.01mol·L-1盐酸溶液(各样品分别用同鼠相近部位皮肤以空白基质随行进行透皮实验),在相应时间取样作为空白对照,用注射器将其缓缓推入Spepak-C18色谱柱中,用纯化水30mL冲洗此色谱柱,水洗液弃去。继用30mL二氯甲烷-乙醚(2∶1)混合液洗脱,收集洗脱液,减压回收,用10mL甲醇溶解,进样10μL,根据峰面积计算出接受液中酮康唑含量。为准确计算出透皮吸收百分率,按下式进行校正:Ct=Cn+V1∑Ci-1/V(i=1～n,Ct为校正浓度,Cn为实测浓度,V1为取样体积,V为接收池容积);S=CtV/W(S为累积渗透量,V为接收池容积,W为接收池面积);Q=S/Ni×100%(Q为累积透皮吸收百分率,Ni为释放池中酮康唑量)。1.2.6统计方法数据的录入和分析处理在SPSS10.0统计软件上完成。不同浓度各时间点的透皮药量比较采用重复测量的方差分析,用LSD法作多重比较。2呈著性分布情况复方酮康唑乳膏使用促透剂组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组)与未使用促透剂组(Ⅰ组)比较均差异有极显著性(P<0.01),见表1。实验研究表明3%DP+1.5%azone促透效果最好,与1.5%M+1.5%DP及2%azone相比差异有极显著性(P<0.01),但与3%DP和3%M相比分别在35,45,60min时差异有显著性(P<0.05)。3dp的协同作用结果证实单独使用DP、M时促透效果更优于两药联用,结果差异有显著性(P<0.05),提示DP、M两种促透剂不具协同作用。1.5%azone增强了DP的透皮促渗作用,提示它与后者协同产生双元渗透作用。由于乳膏基