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文档简介

基因工程原理

基因操作的基本技术基因克隆的酶学基础基因克隆的载体基因的分离与鉴定

真核基因在E.coli中的表达植物基因工程

哺乳动物基因工程

第一章基因操作的基本技术凝胶电泳技术

核酸分子杂交技术

DNA/细菌转化技术

第一节凝胶电泳

一、琼脂糖凝胶电泳

1．琼脂糖的种类：2．琼脂糖电泳的分离效果：谱带之间相差十个碱基对以上（1）常熔点的琼脂糖（2）低熔点琼脂糖几十个碱基对到2万个碱基对之间3.琼脂糖凝胶电泳的分辨力：溴化乙锭（EB），用量0.5µg/mL，0.05µg的微量DNA4.用途：（1）DNA及RNA分离鉴定、（2）DNA及RNA分子量的测定、（3）PCR结果的鉴定、（4）DNA限制酶图谱的制作等。5．影响DNA琼脂糖电泳迁移率的因素：(1）DNA分子带电多少（2）DNA分子的大小（3）DNA分子形状6.琼脂糖凝胶中DNA的染色二、聚丙烯酰胺凝胶电泳丙烯酰胺（Acr）：CH2=CH－CO－NH2,也称为单体甲叉双丙烯酰胺（Bis）：（CH=CH-CO－NH）2=CH2，也称为交联剂或双体1．聚丙烯酰胺凝胶的组成成分：

（1）单体浓度有关（2）交联剂的浓度有关（更主要）（3）单体与双体之间的比例有关2.聚丙烯酰胺凝胶网孔的大小3.聚丙烯酰胺凝胶电泳根据电泳方法4.凝胶电泳的效应：（1）电荷效应、（2）分子筛效应、（3）浓缩效应连续凝胶电泳

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