《组织学技术》教学大纲

PAGEPAGE7《组织学技术》教学大纲适用专业：医学实验技术专业等总学时：52理论学时:4实验学时：48一、课程的性质和任务《组织学技术》是一门医学专业基础课程。医学实验技术专业学生培养的重要环节是实验操作能力的训练。本课程主要讲授常规组织学切片制备及染色技术、免疫组织化学技术、原位杂交技术、图像分析技术等。教学的基本要求和目的注重实验操作能力的训练，从最基本的实验准备开始到实验结果的分析，使学生学会使用形态学实验常用仪器、熟悉科研常用的技术方法，培养学生动手能力、提高学生利用所学知识解决实验问题的能力。《组织学技术》实验课内容为验证性实验。结合本科生的培养目标，我们致力于加强教学过程管理，强化学生素质教育，提高教学质量，深化考核方式和方法的改革，调动学生学习的积极性，加强学生平时学习的主动性，让学生重视课程的全过程学习，减轻学生期末考试的压力，降低学生学业负担，提高学习效果。二、相关课程的衔接《组织学技术》包括组织学、病理解剖学、免疫组织化学、原位核酸分子杂交、图像分析、组织芯片技术等，涉及组织学、病理学、检验学、细胞学、生物学等多门学科的实验技术，它们是重要的医学基础课程，也是生命科学的基础学科。组织学的研究极大地促进了病理学的发展；生物化学的进步也促进了组织学的发展，例如，将生物化学与分子生物学的原理用于组织学而建立起组织化学及分子细胞学，将免疫学的原理用于组织学而建立起免疫组织化学等。从而使人们得知各种细胞与组织的化学组成、分子结构及其基本生命现象。通过该课程的学习，使学生学会使用形态学实验常用仪器、熟悉科研常用的技术方法，培养学生动手能力、提高学生利用所学知识解决实验问题的能力，启迪学生的科研思维，以适应目前创新型人才的培养要求。三、教学的基本要求（一）基本理论知识和技能1.掌握组织学切片制作技术。2．掌握免疫组织化学常用技术。3．了解原位核酸分子杂交、图像分析、组织芯片技术。（二）基本素质1．态度培养学生热爱党、热爱社会主义，立志献身于医学事业；树立良好的职业道德，全心全新意为人民服务；培养严谨的，实事求是的科学作风。

2．能力在教学中对学生进行综合能力的培养，即形象思维能力、空间想象能力、自学能力、综合分析能力和描述表达能力等。教师必须研究本大纲所规定的教学内容，掌握好重点和难点。在教学过程中，要注意培养学生严肃的科学态度、严格的科学作风和严密的科学方法；要培养学生独立分析问题与解决问题的能力，提高学生科学思维能力；通过多媒体教学及实验技能操作，理论联系实际，培养学生动手能力。四、学时分配表1《组织学技术》（学时分配表）序号教学内容学时备注理论实验1石蜡切片制作、组织染色技术22免疫组织化学、原位杂交23常规标本制备8验证性实验，书写实验报告4石蜡切片、HE染色及特殊染色8验证性实验，书写实验报告5免疫组化实验8验证性实验，书写实验报告6病理组织标本取材及病理档案管理8验证性实验，书写实验报告7冰冻切片制作及染色技术8验证性实验，书写实验报告8细胞病理学基本技术8验证性实验，书写实验报告总计52五、成绩考核（一）考核形式及分值权重《组织学技术》课程考核成绩分为三个部分，包括：平时成绩（20%）、实验报告（20%）、期末考试（60%）。表2组织学技术课程考核成绩分值与权重项目考核类型考核内容分值权重1平时成绩实验操作、出勤、纪律、卫生等100分0.22实验报告撰写实验报告100分0.23期末考试理论考试和实验技能考试100分0.6总成绩100分（二）考核内容及要求1.平时成绩（100分）：考核学生平时实验课实际操作情况、出勤、课堂纪律以及维护实验室卫生等，每次课记录在案，期末汇总，将各次成绩取平均值后，按0.2权重计入总成绩。表3《组织学技术》课程出勤、纪律及卫生评分标准成绩组成评分标准操作规范（20分）实验过程中由于未遵守操作规范，而导致实验仪器、设备损坏者，每次扣20分。不遵守实验室守则每次扣10分。此项所扣总分不超过20分课堂纪律（50分）不完成或不参与实验者，每次扣10分。每次迟到扣除当次成绩5分。学习态度不端正、不认真听讲、私下讲话、课堂睡觉、使用手机等，每次扣10分。经老师指出未加改正者，当次实验课本项得分全部扣除。此项所扣总分不超过50分卫生（30分）实验结束后应及时整理实验台试剂、仪器等，清洁实验台面，未完成者每次小组成员各扣5分。每人打扫实验室卫生1次，不认真打扫者，扣10分；不打扫者，扣20分。此项所扣总分不超过30分。出勤课前班长向主讲教师报告出勤情况，包括：班级总人数、实际出勤人数、缺勤人数及理由，缺勤者上交年级办出具的请假条。无故旷课扣除当次本项成绩全部得分，无故旷课3次即取消考试资格，计为不及格。2.实验报告（100分）：考核内容为撰写6篇实验报告，考核学生撰写实验报告的能力。当堂上交作业。每篇报告满分100分，期末汇总，将各次成绩取平均值后，按0.2权重计入总成绩。（1）成绩计算方法：∑（xi）实验报告部分的最终成绩=6；xi——每篇实验报告的成绩（2）实验报告内容:表4《组织学技术》实验报告内容序号实验内容实验报告内容1常规标本制备1.标本取材与固定2.标本的处理：脱水、透明、浸蜡、包埋2石蜡切片、HE染色及特殊染色石蜡切片HE染色尼氏染色或PAS染色及试剂配制3免疫组化实验免疫组织化学染色4病理组织标本取材及病理档案管理病理组织标本取材及档案管理标准5冰冻切片制作及染色技术冰冻切片制作及染色技术6细胞病理学基本技术细胞标本制作及染色（3）实验报告评分标准:实验报告每次卷面按100分计算，按权重折合后累加获得本课程最后总成绩。实验报告讨论部分要求独立完成，如有雷同或抄袭，则无论抄袭者或被抄袭者均直接扣除当次成绩30分。表5《组织学技术》实验报告评分标准评分标准赋分实验题目10分实验目的10分实验仪器及耗材20分实验步骤40分实验结果10分实验讨论10分未完成报告0分3.期末实验考试（100分）：按0.6权重计入总成绩。（1）理论考试（占50%）：闭卷、统一考试。总计12道题，卷面按100分记录。考试时间：理论课结课后。考核内容：组织学技术所涉及的理论教学内容。题型①名词解释20分：5道题，每题4分。②简答题60分：6道题，每题10分。实验设计题20分：1道题，每题20分。（2）实验技能考试（占50%）：考试时间：随堂考核内容：对标本制备及染色结果进行评定表6标本制备及染色评定标准得分评分标准优秀（86-100分）（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。合格（60-85分）（1）切片较完整，厚度4-6微米，厚薄较均匀，皱褶少或有少许刀痕；（2）染色核浆较分明，红蓝适度，透明洁净，封裱较美观。不及格（60分以下）（1）切片不完整，厚度不均匀，皱褶多或有许多刀痕；（2）染色核浆对比不清果分明，封裱片时有气泡或有大量树胶溢。注：评价时按100分计算，然后按权重折算。六、《组织学技术》主讲教师职责显微形态学实验教学平台负责《组织学技术》课程考核方案的制定、考核过程的监督，协同平台主讲教师对学生的进行考核方案的实施，组织协助主讲教师对学生实验课情况进行评估考核，对学生实验课考核资料（实验报告等）进行归类存档等。主讲教师在形态学实验教学的考核中，主要负责该课程考核方案的实施，考核结果的汇总与记录等。（一）依据教学大纲安排授课内容及进度。（二）第一次课对学生公布课程考核方案，使全体学生知情课程考核相关要求、考核时间、考核方式、考核内容、评分标准。（三）平台要依据教学大纲要求及讲授内容，制定考核实施办法及步骤。协助主讲教师根据考核计划安排对学生进行考核。（四）按权重将各部分考核成绩汇总，计算出课程最后总成绩。（五）每学期末，教研室要组织本课程所有任课教师，对考核改革方案的科学性、执行情况和教学效果进行系统评价，并形成评价分析报告和整改意见上报学院教务处。七、实验指导用书1.教科书蔡勇,阿依木古丽·阿不都热依木主编，《现代组织学技术》，科学出版社,2018.62.参考书[1]赵荧，唐军民主编，《组织学技术》，北京大学医学出版社,2008.8[2]杜卓民主编，《实用组织学技术》，北京：人民卫生出版社,1992.8[3]高英茂主编，《医学形态学实验》，北京：科学出版社,2007[4]李玉林主编，《病理学》第八版，北京：人民卫生出版社,2013[5]CortanRS,KumarV,CollinsT.RobbinsPathologicBasisofDisease.9thed.Philadelphia:WBSaunders，2012八、课程内容（一）理论一石蜡切片制作、组织染色技术【目的与要求】1.了解组织样本的采集2.熟悉标本的固定技术3.掌握石蜡切片制作技术及HE染色技术【内容提要】1.前言2.组织样本制备技术（1）组织样本采集①实验动物的处死方法②实验动物的解剖③取样方法及注意事项（2）标本的固定①固定的目的②固定的对象③常用固定剂④组织固定方法⑤固定时应注意的事项⑥组织固定后的洗涤3.石蜡切片制作技术（1）组织固定后的处理①组织块修整②洗涤③脱水④透明⑤浸蜡与包埋（2）石蜡切片①石蜡切片前的准备②切片方法③切片中容易出现的问题、原因及解决方法4.组织染色技术（1）染色的原理①染色的发展②染料③染色的原理（2）染色方法①整体染色法②组织块染色法③切片染色法④活体染色法（3）HE染色法①HE染色的基本原理②HE染色的基本方法③二甲苯在HE染色中的作用④乙醇在HE染色中的作用⑤水洗的作用⑥分化和蓝化⑦切片制作中出现的问题、原因及解决方法【重点掌握的内容】名词解释固定容积率亲银性反应嗜银性反应媒染剂促染剂渐进性染色退行性染色分化作用蓝化作用2.取材注意事项有哪些？3.固定、脱水、透明、包埋、烤片、染色、封固的目的是什么？4.微波固定的关键点和原则是什么？5.石蜡切片展片标准是什么？6.HE染色中二甲苯、乙醇、水洗的作用是什么？（二）理论二免疫组织化学技术、原位杂交【目的与要求】1.掌握免疫组织化学相关的基本类型、原理、基本过程。2.了解原位杂交的基本步骤与原理。【内容提要】1.免疫组织化学技术（1）基本原理、分类①基本原理②分类（2）IHC标本制备①取样②固定③脱水、浸蜡及包埋④切片⑤烤片⑥标本防脱落技术⑦对照试验⑧抗原修复⑨结果判断（3）免疫荧光组织化学技术①直接法②间接法③补体法④双重标记法⑤非特异性染色的产生及消除方法（4）免疫酶组织化学技术①酶标抗体法②非标记抗体酶法③免疫酶双标记法（5）亲合组织化学技术①基本原理②基本方法③操作步骤（6）免疫金组织化学技术①免疫胶体金技术②蛋白A胶体金技术③免疫金银染色（7）免疫组织化学增敏方法①多聚螯合物酶法②催化信号放大法（8）免疫组织化学结果判定及注意事项①结果判断原则②非特异性染色③常见问题与处理方法2.原位杂交组织化学技术（1）原位杂交组织化学的基本原理①核酸的分子结构②核酸的理化性质③核酸分子杂交的基本原理④核酸探针的种类⑤核酸分子杂交的类型（2）原位杂交组织化学技术的基本方法①杂交前准备②杂交③杂交后处理④检测⑤、对照试验【重点掌握的内容】1.名词解释单克隆抗体多克隆抗体Envision复合物PAP复合物ABC复合物空白对照血清替代对照吸收试验对照原位杂交杂交严格度2.简述单克隆抗体与多克隆抗体的比较？3.酶桥法、Envision法、SP法、ABC法的原理？4.抗原修复的目的是什么?5.免疫组织化学阳性细胞的特征有哪些？6.阴性对照有哪些？如何设置？7.如何辨别特异性染色和非特异性染色？8.杂交后处理的目的是什么？（三）实验一标本制备【目的与要求】1.掌握标本的取材与固定方法。2.掌握标本的处理方法。【内容提要】1.实验用具2.实验试剂3.实验内容4.实验操作（1）配制药品（2）小鼠断髓操作（3）小肠、肝、肾标本的取材（4）标本的固定（5）标本固定后的再修整（6）脱水过程（7）浸蜡与包埋【重点掌握的内容】1.福尔马林的配制方法2.小肠、肝、肾取材的注意事项（四）实验二与石蜡切片、HE染色及特殊染色【目的与要求】1.掌握石蜡切片的要领及注意事项。2.掌握HE染色方法3.掌握尼氏体或PAS染色方法【内容提要】1.实验用具2.实验试剂3.实验内容4.实验操作（1）切片修切蜡块石蜡切片操作展片操作烤片（2）HE染色（3）尼氏体染色或PAS染色（4）切片封固（5）结果观察【重点掌握的内容】1.石蜡切片的操作方法2.HE染色的步骤及注意事项3.尼氏体染色或PAS染色的步骤及注意事项（五)实验三免疫组化实验【目的与要求】1.掌握免疫组化染色的原理及步骤。【内容提要】1.实验用具2.实验试剂3.实验材料4.实验内容5.实验操作（1）石蜡切片脱蜡至水（2）抗原修复：（3）3%过氧化氢处理：（4）PBS洗涤（5）滴加一抗（6）P