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药理学实验讲义药理学实验指导实验一药理学实验基础知识与常用动物捉拿、给药【目的】1、学习药理学实验基础知识;2、掌握药理学实验常用动物捉拿、给药方法。【器材】1ml、5ml.20ml注射器,大、小鼠灌胃针头,250ml烧杯、鼠笼(或铁丝笼),电子称。【药品】0.9%生理盐水。【动物】小白鼠1只、大鼠1只、家兔1只。【内容】一、实验动物的捉拿方法1、 蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍,食指和中指夹住左前肢,拇指压住右前肢;右手将双下肢拉直,左手无名指及小指将其压住而固定。此法用于淋巴囊注射。毁脑和毁脊髓则用左手食指和中指夹持蛙或蟾蜍的头部,拇指和无名指小指握持双下肢,右手持刺针进行操作。2、 小白鼠可采取双手法和单手法两种形式。双手法:右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。单手法:小白鼠置于笼盖上,先用左手食指与拇指抓住鼠尾,手掌尺侧及小指夹住尾根部,然后用左手拇指与食指捏住颈部皮肤。3、 大白鼠大白鼠容易激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠,先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与手掌握住背部和腹部。不要用力过大,切勿捏其颈部,以免窒息致死。4、 家兔用左手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大,其吃重点越分散)。将兔提起,以左手托住其臀部,使兔呈坐位。二、实验动物的给药途径与方法1、小白鼠给药途径与方法灌胃(ig):左手固定小鼠,右手持灌胃器,灌胃针头自口角进入口腔,紧贴上腭插入食道。如遇阻力,将灌胃针头抽回重插,以防损伤。常用灌胃量为0.1〜0.2ml/10g。皮下注射(ih):可用腹部、背部、腹股沟的皮下,此处皮肤比较松弛,也可由助手协助。注药量一般为0.1〜0.2ml/10g。肌肉注射(im):一人抓住小鼠头部皮肤和尾巴,另一人持连4号针头的注射器,将针头刺入后腿外侧肌肉。注射量一般不超过0.1〜0.2ml/只。静脉注射(iv):将小鼠置入固定器,酒精涂擦尾部使血管扩张。自尾部末端刺入,刺入血管后抽针芯可见回血。常用注射量为0.1〜0.2ml/10g。腹腔注射(ip):将小鼠固定后,从下腹部外侧进针,深度较皮下注射深(图3-8)。常用注射量为0.1〜0.2ml/10g。2、 大鼠给药途径与方法灌胃、腹腔注射、皮下注射及尾静脉注射与小鼠相似。静脉注射也可在麻醉下行舌下静脉注射。3、 家兔给药途径与方法灌胃:一人将兔身固定于腋下,一手固定兔头,另一手将开口器放入兔口。另一人将胃管从开口器孔插入口内,再慢慢插入食道和胃。为慎重起见,可将胃管外端放入水中,如无气泡,则可证实胃管在胃内。灌胃量一般为10ml/kg。如用兔固定盒,可由一人操作。静脉注射:一人固定兔身和兔头,另一人在使兔耳边缘血管(耳缘静脉)扩张后,将针头从静脉末端刺入血管,左手拇指和食指固定针头和兔耳,右手注药。注药量一般为2ml/kg,等渗液可达10ml/kg。皮下、肌肉、腹腔注射与鼠类相似。常用注药量分别为0.5、1.0、5.0ml/kg。三、实验动物的处死方法颈椎脱位法:小白鼠和大白鼠:术者左手持镊子或用拇指、食指固定鼠头后部,右手捏住鼠尾,用力向后上方牵拉,听到鼠颈部喀嚓声即颈椎脱位,脊髓断裂,鼠瞬间死亡。豚鼠:术者左手倒持豚鼠,用右手掌尺侧或木棒猛击颈部,使颈椎脱位迅速死亡。断头、毁脑法:常用于蛙类。可用剪刀剪去头部或用金属探针经枕骨大孔破坏大脑和脊髓而致死。大鼠和小鼠也可用断头法处死,术者需戴手套,两手分别抓住鼠头与鼠身,拉紧并显露颈部,由助手持剪刀,从颈部剪断头部。空气栓塞法:术者用50〜100ml注射器,向静脉血管内迅速注入空气,气体栓塞心腔和大血管而使动物死亡。使猫与家兔致死的空气量为10〜20ml,犬为70〜150ml。大量放血法:鼠可用摘除眼球,从眼眶动静脉大量放血而致死。如不立即死亡,可摘除另一眼球。猫可在麻醉状态下切开颈三角区,分离出动脉,钳夹上下两端,插入动脉插管,再松开下方钳子,轻压胸部可放大量血液,动物可立即死亡。对于麻醉犬,可横向切开股三角区,切断股动静脉,血液喷出;同时用自来水冲洗出血部位(防止血液凝固),3〜5min动物死亡。采集病理切片标本宜用此法。实验二不同给药途径对药物作用的影响【目的与原理】不同给药途径可影响药物的作用。依据药效出现时间从快到慢,其顺序一般为:静脉注射、肌肉注射、皮下注射、口服。就作用性质而言,同一药物随着给药途径改变将会产生不同的药效。如硫酸镁口服具有导泄和利胆作用,注射具有抗惊厥和降压作用,外用则具有消炎和镇痛作用。本实验主要观察不同给药途径对药物效应的影响。【器材】1ml注射器2支,灌胃针头1个,小鼠笼,电子秤。【药品】10%硫酸镁(magnesiumsulfate)【动物】小白鼠2只。【方法】1.取体重接近、性别相同的小白鼠2只,称重并标记。观察动物正常活动情况。2.1号鼠灌胃10%硫酸镁溶液0.15ml/10g,2号鼠腹腔注射10%硫酸镁溶液0.15ml/10g。3.观察并比较两鼠在呼吸、肌张力、大便有何不同。【结果】将实验结果填入下表:表2-1硫酸镁不同给药途径对药物作用的影响鼠号 给药途径 给药体积(ml/只) 呼吸肌张力大便 死亡情况1号2号实验三不同给药剂量对药物作用的影响【目的与原理】药理效应与剂量在一定范围内成正比,称为剂量-效应关系,药物效应的强弱呈连续增减的变化,可用具体数量或最大反应的百分率表示的称为量反应,如果药理效应不随药物剂量或浓度呈连续性量的变化,则变现为反应性质的变化,称为质反应,一般药物剂量过小,药物作用不明显,剂量过大,则可能出现不良反应,甚至毒性反应。本实验主要观察不同给剂量对药物作用效果的影响。【器材】1ml注射器3支,小鼠笼,电子秤。【药品】0.2%、0.4%和0.8%戊巴比妥钠(sodiumpentobarbital)溶液【动物】小白鼠3只。【方法】1.取体重接近、性别相同的小白鼠3只,称重并标记3、4、5。观察正常活动。.2.3号、4号和5号小鼠分别腹腔注射0.2%、0.4%和0.8%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g.观3.察翻正反射消失、恢复的时间,并比较三鼠有何不同现象发生。【结果】将所观察的实验结果填入下表:表3-1不同剂量戊巴比妥钠对药物作用的影响鼠号浓度给药途径给药体积(ml/只)现象 显效时间恢复时间3号4号5号实验四不同给药剂型对药物作用的影响【目的】观察不同给剂型对药物作用效果的影响。【器材】1ml注射器2支,小鼠笼,电子秤。【药品】8%乌拉坦(urethane)水溶液,8%乌拉坦胶浆液(含2.5%羧甲基纤维素)【动物】小白鼠2只。【方法】1.取体重接近、性别相同的小白鼠2只,称重并标记6、7。观察正常活动。2.6号鼠皮下注射8%乌拉坦水溶液0.15ml/10g,7号鼠皮下注射8%乌拉坦胶浆液0.15ml/10g,观察小鼠对所注射药
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