典型药物分析实例 黄体酮及其制剂分析 （药物分析课件）

黄体酮及其制剂分析黄体酮又叫孕酮激素，黄体激素，是由卵巢分泌的具有生物活性的主要孕激素。黄体酮黄体酮在怀孕期间黄体酮可以给胎儿早期生长发育提供支持与保障，而且对子宫也有一定的镇定作用。非孕期可以保护女性的子宫内膜，所以是很重要的女性激素。当出现先兆流产的时候可以口服黄体酮，可以起到补充孕激素，也可以起到稳定胎儿、保胎的作用。黄体酮【性状】【鉴别】【检查】【含量测定】一、性状黄体酮本身性状为白色或类白色结晶性粉末；无臭。本品在三氯甲烷中极易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，在水中不溶。黄体酮注射液为无色至淡黄色的澄明油状液体。熔点：本品的熔点（通则0612）为128～131℃。比旋度：取本品，精密称定，加乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，在25℃时，依法测定（通则0621），比旋度为+186°至+198°。二、鉴别与亚硝基铁氰化钠的反应与异烟肼的反应红外分光光度法高效液相色谱法

OH3COH3CCH3

HHHH二、鉴别1.与亚硝基铁氰化钠的反应取本品约5mg，加甲醇0.2ml溶解后，加亚硝基铁氰化钠的细粉约3mg、碳酸钠及醋酸铵各约50mg，摇匀，放置10～30分钟，应显蓝紫色。黄体酮结构中有甲酮基，可与亚硝基铁氰化钠在一定反应条件下生成蓝紫色产物，其他常用甾体激素均不显蓝紫色，或不显色。二、鉴别2.与异烟肼的反应甾体激素的C3酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性条件下与异烟肼、2，4-二硝基苯肼等羰基试剂反应，缩合形成黄色的异烟腙而用于鉴别。取本品约0.5mg，加异烟肼约1mg与甲醇1ml溶解后，加稀盐酸1滴，即显黄色。二、鉴别3.红外分光光度法黄体酮结构中含有甲酮基、双键共轭、羰基，它们在红外光吸收图谱中均有特征吸收峰，可用于鉴别。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集434图）一致。二、鉴别4.高效液相色谱法在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

OH3COH3CCH3

HHHH黄体酮除检查“干燥失重”外，还需检查“有关物质”。注射液需检查“有关物质”。三、检查三、检查有关物质取本品，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。三、检查有关物质精密量取供试品溶液与对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。供试品溶液色谱图中小于对照溶液主峰面积0.05倍的色谱峰忽略不计。三、检查有关物质黄体酮及其注射液中的有关物质主要是合成的中间体和副产物等。现行版《中国药典》采用高效液相色谱法检查有关物质，色谱条件与含量测定项下的条件相同，检查方法为不加校正因子的主成分自身对照法。现行版《中国药典》采用高效液相色谱法对黄体酮及其注射液进行含量测定。四、含量测定四、含量测定填充剂：辛烷基硅烷键合硅胶色谱条件与系统适用性试验流动相：甲醇-乙腈-水（25∶35∶40）检测波长：241nm调节流速实验取本品25mg，置25ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠甲醇溶液10ml使溶解，置60℃水浴中保温4小时，放冷，用1mol/L盐酸溶液调节至中性，用甲醇稀释至刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，调节流速使黄体酮峰的保留时间约为12分钟，黄体酮峰与相对保留时间约为1.1的降解产物峰的分离度应大于4.0。色谱条件与系统适用性试验四、含量测定制作供试品溶液供试品溶液：取本品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液。对照品溶液：取黄体酮对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的