选修1选修一资料高中生物复习资料专题2 第7课时

1X1X第7时

分解纤维的微生物的离[学导]1.合教材P

“基础知识,握纤维素酶的种类和作用及纤维素分解菌的选27方法阅教材“实验设计”,解并掌握纤维素分解菌的筛选过程及刚果染色法的原28理。3.阅读教材P“课题延伸掌握纤维素酶的测定方法。30[重点击

简纤维素酶的种类及作用。掌从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。3.分析分离分解纤维素的微生物的实验流,懂实验操作的原理。一、纤维素分解菌的筛选纤维素纤维素酶纤维素：下图所示为纤维素的结构式。①基本组成单位：葡萄糖。②分布：主要分布在植物根、茎、叶等器官的细胞壁。纤维素酶①组成：是一种复合至少包括三种酶即酶C酶、葡萄糖苷酶。1XC酶和C酶葡糖苷酶②作用：纤维素纤二糖葡糖纤维素解菌的筛选方法：刚果红染色法。①方法一：先培养微生物,加入刚果红进行颜色反应。②方法二：在倒平板时就加入刚果红。原理纤维素＋刚果红→红色复合物↓纤维素酶纤维二糖和葡萄糖不能和刚果红形成红色复合物↓以纤维素分解菌为中心的透明圈

纤素纤维素酶是如何将纤维素分解的？答案纤素酶中的C酶、酶使纤维素分解为纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡1X萄糖。如何设计实验证明纤维素酶能分解纤维素？答案设对照实验支管分加入等量的滤纸条和缓冲在一支试管中加入纤素酶,另一支试管中加等量蒸馏水,荡反应一段时间后可观察到加入纤维素酶的管中滤纸条被水解而加入蒸馏水的试管中滤纸条没有变化。纤素解菌的获得为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？答案筛目的菌株应该到有利目的菌株生长的环境中寻找。为什么将滤纸埋在土壤中可以提取到目的菌？答案

将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。分教“纤维素分解菌的选择培养基配方,答下列问题：29此配方是液体培养基还是固体培养基？为什么选择此类培养基？答案液培养基因为配方中无凝固剂培养基与微生物的接触更密切,微生物更容易从培养基中获得营养物因此可以快速增加微生物的浓度。这个选择培养基对微生物是否具有选择作用？怎样设计对照实验明你的观点？答案有择作用本方中富纤维,适合能够分解纤维素的微生物大量繁殖照实验可以用牛肉膏蛋白胨培养基培养微生物。若选择培养基上微生物数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上微生物的数量,说明培养基起到了选择作用。归纳总结,,下关纤维素酶的叙述,错误的是)

纤素酶只有一,只能将纤维素分解为葡萄糖纤素酶是一种复合,至少包括酶C酶葡萄糖苷酶三种组分1XC.纤维素可被纤维素酶水解成葡为微生物提供营养物质分纤维素的细菌、真菌和放都通过产生纤维素酶来分解维素的答案A解析—C

1

C,XC,1X一题多变上题中分解纤维素的细菌能否在不含纤维素但富含其他有机物的境中生存？为什么？答案能素解菌分解纤素只是为了利用纤维素作为碳其他有机物若可提供碳源也可以生存。题中纤维素酶也在微生物细胞内分解纤维素吗？为什么？答案不细胞中分解纤维素细胞不能直接吸收纤维一般来说纤维素酶都是分泌到细胞外分解纤维素的。分下培养基的配请回答下面的问题。纤维素分解菌的选择培养基：组分纤维素粉NaNO3NaO242KHPO2MgSO·7HO42酵母膏水解酪素

含量1.20.90.50.50.50.5将上述物质溶解后用蒸馏水定容到000mL此培养基配方中为微生物提供碳源的主要是、氮源是。此配方为

培养基(根据物理状态配方。此培养基选择出的微生物主要是

。问题导析

(1)该培养基中纤维素是主要的碳,以可以用于筛选纤维素分解菌。由于该培养基中没有加入琼,所为液体培养基体培养基微生物与营养成分的接触更充分可以提高微生物的代谢效率。答案

(1)纤维素粉NaNO、酵母膏、水解酪素(2)体(3)维素分解菌3

316316解析,,,一题多变从土壤中分离纤维素分解菌,哪情况下可以省略选择培养？答案当壤中纤维素分解菌的度很高可以省略选择培养这步骤。本题中的培养基配方中的酵母膏可以为微生物提供什么成分？答案可提供碳源、氮源和生因子。该培养基中纤维素是否为唯一的碳源？答案不纤维素是主要的碳源另外,母膏和水解酪素也可以提供少量的碳源。二、尝试从土壤中分离出分解纤素的微生物实验流土壤取样：选择富含纤维素的环境↓选择培养：用富含纤维素的选择培养基扩大培养↓梯度稀释：依次稀释～倍↓涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生透明圈的菌落实验操注意事项土壤取样时要选择富含纤维素的环境。选择培养的方法：用富含纤维素的选择培养基。目的：增加纤维素分解菌的浓度。梯度稀释的目的：能获得单个菌落。涂布平板时要选择鉴别纤维素分解菌的培养基。挑选产生透明圈的菌落。菌种的一步鉴定鉴定原理：为确定透明圈内的菌落是纤维素分解,要进行发酵产纤维素酶的实验。发酵方法：有液体发酵和固体发酵两种。

纤维素酶的测定方法般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所生的葡萄糖进行定量的测定。鉴纤素分解菌的培养基鉴别纤维素分解菌时需在培养基中添加什么物质？答案刚红染色剂。鉴别培养基和选择培养基在目的和物理性质方面的区别是什么？答案

①鉴别培养基是在培养基中加入某些特定的作用底物和指示剂,观微生物生长过程中分解底物所释放的不同产物通指示剂的反应不同来鉴别生物;选培养基是在培养基中加入某些物质以促进目的菌的生长繁殖,时抑制其他杂菌的生长繁殖。②选择培养的培养基中没有加入琼所以属于液体培养基,鉴别培养基一般为固体培养基。鉴方—果红染色法从显色结果上看两种刚果红染色法中哪种染色法更容易分纤维素分解菌和其他杂菌？答案方一更容易区分纤维素解菌和其他杂菌先养微生,加入刚果红进行颜色反应,所显示的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用二中有些微生物具有降解色素的能力它们在生长过程中会降解刚果红,会使培养基上形成透明圈,与维素分解菌不易区分。透圈形成对分离的纤维素分解菌作进一步的鉴定的原因是什么？答案

产生透明圈的菌落可能是能产生纤维素酶的微生物也能是能降解刚果红的菌种,以需要进一步鉴定。简要概述筛选纤维素分解菌时透明圈是如何形成的。答案

纤维素分解菌分解纤维素产生的纤维二糖和葡萄糖不与刚果红形成红色复合物,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。向含有分解尿素的细菌的培养基中加入酚红指示,出现类似的圈吗？答案

分解尿素的细菌能够将尿素分解成氨加入酚红指示剂后会变红,会形成以尿素分解菌为中心的红色的圈。归纳总结两种刚果红染色法的较,

,

11,

,,下有刚果红染色法的叙不正确的是()刚红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入刚红可以在菌落形成后加入C.刚果红在菌落形成前倒平板时加入的刚果红不需要灭菌在落形成后加入刚果红,刚果红不需要灭菌答案解析

,,,,,;,研人成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生,请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题：纤维素酶是一种复合,一般认为它至少包括三种组分即C酶、酶和1X若获得纯净的菌常采用平板划线法进行接,过程所用的接种工具是

酶。操作时采用灭菌的方法。刚红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,但并不与

和

发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物,加入刚果红进行颜色反应第二种是在

时就加入刚果红。如果观察到产生菌,还需要进行维素后所产生的

的菌落说可能获得了纤维素分解菌确定是纤维分解的实验维酶的测定方法一是对纤维素酶分解滤纸等纤进行定量的测定。答案

(1)葡萄糖苷(2)种环灼纤二糖葡萄糖倒板(4)明圈发产纤维素酶葡糖解析

(1),C

C(2)X(4)

,,易错易混

关于纤维素分解菌筛选的三个易警示加橘罐采用酸碱处理脱去中果皮(络会产生严重污染目前使酶解法去除橘,可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物,不能产生所用酶的是()生在麦麸上的黑曲霉生在酸奶中的乳酸菌C.生长在棉籽壳上的平菇生在木屑上的木霉答案B当维被纤维素酶分解,会在培养基中出现一些透明这些透明圈()刚红与纤维素形成的复合物纤素分解后的葡萄糖

C.由纤维素酶聚集在一起形成的以维素分解菌为中心形成的答案D解析

,在解维素的微生物的分离实验,为了判断选择培养基是否起到了对纤维素分解菌的选择作用需要设置的对照()未种的只有纤维素为唯一碳源的培养基未种的牛肉膏蛋白胨培养基C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基接了的只有纤维素为唯一碳的培养基答案通分离分解纤维素的微生物实验分解纤维素的微生物进行了初步的筛选这是分离提纯的第一还需要进行()发产纤维素酶的实验提纤维二糖的实验C.浓缩纤维素分解菌的实验提葡萄糖的实验答案A解析

下为离并统计分解纤维素的微生物的实验流据此回答下面有关问题：土壤取样→梯稀释→将样品接种在鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选生透明圈的菌落，统并计算每克样品中的细菌数要从富含纤维素的环境中分离纤维分菌从高温热泉中寻找耐热菌,这说明

。某同学根据需,配制了纤维素分解菌的选择培养成分如下,个实验过程严格执行无菌操作。组分纤维素粉NaNO3NaO242

含量/g1.2

如果将其中的纤维素粉换成选择培养基的作用。

KH0.924MgSO·7HO0.5420.5酵母膏、水解酪素适量菌数

即可说明本验宜采用计算每克样品中的细菌数。

法而不使用平板划线法,原因该法可以根据稀释体积答案

(1)根据目的菌株对生存环境的要到应的环境中去寻找葡萄糖明显多于选择培养基上的菌落数稀释涂布平板解析

(1),,,,(3),,,课时作业[学达标下有分解纤维素的微生物的分离的叙不正确的是)纤素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵对解纤维素的微生物进行了初步筛选,无需再进行其他实验C.纤维素酶的测定方法一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定纤素酶是一种复合酶答案B解析两刚红染色法的结果()

均出现透明圈均会出现透明圈C.方法一出现方法二不出现方一不出方法二出现答案A解析

,,从壤筛选纤维素分解菌的实验设下列流程正确的()土取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落土取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落C.土壤取样→梯度稀释→选择培→挑选菌落土取样→梯度稀释→稀释涂平板→选择培养→挑选菌落答案B解析

“土→→→”,在纤素分解菌进行选择培养用液体培养基的目的()用体培养基可获得大量菌体纤素分解菌适宜在液体培养基上生长C.用液体培养基可以使菌体充分用培养基中的营养物质用体培养基可获得高纯度的维素分解菌答案A解析

,在样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前般先进行选择培养,主要目的是()完除去其他微生物没意,去掉这一步更好C.增加纤维素分解菌的浓度使维素分解菌充分长大答案解析

,

,分纤素分解菌的实验过程中操作有误的()经择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上选培养这一步可省,但获得的纤维素分解菌较少C.样品经稀释培养,刚果红染色对组可将同样量的培养液涂到不含纤维素的培养基上答案A解析

,,[高提能下有培养基和菌种鉴定的叙不正确的是()根培养基的物理状态可将其分为液体培养基和固体培养基可用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C.利用刚果红培养基上是否形成明圈来筛选纤维素分解菌在氮培养基中加入酚红指示鉴定尿素分解菌答案D解析在维分解菌的鉴定实验纤维素酶的测定方法一般()对维素进行定量测定对维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C.对纤维素酶分解纤维素后所产的纤维二糖进行定量测定对维素分解菌进行定量测定答案B解析不够刚果红反应生成红色复合物的()纤二糖C.CMCNa

纤素淀答案A解析,

2210.分离土壤中纤维素分菌用到的方法(①稀释倒平板法②稀释涂布平板法③单菌落挑取法④选择培养①C.②③答案B

②④①④解析

,,,某微生物培养基的配方如下3g,KHPO1g,KCl0.5g,MgSO0.5g,FeSO322g,(CHO)30g,HO000mL,青霉素万位。请回答下列问题：2依物理性,该培养基属于

培养基。该养基中的碳源是。不论何种培养基在各成分都溶化分装前,要进行的是调整pH和

倒平板时一般需冷却至

左,

附近操作。若用该培养液培养纤维素分解,除去的物质是

应入的碳源是

为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入

染料与纤维素可形成

色复合物产生答案透明圈解析

则证明有纤维素分解菌存。(1)液体O)灭菌℃酒精灯火焰O)纤维素粉刚红红2(1),(2)(O),,,50℃,(3),,(CH2

12.某同学为了从土壤中离得到纤维素分解进行了以下操作。第一步：土壤取样。用小铁铲和普通信封将土取回,后倒入一烧瓶中加蒸馏水稀释,塞好棉塞。第二步：制备培养基。成分纤维素粉NaNO3NaHPO·7HO242

含量1.2

KHPO2MgSO·7HO42酵母膏水解酪素

0.90.50.50.50.5待上述物质溶解后加蒸馏水定容到mL第三步：菌悬液涂布平板。用接种环取少量土壤稀释溶液在以上培养基表层涂布。第四步：培养观察。把接种好的培养皿放到℃恒温箱中培养1～d,观并记录菌落的生长情况。根据以上实验操作完成下列题目：找出该同学明显的错误操作并改正。。要想增加该实验的说服还该怎么做？答案

。(1)第一步：取样工具应提前灭;不能用蒸馏水应用无菌水;壤取回后的操作应在火焰旁进行。第二步：培养基制备好后应灭菌。第三步：接种应在无菌条件下进用菌的吸管或移液器取样品一设置对照实验,再制一组无纤维素粉的培养基接种该土壤样品培养观察。二是最后要对该微生物进行鉴用刚果红染色法鉴定该微生物的菌看周围是否出现透明圈解析→→→→13.一种广泛使用的除草(含氮有机物在土壤中不易被降长使用可污染土壤修被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的菌已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草的培养基不透)

33制备土壤浸出液为避免菌体浓度过高需将浸出液进行稀释理。现有L土浸出液,用无菌吸管吸取1mL至有9mL无水的试管中依次稀释至10倍各取mL已释

3

倍的稀释液分别接种到三个培养基上培,记录的菌落数分别为则每升原土壤浸出液样品中菌体数为。(2)要长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌

从途方面来看,上培养基的特点是。