生物安全柜“十市联赛”一等奖

沧州医学高等专科学校王凤玲沧州医学高等专科学校王翠翠检验仪器分析技术生物安全柜

生物危害标识图血的教训03年在与SARS斗争中，我国医疗机构的检验人员已经付出了沉重的代价。由于中国检验界在学科建设的理念上更多的重视质量管理，相对忽视了生物安全管理。04年5月20日钟南山院士总结9例SRAS个案经验教训：此次病例源头不是从本实验室感染，而是从邻近实验室感染，说明存在实验场地污染的情况。生物安全柜一生物安全柜的工作原理和分类(一)生物安全柜的基本工作原理(二)生物安全柜的分类二生物安全柜的结构与功能三生物安全柜的实际应用前言临床实验室由于要接收各类患者的标本，是一个具有一定危险性的工作场所。保护其工作人员的安全和健康，防止生物危害性的污染已经成为迫切需要解决的问题

2003年5月9日美国疾病控制中心发布了最新的实验室生物安全级别标准，即生物安全三级(BiosafetyLevelThree，BSL-3)标准

生物安全柜是生物安全一级屏障的主要防护设施，是防止实验室获得性感染的主要设备生物安全柜的工作原理和分类一、生物安全柜的基本工作原理生物安全柜（biosafetycabinet；biologicalsafetycabinet）是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置气溶胶（aerosol）是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001μm～100μm的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系生物安全柜的基本工作原理

生物安全柜的工作原理主要是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器（high-efficiencyparticulateairfilter,HEPAfilter）过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境。生物安全柜的基本工作原理生物安全柜的工作原理――气流示意图生物安全柜的分类生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准EN12469和美国国家卫生基金会的第49号标准（NSF49）NSF49在上世纪70年代就已经出现，被公认为目前生物安全柜领域最完善的标准。2002年，NSF49正式获得了美国国家标准学会（ANSI）的认可，成为美国生物安全柜的统一标准欧洲标准化委员会（CEN）于2000年5月颁布了生物安全柜欧洲标准EN12469:2000，成为欧盟区域内生物安全柜统一标准这两个标准对生物安全柜的分类、性能和检测均有明确规定生物安全柜的分类根据防护程度的不同，通常将生物安全柜分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级，可适用于不同生物安全等级的媒质的操作按照美国1992年版NSF49标准生物安全等级1级（P1）的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物生物安全等级2级（P2）的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物生物安全等级3级（P3）的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈生物安全等级4级（P4）的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈生物安全柜的分类--Ⅰ级生物安全柜Ⅰ级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作生物安全柜的分类--Ⅰ级生物安全柜无手套型有手套型Ⅰ级生物安全柜结构示意图

生物安全柜的分类--Ⅰ级生物安全柜因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染，故对进入柜内的空气洁净度要求不高空气的流动为单向、非循环式，空气流经HEPA过滤器后进入柜内，通过工作台面后又被过滤、经排气口排出为保护操作人员安全，其向内的非循环吸入气流必须远离操作者，故要求在使用前方有操作窗口、无手套的Ⅰ级生物安全柜时，避免人员在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从柜内抽出为保护环境，安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过HEPA过滤器过滤生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜Ⅱ级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用于微生物研究或制药的添加物时，应使用专为此目的设计制造的II级生物安全柜生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜操作窗口内侧垂直气流和外部吸入气流交汇点的平衡是生物安全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强，此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染操作平台；若垂直气流过强，则有可能使柜内含有微生物的空气逸出Ⅱ级生物安全柜分为A1、A2（原B3）、B1、B2四个类型生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜

A1型生物安全柜

Ⅱ级A1型生物安全柜结构示意图

生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜A2型生物安全柜Ⅱ级A2型生物安全柜结构示意图

生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜B1型生物安全柜当使用微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素用于微生物学研究时，可采用B1型生物安全柜，但是对这些化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区内进行Ⅱ级B1型生物安全柜结构示意图

生物安全柜的分类--Ⅱ级生物安全柜B2型生物安全柜（也称为“全排”型）适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合Ⅱ级B2型生物安全柜结构示意图

生物安全柜的分类--Ⅲ级生物安全柜Ⅲ级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流空气安全柜正面上部为观察窗，下部为手套箱式操作口。在安全柜内操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行。

生物安全柜的分类--Ⅲ级生物安全柜安全柜应维持至少120Pa的负压，方可确保人体与柜内物品完全隔绝进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全柜，排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理Ⅲ级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和4的媒质的操作生物安全柜的结构与功能生物安全柜一般均由箱体和支架两部分组成箱体内部含有风机、门电机、进风预过滤罩、净化空气过滤器、外排空气预过滤器、照明源和紫外光源等设备生物安全柜的结构与功能正面示意图侧面示意图生物安全柜基本结构示意图生物安全柜的应用生物安全实验室选用生物安全柜的原则实验室级别生物安全柜选用原则一级一般无须使用生物安全柜，或使用Ⅰ级生物安全柜二级当可能产生微生物气溶胶或出现溅出的操作时，可使用I级生物安全柜；当处理感染性材料时，应使用部分或全部排风的Ⅱ级生物安全柜；若涉及处理化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒，则只能使用Ⅱ-B级全排风(B2型)生物安全柜。三级应使用II级或Ⅲ级生物安全柜；所有涉及感染材料的操作，应使用全排风型Ⅱ-B级(B2型)或Ⅲ级生物安全柜。四级应使用Ⅲ级全排风生物安全柜。当人员穿着正压防护服时，可使用Ⅱ-B级生物安全柜。生物安全柜的应用

一、仪器的安装生物安全柜在搬运过程中，严禁将其横倒放置和拆卸，宜在搬入安装现场后拆开包装生物安全柜应安装于排风口附近，不应安装在气流激烈变化和人员走动多的地方，不应安装在门口。生物安全柜应处于空气气流方向下游生物安全柜的应用

二、生物安全柜内实验操作注意事项1.平行摆放柜内物品为避免物品之间的交叉污染。2.操作宜缓慢3.柜内移动物品时应尽量避免交叉污染4.避免震动5.柜内尽量不要使用明火生物安全柜的应用三、维护与保养每次实验结束后应对工作室进行清洗和消毒预过滤器一旦受损，应及时更换HEPA过滤器有一定的使用寿命，随着使用期的延长，细菌和尘埃积聚在过滤器上，会导致HEPA过滤器压力损失的增大。HEPA过滤器的使用寿命到期后，应立即更换。由于过滤器可能带有污染物，操作时应注意安全防护，最好请专业人员来更换

生物安全柜的应用有下列情况之一时，应对生物安全柜进行现场检测生物安全实验室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安装完毕生物安全柜被移动位置对生物安全柜进行检修生物安全柜更换HEPA过滤器后生物安全柜一年一度的常规检测

生物安全柜的应用检测项目及要求垂直气流平均风速检测检测方法：在HEPA过滤器以下0.15m处的截面上，采用风速仪均匀布点测量截面风速。测点间距不大于0.15m，每列至少测量3点，每行至少测量5点。评价标准：平均风速不低于0.25m/s，与生产厂家给定值之差不大于±0.025m/s，且单点风速与平均风速之差不大于±20%

生物安全柜的应用工作窗口的气流流向检测检测方法：可采用发烟法或丝线法在工作窗口断面检测，检测位置包括工作窗口的四周边缘和中间区域评价标准：工作窗口断面所有位置的气流均向内工作窗口的气流流速检测检测方法：采用风速计测量工作窗口断面风速。测点间距不大于0.10m，每列至少测量2点，每行至少测量5点评价标准：其断面上的风速值均不低于产品标准要求

生物安全柜的应用工作区洁净度检测采用尘埃粒子计数器在工作区检测。粒子计数器采样口置于工作台面向上20cm高度位置，其测量点服从行、列均为20cm的网格分布。每列至少测量三点，每行至少测量5点评价标准：尘埃粒子数不得高于产品标准要求。噪声检测生物安全柜前面板水平中心向外300㎜，且高于工作台面380㎜处用声级计测量噪声。评价标准：噪声不得高于产品标准要求。小结生物安全柜是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置其工作原理是将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经HEPA过滤器过滤后进入安全柜内，以避免处理样品被污染；柜内的空气也需经过过滤器过滤后再排放到大气中，以保护环境课堂练习

根据防护程度的不同，通常将生物安全柜分成的等级是（