芳酸及其酯类药物的分析4

芳酸及其酯类药物的分析4第1页/共97页2RCOOH羧酸COOH芳酸第2页/共97页3第六章芳酸及其酯类药物的分析第3页/共97页4常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类COOHOH水杨酸（pKa2.98）COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+第4页/共97页5COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COONaOHNH2对氨基水杨酸钠第5页/共97页6双水杨酯COOHOOOH第6页/共97页7贝诺酯OCOCH3COONHCOCH3第7页/共97页8苯甲酸类苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONa第8页/共97页9CH2H2NCOOH氨甲苯酸HOCOOC2H5羟苯乙酯第9页/共97页10COOHSO2(CH3CH2CH2)2N丙磺舒（pKa3.4）NH(CH2)3CH3H2NO2SCOOHO布美他尼第10页/共97页11其他芳酸类药物ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯第11页/共97页12SO3HOHHOHNC2H5C2H5·酚磺乙胺第12页/共97页13第一节结构与性质一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐共同点：苯环、羧基不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）第13页/共97页14二、性质（一）物理性质（1）固体：具有一定的熔点（2）溶解性：游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。第14页/共97页15（二）化学性质1.芳酸具有游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸。-X、-NO2、-OH、-COOH等吸电子取代基存在使酸性增强第15页/共97页16-CH3、-NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱邻位取代>间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强第16页/共97页172.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。

第17页/共97页183.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。4.UV第18页/共97页195.IR6.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具有芳伯氨基的药物可用重氮化--偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。7.色谱法----制剂分析第19页/共97页20第二节鉴别试验

一、FeCl3反应

具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物

第20页/共97页21

直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、水杨酸二乙胺、酚磺乙胺、对乙酰氨基酚

水杨酸ChP（2000）[鉴别]（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。第21页/共97页22

间接：阿司匹林、贝诺酯

阿司匹林ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。第22页/共97页23第23页/共97页24二、重氮化----偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物

ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄～猩红色b-萘酚OH-NH2R第24页/共97页25

直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺

间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯

第25页/共97页26三、水解反应第26页/共97页27第27页/共97页281.分解产物的反应

苯甲酸盐

四、特殊反应第28页/共97页292.与汞离子及茚三酮反应

第29页/共97页303.氧化反应（含硫的药物）第30页/共97页314.异羟肟酸铁反应

六、IR

五、UV

第31页/共97页32第三节特殊杂质检查

一、阿司匹林中水杨酸的检查1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）第32页/共97页332.检查方法对照法反应原理三氯化铁反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）。

第33页/共97页34其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）

第34页/共97页35二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查1.杂质来源

原料残存、脱羧产生2.检查方法

ChP（2000）含量测定法（双相滴定法）。第35页/共97页36

利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量。USP（24）离子对HPLC法（内标法）

第36页/共97页37三、双水杨酯中有关物质的检查BP（1998）TLC水杨酸：杂质对照品法有关物质：高低浓度对比法第37页/共97页381.杂质对照品法

方法：

供试品→供试品溶液

杂质对照品→对照品溶液第38页/共97页39供试品对照品第39页/共97页40判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强。缺点：需要杂质对照品。第40页/共97页412.高低浓度对比法

方法：第41页/共97页42供试品对照品第42页/共97页43判断：①控制杂质斑点个数，控制杂质种类②供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）第43页/共97页44

优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。第44页/共97页45四、羟苯乙酯中有关物质的检查BP（1998）反相TLC高低浓度对比法第45页/共97页46五、酚磺乙胺中氢醌的检查

ChP（2000）HPLC法六、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查（GC）第46页/共97页47第四节含量测定一、中和法1.直接滴定法pKa3～6第47页/共97页48阿司匹林ChP（2000）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4第48页/共97页49COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第49页/共97页50（1）测定方法及计算Ka=3.27×10-4

反应摩尔比为1∶1

（2）讨论①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言第50页/共97页51②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定第51页/共97页522.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林第52页/共97页53USP（24）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。

第53页/共97页54COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：第54页/共97页55反应摩尔比为1∶2优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰羟苯乙酯含量测定亦可用此法

第55页/共97页563.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片氯贝丁酯

如阿司匹林片的测定：第56页/共97页57

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

第57页/共97页58COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O第58页/共97页59第二步水解后剩余滴定水解：反应摩尔比为1∶1

COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）第59页/共97页602NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O

本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰

剩余滴定：

氯贝丁酯：消除供试品中共存的酸性杂质第60页/共97页61片剂含量测定结果的计算

第61页/共97页62剩余滴定法第62页/共97页634.双相滴定法芳酸碱金属盐

如苯甲酸钠ChP(2000)COONa+HClCOOH+NaCl水—乙醚溶剂：水——乙醚第63页/共97页64

取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。

第64页/共97页65

乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底，滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰第65页/共97页665.非水碱量法芳酸碱金属盐冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点

第66页/共97页676.缩合后酸碱滴定法氨甲苯酸加入甲醛使与氨甲苯酸作用，生成Schiff碱后，用碱液滴定H2O+CH2NH2CCOOHHCHO++H3NCH2COO-第67页/共97页68氨甲苯酸取本品约0.3g，精密称定，加水30ml，加热使溶解，放冷，加甲醛与甲酚红指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显淡紫色，并将滴定结果用空白试液校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于15.12mg的C8H9NO2。第68页/共97页69二、亚硝酸钠滴定法

具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物第69页/共97页70三、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法酚磺乙胺注射液ChP（2000）第70页/共97页71

精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（）为159计算含量。

第71页/共97页72注射液含量测定结果的计算紫外分光光度法吸收系数法第72页/共97页732.过滤后的紫外分光光度法（丙磺舒片）

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。第73页/共97页74紫外分光光度法吸收系数法

第74页/共97页753.柱分配色谱--紫外分光光度法

USP（24）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3，SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3，AAS、SA保留，冰醋酸洗脱，280nm测总量第75页/共97页764.离子交换后紫外分光光度法氯贝丁酯强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，对照法定量测定氯贝丁酯含量第76页/共97页77原料药对照法第77页/共97页78四、HPLC1.阿司匹林栓剂ChP（2000）离子抑制色谱法内标法定量2.对氨基水杨酸钠USP（24）离子对反相HPLC内标法定量3.丙磺舒USP（24）离子抑制色谱法外标法定量4.酚磺乙胺ChP（2000）正相HPLC内标法定量第78页/共97页7998：80．鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（C）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾第79页/共97页8095：129.乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为（CD）A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.两步滴定法D.柱色谱法E.双相滴定法第80页/共97页8198：134．测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（BC）A.重量法B.酸碱滴定法C.高效液相色谱法D.络合滴定法E.高锰酸钾法第81页/共97页8299：81.两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是（A）A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg第82页/共97页83反应摩尔比为1∶1T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c——滴定液浓度，mol/LM——被测物的摩尔质量，g/moln——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1∶n第83页/共97页8496：78．苯甲酸钠的含量测定，中国药典（1995年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（D）

A.水—乙醇

B.水—冰醋酸

C.水—氯仿

D.水—乙醚

E.水—丙酮

第84页/共97页8599：83.双相滴定法可适用的药物为（E）A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠

第85页/共97页8699x：[121--125]含量测定方法（中国药典1995年版）为A.直接中和滴定法B.两步滴定法C.两者均可D.两者均不可99x：121.阿司匹林片（B）99x：122.阿司匹林原料药（A）99x：123.对氨基水杨酸钠（D）99x：124.阿司匹林栓剂（D）99x：125.阿司匹林肠溶剂（B）

第86页/共97页87例[1～5]A.两步酸碱滴定法B.直接酸碱滴定法C.两者皆是D.两者皆不是1.苯甲酸钠的测定（D）2.氯贝丁酯的测定（A）3.盐酸的测定（B）4.酸碱滴定法（C）5.阿司匹林片的测定（A）

第87页/共97页88例6.采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是（C）A.180.2mgB.180.2gC.18.02mgD.1.802mgE.9.01mg

第88页/共