花粉生活力测定

湖北生物科技职业学院课 时 教 案讲授人 张薇 课 时 学时 序 号课题内容

实训一花粉生活力的测定

教学时间设计思路

先讲后做，了解花粉生活力贮藏及生活力的测定方法和原理。学问目标：把握花粉生活力测定的意义和测定方法教学目标 力量目标：会进展花粉生活力的测定素养目标：培育学生的团队精神和动手力量教学重、难点及解决方法

教学重点：花粉生活力测定的原理和意义。解决方法：通过多媒体结合案例讲解后学生动手操作，教师指导。教学方法及手段 演示、学做多媒体课件、植物花粉、载玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、枯燥器、TTC教学预备讲解花粉生活力测定的原理和方法教学过程及内容实际操作蔗糖琼脂培育法和染色法教学过程 教师活动 学生活动 教案设计说明 时间安排教学内容

讲解实训原理演示实训过程，布置实训任务

观看多媒体

结合实训过程讲解

20min教学内容 指导实训 蔗糖琼脂培育法 学生练习思考 90min教学内容 指导实训 染色法 学生练习思考 45min记录实训结果完成记录实训结果完成教学内容检查实训内容的把握25min实训报告教学反思湖北生物科技职业学院教案附页一、花粉生活力测定的意义在园艺植物有性杂交工作中，常因杂交亲本间花期不遇，或父本植株栽在异处(地)而必需预先收集花粉。花粉贮藏在低温(0～4℃)、枯燥(相对湿度0～40％)、黑暗的环境下，粉不能用于杂交，这对取得杂交效果有直接影响。二、实训材料及仪器药品园艺植物的雄花、载玻片、盖玻片、解剖针、毛笔、枯燥器、TTC三、花粉生活力的测定方法是将待测花粉直接授粉，然后统计结实率和结子数。此法的缺点是需时间较长，且试验结果易受气候条件的影响；是将待测粉受到柱头上，隔肯定时间切下柱头，在显微镜下检查花粉的萌发状况，依据萌发率的凹凸来鉴定花粉的生命力；1％)25％左右，苹果和梨10～15％，桃10％左右为宜。蔗糖浓度凹凸可调整培育基的渗透压，以防止花粉在培育基上裂开。培育基以微酸性为宜，一般在pH5.2～6之间。发芽温度在20～25℃左B1。麻烦，要有肯定设备和肯定时间。以促进过氧化物(如HO)放氧分解。这些刚被放出的活性氧很简洁使复原剂氧化。在本试验中所用的无色联苯胺-萘酚都是复原剂，但他们被氧化后却都表现红色或玫瑰红色。假设反映迟迟不能进展，花粉也就保持原色。此色优点是比较快捷，但比较间接。比较粗略，有时不能真实反映出有发芽力花粉的数量。四、实训步骤蔗糖琼脂培育法培育基的配制：在100ml的蒸馏水中，参加琼脂1g、蔗糖10～25g(因植物花粉种类而异)，置于烧杯中加热煮沸，然后将该烧杯置水浴锅或盛热水的杯中备用，以防培育基冷却凝固，适于羽衣甘蓝花粉萌发的蔗糖浓度为150g/L，硼对促进羽衣甘蓝花粉萌发的20mg/L。发芽床的设置和播撒花粉：在盖玻片上滴一滴培育基，用棉耳棒蘸上花粉少许，镜下检查花粉是否分布均匀，再将载玻片置入用湿纱布或湿滤纸垫底以保湿的大培育皿中，盖上皿盖。在各载玻片上贴上标签，注明花粉种类、采集时间、蔗糖浓度、播粉时间和操作25～28℃的温箱中。播花粉后的检查：在播花粉后，依据不同植物，经不同时间，在显微镜下检查花粉发芽状况。3～4h后检查，每次检查3-5个视野，统计花粉总粒数和发芽粒数填写下表。〔花粉发芽以其花粉管伸长超过花粉直径为标准〕本试验65100粒花粉，统计每种测定方法中具有生活力花粉的百分率，将观看结果记入下表。蔗糖浓度 视野1视野2视野3视野4视野5花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒萌发数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发率萌发率萌发率萌发率萌发率花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒萌发数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发率萌发率萌发率萌发率萌发率发芽数发芽数发芽数发芽数发芽数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发率萌发率萌发率萌发率萌发率发芽数发芽数发芽数发芽数发芽数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发数萌发率萌发率萌发率萌发率萌发率染色法TTC①原理：凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用过程中都有氧化复原反响，TTC渗入有生活力的花粉时，花粉中TTCTTC变成三苯基甲(TTF)而呈红色。②试液的配制Ⅰ.100ml0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273gKH2PO4pH7.17。放入棕色滴瓶内，置于暗处。TTC为有毒性物质，操作时应留意安全。1～2滴的配制液，用镊子使其混合后，盖上盖玻片。将此载玻片置于人工气候箱中(35～40℃)约(100倍)下观看，凡具有生活力的花粉粒呈红色，其次呈淡红色，失去生活力的和不育的花粉粒表现无色。过氧化物酶测定法①原理：具有生活力的花粉含有活泼的过氧化物酶，它能使过氧化物放出花粉有无生活力。②试液的配制50％酒精溶液中。Ⅱ.0.15100ml50％酒精溶液中。Ⅲ.0.25g100ml的蒸馏水中。以上三种溶液分别放入棕色瓶中备用，使用时将这三种溶液等量配成试剂A，放入棕色滴瓶中备用。0.3％H2O2B，装入棕色滴瓶中备用。AB各一滴，3-5min后置于显微镜下观看。被染色后呈红色的花粉粒，则表示有过氧化物酶存在，花粉有生活力；能发芽，如呈黄色或无色，则表示无生活力。635100粒花粉，统计每种测定方法中具有生活力花粉的百分率，将观看结果记入下表。玻片 视野1视野2视野3视野4视野5花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒发芽数发芽数发芽数发芽数发芽数发芽率发芽率发芽率发芽率发芽率花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒花粉粒五、实训作业五、实训作业1．分别计算出蔗糖琼脂培育法和染色法所测