饲料及其原料中尿素检测方法的研究进展

饲料及其原料中尿素检测方法的争论进展尿素是动物蛋白质补充料中应用的主要非蛋白氮物质。使用尿素一方面可以补充蛋白质饲料的缺乏；另一方面还能削减鱼粉等蛋白质类饲料的使用量，降低饲养本钱。基于动物利用尿素的机理，一般主要将尿素用于反刍动物的养殖，且有较为严格的剂量添加要求，通常尿素在奶牛和羊精料补充料中的添加量不超过1.0%，肉精料补充料中添加量不超过1.5%〔杨红东等，2023〕。 当前报道中，关于尿素的检测方法较多，但主要应用在临床诊断、环境监测等领域。关于饲料及其原料中尿素的检测方法主要集中在对二甲胺基苯甲醛法(DMAB)的应用与改进。除此之外前关于饲料及其原料中尿素检测方法的争论进展综述，以期为进一步完善和统一饲料中尿素的检测标准供给参考。1DMAB目前多数文章及标准中均使用DMAB法检测饲料或原料中的尿素，例如，SC/T3510-1996、GB/T19164-2023、AOAC941-2023、IS06654-1991等。该方法的中尿素含量成正比，因此可以通过测定在肯定波长下反响溶液的吸光值来定量溶液中的尿素浓度，该反响需要在酸性条件下进展。DMAB试剂的反响。综合各方文献，样品前处理所承受的方法根本一样，即使用木炭作为吸附剂吸取饲料溶液中的色素，防止溶液浑浊对后续反响吸光值的测定产生干扰；利用乙酸锌和亚铁氰化钾反响生成亚铁氰酸锌来共沉淀样品中的蛋白等潜在干扰物20min可过滤，而武金凤等(2023)报道，应用此方法处理鱼粉样品时，为了使尿素完全提ISO(1991)、崔淑文和马车覆(1993)的方法根本一样。依据笔者的阅历，从试验结果的牢靠性来考虑，实际样品测定中应用先振荡后静置的操作过程能够较好保证测定结果的准确性，削减可能由于提取引起的误差。样品经过前处理后，即可从中取适量上清液参加试管中与肯定量和反响温度，其中取样量与样品中的尿素浓度和反响体系的测定范围有关。翟毓10min，420nm(1993)报道，鱼粉样品经5mLDMAB25℃水10min420nm(2023)mg510mL25mL5mLDMAB溶液，用水定容至刻度后混匀放置20min,试验结果说明，反响溶液在25℃水20min，测定结果无显著性差异。杨珩和吴玉生(1997)还提出了一种简洁、快速的试纸条定性、半定量测定法，10%2%DMAB〕，2rain条颜色的变化即可定性溶液中尿素的有无〔试纸条呈黄色即为尿素阳性〕，其检出样品溶液中尿素的半定量。420-436nm5mL(1998)指出。试剂空白吸取程度随测定波长的增大而下降，同样波长下样品吸光值的变化440nm加量变化而引起的误差，从武金凤等(2023)报告中的反响溶液扫描图谱也可以看到波长为420~440nm时，吸光值无显著性变化，因此，本方法测定饲料样品的进一步试验中可以探讨在这两个波长下试剂吸取有无显著性差异，以确定反响溶液的最适测定波长。甲酚红法0.1%pH7.2~8.8〔黄色变为红色〕，此颜色变化通过肉眼即能明显区分。应用甲酚红法测定饲料中尿素的主要原理是尿素在脲酶水解作用下产氨而使溶来定性半定量溶液中尿素的有无和含量。当前争论全都认为该方法具有简洁、快速、准确、灵敏等优势，因而可以在样(1990)3030s0.01%，与购置商品化脲酶相比具有明显的经济优势。在《饲料显微镜检与质量掌握手册》一书中，作者推举测定样品时同时测定一系列尿素标准溶液(0~5%10-12min量样品中的尿素浓度。孟丹胜(1994)具体介绍了应用甲酚红检测饲料中尿素含量的结果假阳性和假阴性的排解。从应用该方法检测血清尿素的报道来看，临床争论中已经开头将甲酚红法用于血清尿素的定量测定。邓福贵和李斌(1997)报道，以甲酚红为指示剂酶法测定血清572nm;5min2hpH度变化对反响结果不会产生影响，与酶偶联速率法同时测定临床样品后所得试验结果具有较高的相关性，作者认为，应用甲酚红法测定血清尿素的灵敏度要明显高于邻甲酚酞络合剂和甲基麝香草酚蓝。依据上述试验结果分析，在目前该方法已经可DMAB品前处理过程相结合，以定量样品中的尿素。二乙酰肟法1939Fearon反响。该反响初始为尿素与二乙酰反响，但由于二乙酰溶液不稳定，所以目前多使用二乙酰肟作为反响根底试剂。其根本反响原理为，二乙酰肟首先在酸性条件下解离为二乙酰和羟胺，然后二乙酰与尿素在加热的酸性条件下形成红色二嗪衍生物。此反响产物颜色深浅程度与样品溶液中尿素含量呈正比，因此可以通过测定特定波长下反响溶液吸光值来定量溶液中的尿素。目前争论已经证明向试剂中添加肯定浓度硫胺脲、安替比林和金属离子等可以提高反响溶液和试剂稳定性、增加反响灵敏度等。全都，造成了反响产物的多样性，主要表现在各方法的最适测定波长均不一样，而且目前也少见关于不同试剂组成方法间测定结果相关性的争论，所以各报道间均无较好的可比性。许瑾和才绍河(200l)报道，将适当处理后的样品与二乙酰肟和硫胺500nm利(2023)认为，处理过的样品溶液与二乙酰肟、硫脲和硫酸镉溶液混合后，于沸水540nm(OD)值。罗假设荣(2023)应用该法测定淀粉中尿素含量后指出，样品与二乙酰肟和安替比林的反响460nm．460nm挥该方法特异性强等的优势。NISNIS90的优势是分析操作简洁、快速。依据美国材料与试验协会(ASTMNIS长为780-2526nmNIS(NIRS)分析技术。当前饲料领域内已有很多关于应用该方法检测饲料养分成分或进展饲料品质掌握的争论报道，但相关尿素检测的报道并不多见。Gonz61ez-MartlnHerndndez-Hi-eHo(2023)NIRS(FossNIRSystem5000)，首先建立尿素、缩二脲和禽类排泄物的判别偏最小二乘法(DPLS)模型，然后96.9%、100%和100%，而承受改进偏最小二乘法(MPLS)计算所得到的各物质浓度与添加浓度间的校正相关(SEP)0.9900.28%0.9910.29%、批量苜蓿样品中的尿素、缩二脲及禽类排泄物。部门，能极大地提高工作效率，该方法目前的主要缺陷是仪器价格居高不下及样品检测模型的缺少，因此后续工作中尚需进一步加大对该方法的争论力度，努力降低本钱，建立适用于不同地区和样品的检测模型，从而充分发挥该方法的优势。酶解波氏法脲酶又称尿素酰胺水解酶，相对分子质量为120230-130000．广泛存在于豆类植物籽实、土壤及动物消化道内，能高度特异性水解尿素形成氨和二氧化碳。酶解波氏法原理为首先利用脲酶特异性分解样品溶液中的尿素形成氨和二氧化碳，在碱性条件下，氨与次氯酸盐反响形成氯化胺，氯化胺再与反响溶液中的苯酚和次氯酸盐反响形成奎诺氯胺，最终奎诺氯胺与溶液中的其他苯酚分子反响形成蓝色的吲哚630nm峰，且反响溶液颜色深度的变化与尿素含量成正比，因此可以通过测定反响溶液吸虽然目前应用该方法测定饲料中尿素的争论很少，但临床医学争论中已经证明1983)争论ConwayDMAB(EUConway饲料和颖青贮料中的尿素，该方法具有简洁、快速、价廉和可用于自动化分析等特点。的方法。(2023)在高效液相色谱(HPLC)中承受甲醇一乙酸体系流淌相对混合饲料样品中的尿素进展分析，结果觉察该方法具有良好的线性，其加标回收率为95%-104%、相对标准偏差(RSD)2.7%。小结综合分析上面几种方法，依据测定结果分析，可以分为定性和定