动物生理学实验指导书

10试验指导名目试验一神经生理试验蛙坐骨神经腓肠肌标本制备神经干动作电位引导 1.3神经传导速度的测定试验二血液生理试验2.1红细胞计数 2.2红细胞渗透脆性试验试验三循环生理试验之蛙心起搏点及心肌特性蛙心起搏点心肌特性试验四循环生理试验之蛙心灌流4.1蛙心灌流试验五循环生理试验之动脉血压的直接测定及其影响因素5.1试验六消化生理试验胃肠运动的直接观看小肠吸取和渗透压的关系试验七泌尿生理试验8.1尿的分泌及其影响与调整试验八泌尿、循环、呼吸生理综合试验〔综合打算 07级 试验九肌肉生理试验阈刺激、阈上刺激与最大刺激肌肉的单收缩肌肉的强直收缩和收缩总和年 月 日 星期蛙坐骨神经腓肠肌标本制备的机能等。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：中式剪子，眼科剪，眼科镊，蛙板，玻璃分针〔培育皿，大头针，棉花，线，任氏液，纱布等。试验方法：1、破坏脑脊髓取一只蟾蜍或蛙，用自来水冲洗干净。保定好，用探针从枕骨大孔垂直刺入，然后向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。此时蟾蜍四肢松软，呼吸消逝，表示脑脊髓破坏完全。0.5-1.0〔见图刀，沿脊柱两侧剪除皮肤肌肉和一切内脏〔留意勿损伤坐骨神经，仅留骶尾联合以下的后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。3全部皮肤，然后将已剥掉皮肤的后肢，背位放在预先用任氏液浸湿过的清洁蛙板伤。4、分别两腿用玻璃分针分别和挑起坐骨神经丛，剪断神经下的骶骨及骨盆联合前缘的软条腿浸于盛有任氏液的培育皿中。5、分别坐骨神经取一只腿，反面对上放在蛙板上，用玻璃分针沿股二头肌及半膜肌所形6、完成坐骨神经小腿标本在膝关节上方将股骨四周全部的大腿肌肉完全分别，从膝关节四周剪掉肌肉，露出股骨后，在膝关节以上17、完成坐骨神经腓肠肌标本在跟腱下穿线结扎，贴股面剪下跟腱，使腓肠肌与四周组织〔见图。8、用锌铜弓检查标本用经任氏液润湿的锌铜弓快速接触坐骨神经，假设腓肠肌发生明显试验之用。留意事项：1、在剥离标本时，不能用金属器械触碰神经干。2、分别时，肯定要把神经四周的结缔组织剥离干净。要随时用任氏液潮湿神经和肌肉，防止枯燥。4、从第4或机能受到损伤，则应放弃此标本，重制作。试验结果分析：1、任氏液的生理作用是什么？2、为什么不能用金属物品触碰神经干？神经干动作电位引导PcLab统的使用方法。双相动作电位：将两个记录电极置于神经干的正常部位时，描记出的曲线导到记录电极下而被引导、放大出来的电信号，几乎与刺激信号同时消灭。试验对象：蟾蜍或蛙片，棉球，任氏液。试验方法：1至趾部，然后两端结扎，将坐骨神经从机体上完全分别，不带任何组织。2PcLab生物信号采集处理系统刺激器使各仪器同步。电位的波形。留意事项：的大小及波形。2、刺激的强度要由弱到强，逐步增加至适宜强度，以免过强刺激损害神经标本。3、检查刺激电极与引导电极之间接地是否良好，并承受各种方法削减伪迹。试验结果分析：神经纤维动作电位的“全或无”定律相冲突？为什么？试验二血液生理试验年 月 日 星期红细胞计数目的和原理：了解红细胞计数的原理并把握其计数的方法；用特制的计算红细胞的吸管，100200中，在显微镜下记数肯定容积的稀释血中的红细胞数，再将结果换算成每升血液内的红细胞数。试验对象动物血液试验器材和药品显微镜，采血针，酒精棉球，95%酒精，75%酒精，生理盐水，蒸馏水，血球计〔红细胞稀释吸管，记数板，手摇计数器，盖玻片，栽玻片，乙醚，1%的氨水。试验方法1、洗记数板和红细胞血管：吸血管中血迹先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗三遍，然后用95%酒精洗两次以除去管内的水分，最终，吸入乙醚1-2涤液时不行用嘴吹，以免吹入水气，可将橡皮管折叠积压数次，便可驱尽。计数板只能用自来水和蒸馏水相继冲洗，然后用擦镜纸轻拭，切不行用酒精和乙醚洗涤。2、了解血球计的构造血球计由计数板和红细胞稀释吸管组成，计数板为长方形玻璃板，中间有四条平行槽沟，在中间两条槽沟之间，有一条横槽沟，使其构成长方形的平台。平台比整个玻璃板的平面低0.1mm，所以当搁上一块玻璃片后，平台与盖玻片之间距离〔高度〕0.1mm。两平台中心局部各有一计数室〔见图3mm910.1为16个中方格，使用于白细胞计数。中心的一个大方格则由双线划分为25个中方格，每0.00416适用于红细胞计数〔1616但其小方格的面积均一样0.5、1.0、101。0.5〔生理盐水〕1010.5，1.01011004、计数调整好显微镜，要留意显微镜的载物台应确定水平，以免红细胞向一边集中，光5〔共80个小方格80计算〕=5/80立方毫米〕=1/20〔长〕*1/20〔宽〕*1/10k=稀释倍数然后将结果换算成个/L留意事项：1、吸血时不应将气泡吸入。2153、吸血管、盖玻片及计数板等用过后，必需马上洗涤干净。红细胞渗透脆性试验后者代表红细胞的最小脆性。试验对象：动物血液1%NaCl试验方法：101%NaCl2、将血液样品混匀用吸管吸取血液向十个试管中分别滴加一滴，充分混合，然后在室温13、判定标准的盐溶液的浓度，即为最大抵抗力。红细胞发生溶血的盐溶液浓度，即为红细胞的最小抵抗力。试验记录：试验结果分析：1、何谓红细胞的渗透脆性？2、红细胞抵抗力与红细胞的脆性有何关系？试验三循环生理试验之蛙心起搏点及心肌特性年 月 日 星期蛙心起搏点目的和原理：观看蛙心脏各局部活动的先后挨次和频率，来分析心脏活动规律及其产生原理，心脏的特别传导系统具有自动节律性，但各局部自律性的凹凸是不全都的。在哺乳动〔两栖类叫静脉窦〕的自律性最高，正常的心脏搏动每次都由窦房结发出冲动，沿传导组织引起心房、心室收缩。所以窦房结又称为哺乳动物的心脏起搏点。蛙等两栖类动物的起搏点是静脉窦。它收缩的先后挨次为静脉窦、心房、心室、动脉球。试验对象：蟾蜍或蛙线，滴管，任氏液。试验方法：1、取一只蟾蜍，用探针破坏脑和脊髓，仰卧固定在蛙板上。用镊子提起腹部中心的皮肤，用镊子轻轻提起甲状软骨，在腹肌上剪一小口，将剪刀深入体腔，沿皮肤切口方向剪下一块三角形肌肉，即可看到心包内跳动着的心脏。留神剪快活包，暴露心脏。搏频率。3、用小镊子在静脉窦与心房之间穿一丝线，进展结扎〔斯氏第一结扎均处于舒张状态，而静脉窦照旧搏动，记数其频率。待心房和心室又开头收缩后，记数单位时间内静脉窦和心房、心室的收缩频率。4、另取一线，在心房与心室之间结扎〔斯氏其次次结扎录静脉窦、心房、心室的收缩频率。5、在试验过程中要常常滴加任氏液。试验记录：试验结果分析：1、蛙心进展斯氏第一次结扎后，为何房、室消灭较长时间的停搏？为何又能恢复搏动？如何？心肌特性目的和原理理解期前收缩与代偿间歇的发生原理，学习暴露蛙心脏的手术方法和在体心脏的机械描记方法。心肌细胞在一次兴奋之后，由于膜电位发生了变化，其兴奋也会发生一系列的周期性变化。心肌兴奋性的特征之一是具有较长的不应期，确定不应期相当于整在窦房结〔两栖类为静脉窦〕发出的正常节律性兴奋下达之前，给心脏施加一较强的刺激〔阈上刺激有确定不应期，当正常的节律性兴奋到达心室时，往往落在期前收缩确实定不应期中，因而不能引起心室发生反响，须在下一次的正常节律性兴奋传来时，才能发生再次反响，因或无”的特性，即在其他条件都恒定的状况下，心肌对任何强度的阈上刺激均发生同样大小的反响。试验对象：蟾蜍或蛙线，滴管，任氏液，铁架台，双凹夹，刺激器等。试验方法：PcLab2、启动PcLab代表心室的收缩，哪一局部代表心室的舒张。3、在心脏的收缩期，以中等强度的单个电震进展刺激，观看能否引起心脏活动的转变。其后伴有代偿间歇消灭。在图中区分出并加以标记。5、用丝线在静脉窦和心房之间做结扎〔斯氏其次次结扎小到大给以强度间隔一样的阈下刺激和阈上刺激，观看蛙心收缩强度的变化〔每次刺激的157试验结果分析：1、蛙心夹为什么要在心脏的舒张期夹住心尖？2、心肌具有较长的不应期有何生理意义？试验四循环生理试验之蛙心灌流年 月 日 星期4.1蛙心灌流搏动的必要条件。试验对象：蟾蜍或蛙试验器材和药品：蛙类手术器械一套，蛙心套管，试管夹，蛙心夹，铁架台，双凹夹，丝线，滴管，任氏液，2%NaCL，1%CaCL，1%KCL，2.5%NaHCO3，3%乳酸，0.1%肾上腺素溶液，0.01%乙酰胆碱溶液。试验方法：1这样就阻断了血液连续流回心脏。在结扎时切勿损伤静脉窦，否则心脏会停顿跳动。2、将心脏放回原位，用眼科剪在主动脉的根部朝心室的方向剪一小口〔见图氏液的蛙心套管的尖端由此口插入动脉球，然后将插管稍后退，再转向心室中心的方向，在心室的收缩期插入心室内。插套管时要特别留神，应渐渐摸索插入，以免损难过肌，套管插好后的斜口应向心室腔，以免心室收缩时堵塞斜口。假设套管插入深度深度和位置适宜，可见套管中有血液如喷发样在任氏液中升起，同时管中的液面随心脏的跳动而上升和下降。如下图。最终，将与心脏相连的血管和其它组织在结扎处之外剪断，摘除心脏，用任氏液反复冲洗心脏至血液全部洗净为止。PcLabPcLab信号采集处理系统描记以任氏液灌流的正常的心搏曲线，留意心搏的强度和频率。2%NaCL观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上停顿观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。61%CaCL1-22快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。71%KCL1-2快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。82.5%NaHCO2-33观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。93%1-2快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。100.1%1-2液混匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，马上110.01%1-2溶液混匀，同时用笔做一记号，观看心搏活动有何变化。待心搏活动发生明显转变后，立即停顿观看，快速吸出套管内的溶液并添加颖的任氏液，反复数次，至心搏恢复正常为止。试验记录：试验结果分析：向套管中滴加钙离子与钾离子后，心搏消灭怎样的变化？为什么？试验五循环生理试验之动脉血压的直接测定及其影响因素年 月 日 星期5.1动脉血压的直接测定及其影响因素内外环境的某些因素发生转变时，动脉血压会发生相应的变化。试验对象：家兔20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，丝线，25%硫代硫酸钠〔或肝素生理盐水0.010.01%夹，注射器，PcLab试验方法：1、取家兔一只，从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯〔1/公斤〕进展麻醉。注射时随时观看动物的状态。当四肢松软，呼吸变慢，角膜反射迟钝时，说明已麻醉。1cm。分别皮下结缔组织，暴露出胸头肌和胸骨甲状舌骨肌，分别此两肌肌缝之间的结缔组织，分别两侧的胸骨甲状舌骨肌，于气管两侧找出左右的血管神经束〔见图。减压神经最细，呈白色，常与交感神经紧贴在一起。分清其位置后，依次分出减压、交感2cmc的结缔组织膜，将动脉分别出3-4cm，穿线备用。然后用同样方法分别右侧颈总动脉和神经并穿线。将右侧颈总动脉的离心端结扎，向心端用动脉夹夹住〔尽量靠后。再穿一线作结扎动脉套管时用。5、将各试验仪器联结好，检查压力系统是否漏气，漏水。6、一切预备妥当后，先定标。此时动脉套管尖端应无气泡，如有应排出。7同时检压计浮标上的笔尖也随之上下浮动。8PcLab9、松开两后肢的固定绳，并快速将身体后部举起，观看地心引力对血压有何影响。10、待血压恢复平稳后，以动脉夹夹注对侧的颈总动脉，观看血压有何变化。、待血压恢复平稳后，用薄的乳胶手套将动物的鼻子和嘴套起，并使其中存有少量空气，经过一段时间后，手套内的二氧化碳的浓度渐渐增高，此时观看血压有何变化。12、待血压恢复平稳后，先剪断一侧减压神经，观看血压有何变化。然后，以中等强度的连续电震刺激减压神经的向中端，观看血压有何变化。13、待血压恢复平稳后，结扎一侧迷走神经，并自结的向中端剪断，观看血压有何变化。然后提起神经，轻轻刺激神经的离中端，观看血压有何变化。14、待血压恢复平稳后，将另一侧迷走神经剪断，观看血压有何变化。然后再刺激减压神经，观看血压有何变化。、待血压恢复平稳后，自耳静脉注入0.01%0.5ml〔肾上腺素注入后，应再补充数毫升的生理盐水，以使药物全部进入循环，观看血压有何变化。160.01%0.5ml，观看血压有何变化。、待血压恢复平稳后，做放血处理，观看血压有何变化。留意事项：1、进展一项试验后，须待血压恢复平稳后，在开头下一项试验。2、动脉套管与颈总动脉保持平行位置，防止刺破动脉或堵塞血流。3、试验过程中要留意保温，防止动物死亡。试验记录：试验结果分析：变化？两者试验结果有何异同？为什么？试验六消化生理试验年 月 日 星期胃肠运动的直接观看目的和原理直接观看动物在麻醉状态下胃肠运动的各种形式及神经和体液对胃肠运动的调整作用。胃肠肌肉属于平滑肌，所以胃肠道具有平滑肌运动的特性，由于胃肠道平滑肌构造不同，因此胃运动呈蠕动及紧急性收缩；而肠运动的主要方式为蠕动、分节运动及摇摆。试验对象：家兔肾上腺素，20%氨基甲酸乙酯。试验方法：小肠、大肠等各部位。2、认清各部位后，观看胃的蠕动及紧急性收缩，肠的蠕动、分节运动、摇摆。3、对胃肠进展机械性刺激，观看胃肠运动有何变化。40.01%0.5-1.00.5-1.0留意事项：1、在整个试验过程中，要时刻留意家兔的保温；23-5试验结果分析：具体说明胃、肠运动有哪些形式。小肠吸取和渗透压的关系目的和原理了解小肠吸取与肠内容物渗透压之间的关系。肠内容物的渗透压是影响肠吸取的重要因素。同种溶液在肯定浓度范围内，浓度越大，吸取越慢；浓度过高时，反而消灭倒渗现象。使内容物的渗透压降低至肯定程度后，再被吸取。试验对象：家兔0.7%NaCL，丝线。试验方法：17.1，16损伤肠系膜上的血管，也不要将血管结扎。5300.7%氯化钠家兔的保温。试验结果分析：300.7%氯化钠溶液后发生了什么变化？为什么？离体肠断运动描记目的和原理：观看在离体状况下肠的运动状况以及某些因素对肠运动的影响。肠平滑肌具有自动节律性收缩的特性，并且受肠壁神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠断虽然失离体肠段运动的装置还可以用来争论各种化学因素对平滑肌的影响。试验对象：家兔0.01%肾上腺素，0.01%乙酰胆碱，台氏液等。17.2，3〔十二指肠或空肠37-38oCPcLab38-39oC10-302、离体肠段开头运动后，观看肠段的正常收缩曲线。330oC，观看肠段运动有何变化。0.01%肾上腺素数滴于平滑肌槽的通气管中，观看肠段运动有何变化。然后用台氏液冲洗通气管。乙酰胆碱数滴于平滑肌槽的通气管中，观看肠段运动有何变化。留意事项：1、台氏液要配制的。试验结果分析：小肠平滑肌的生理特性与骨骼肌、心肌有何不同？试验七泌尿生理试验年 月 日 星期8.1目的和原理了解一些生理因素对尿分泌的影响及其调整。尿是血液流过肾单位时经过肾有效滤过压的大小取决于肾小球毛细血管内的血压，以及血浆的胶体渗透压和囊内压。影响肾小管重吸取机能主要是管内液渗透压的凹凸和肾小管上皮细胞的重吸取力量，后者又为多种激素所调整。试验对象：家兔20%氨基甲酸乙酯，20%葡萄糖溶液，0.01%肾上腺素，垂体后叶激素，生理盐水，烧杯，缝合线，保护电极。试验方法：取一只试验前給予充分饮水的家兔，耳静脉注射20〔1g/kg定，在颈局部别迷走神经，并在其下穿线备用。在耻骨联合前方找到膀胱，在其腹面正中作一荷包缝合，再在中心剪一小口，插入膀胱套管，收紧缝线，固定膀胱套管，并在膀胱套管及所连接的橡皮管和直套管内注满生理盐水，在直套管下端连接记滴装置〔对雌性动物为防止尿液经尿道流出，影响试验结果，可PcLab〔注：输尿管插管法：找到膀胱后，将其移出体外，再在膀胱底部找出两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处分别输尿管，用细线在其下结一松结，在结下方的输尿管上剪一小口，向肾脏方向插入一条适当大小的塑料管，并将松结抽紧以固定插管，另一端则连至记滴器上。5-10化。静脉注射38oC的生理盐水20ml，记录每分钟尿分泌的滴数。静脉注射20%葡萄糖溶液10ml,记录每分钟尿分泌的滴数。0.01%0.5-1.0ml，记录每分钟尿分泌的滴数。记录每分钟尿分泌的滴数。用。留意事项：进展每一项试验时，必需待尿量根本恢复或相对稳定后再开头下一项试验。试验记录：正常 生理盐水 葡萄糖 肾上腺素 迷走神经 垂体后叶素尿量/分〕尿量〔滴/分〕试验结果分析：静脉注射葡萄糖溶液和生理盐水后，尿量有何变化？为什么？试验八泌尿、循环、呼吸生理综合试验〔打算07〕年 月 日 星期目的和原理：了解几种因素对血压、呼吸、尿分泌的影响。动物的血压常常维持在肯定水平，这是由于神经和体液不断调整心脏的活动和血管平滑肌紧急度的结果。正常哺乳动物的呼吸运动能够有节律地进展，并能适应机体代谢的需要，是由于受神经和体液的调整所致。尿是血液流过肾单位时经过肾小球滤过，肾小管重吸取和分泌而形成的。影响肾小球滤过作用的主要因素是有效滤过压，有效滤过压的大小取决于肾小球毛细血管内的血压，以及血浆的胶体渗透压和囊内压。影响肾小管重吸取机能主要是管内液渗透压的凹凸和肾小管上皮细胞的重吸取力量，后者又为多种激素所调整。试验对象：家兔试验器材和药品：手术器械，20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，丝线，25%硫代硫酸钠〔或肝素生理盐水生理多用仪〔或感应圈0.01%0.01%乙酰胆碱，20%葡萄糖溶液，0.01%肾上腺素，垂体后叶激素，生理盐水，烧杯，缝合线，保护电极，PcLab试验方法：1、取家兔一只，从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯〔1/公斤〕进展麻醉。注射时随时观看动物的状态。当四肢松软，呼吸变慢，角膜反射迟钝时，说明已麻醉。1cm。分别皮下结缔组织，暴露出胸头肌和胸骨甲状舌骨肌，分别此两肌肌缝之间的结缔组织，分别两侧的胸骨甲状舌骨肌，于气管两侧找出左右的血管神经束。减压神经最细，呈白色，常与交感神经紧贴在一起。分清其位置后，依次分出减压、交感2cmc的结缔组织膜，将动脉分别出3-4cm，穿线备用。然后用同样方法分别右侧颈总动脉和神〔尽量靠后。再穿一线作结扎动脉套管时用。5、将各试验仪器联结好，检查压力系统是否漏气，漏水。6、一切预备妥当后，先定标。此时动脉套管尖端应无气泡，如有应排出。7同时检压计浮标上的笔尖也随之上下浮动。8PcLab的笔尖和电磁标上的笔尖都应对齐在一条垂直的直线上。10、开动记纹鼓，描记一段正常的呼吸曲线，观看呼吸运动与曲线的关系。11、在耻骨联合前方找到膀胱，在其腹面正中作一荷包缝合，再在中心剪一小口，插入膀胱套管，收紧缝线，固定膀胱套管，并在膀胱套管及所连接的橡皮管和直套管内注满生理盐水，在直套管下端连接记滴装置〔对雌性动物为防止尿液经尿道流出，影响试验结果，PcLab〔注：输尿管插管法：找到膀胱后，将其移出体外，再在膀胱底部找出两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处分别输尿管，用细线在其下结一松结，在结下方的输尿管上剪一小口，向肾脏方向插入一条适当大小的塑料管，并将松结抽紧以固定插管，另一端则连至记滴器上。12、结扎一侧迷走神经，并自结的向中端剪断，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。13、将另一侧迷走神经剪断，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。0.5ml〔肾上腺素注入后，应再补充数毫升的生理盐水，以使药物全部进入循环，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。150.01%0.5ml，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。16、做放血处理，观看血压、呼吸频率、尿量有何变化。留意事项：1、进展一项试验后，须待血压恢复平稳后，在开头下一项试验。2、动脉套管与颈总动脉保持平行位置，防止刺破动脉或堵塞血流。3、试验过程中要留意保温，防止动物死亡。4、由于试验时间过久，动物会渐渐糊涂，此时应酌量补注少许麻醉剂。5、进展每一项试验时，必需待尿量根本恢复或相对稳定后再开头下一项试验。试验记录：试验结果分析：1、切断双侧迷走神经后，呼吸频率、血压、尿量有何变化？2、静脉注入乙酰胆碱，血压、呼吸频率、尿量有何变化。为什么？试验九肌肉生理试验年 月 日 星期阈刺激、阈上刺激与最大刺激目的和原理应用电刺激方法，测出肌肉阈刺激、阈上刺激与最大刺激的强度值，以了解刺激与肌肉收缩的关系。肌肉和其它任何组织一样，都具有兴奋性。当受刺激而发生兴奋时，便表现出收缩活动。但并非任何强度的刺激都能引起肌肉收缩反响，必需到达强度阈值才能引起肌肉的收缩。测定能引起肌肉收缩反响的刺激强