高中生物人教版现代生物科技专题本册总复习总复习【区一等奖】

选修3高二期中考试复习大题一、综合题1．糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得，自20世纪70年代遗传工程（又称基因工程）发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产胰岛素，其操作的基本过程如下图所示：（1）图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”，即_________________、_________________、__________________、________________。（2）图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作__________，从其分子结构可确定它是一种_______________。（3）根据碱基互补配对的规律，在____________酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来（即重组）。（4）细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为____________。目的基因通过活动（即表达）后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素，这是因为基因具有控制________合成的功能，它的过程包括____________________。2．为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系。请据图回答下列问题：(1)获取真核生物的基因通常采用人工合成法，通过图示中①方法合成的耐盐碱基因中是不含____________的，如果要将耐盐碱基因和质粒重组，应该在基因两侧的A和B位置除了接上以上两个结构外还需分别加入____________限制酶识别序列，这样设计的优点有利于质粒和目的基因定向连接。(2)过程②采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系需加入引物Ⅰ和引物Ⅱ等物质，若目的基因扩增4代，则共用了引物Ⅰ________个。(3)请画出PstⅠ切割DNA形成黏性末端的过程：__________________________。(4)图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是____________________。(5)在步骤⑤⑥过程中都需用__________________________处理两类细菌。为了确认目的基因通过⑦过程导入植物细胞中后是否成功表达，通常从分子水平进行检测的方法是用____________法。(6)假设该抗盐碱基因D，通过基因工程导入水稻后连接到水稻的一条染色体上，则该水稻进行减数分裂的细胞在联会时有________个D基因。(12分)下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题：(1)过程①至②抗体的获取称为__________，其中①是__________过程。(2)④过程需要__________酶，⑤过程则需要的工具酶为____________。(3)②处需要筛选，其目的是____________________________________________。(4)结构甲的组成必须包括____________________________________及目的基因等。(5)如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用__________，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。4．（15分）下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。（1）本专利是采用__________方法获得目的基因。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用__________技术。该技术中使用的关键酶是____________；原料是四种脱氧核苷酸。（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是___________，载体上的________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术,再经方法培养成个体。5．为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（1）若已获取耐盐基因的mRNA，可通过获取PG基因。（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）（3）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测导入是否成功，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。（5）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是_______________、_____________、____________、_____________。6．下面是将乙肝病毒控制合成的病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，同时AOX1基因（醇氧化酶基因）受到诱导而表达，5'AOX1和3'AOXl（TT）是基因AOX1的启动子和终止子，此启动子也能使外源基因高效表达。资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，下图为科学家改造的pPIC9K质粒，其与目的基因形成的重组质粒在特定部位酶切后形成的重组DNA片段可以整合到酵母菌染色体上，最终实现目的基因的表达。（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_________限制酶识别序列（SnaBI、AvrII、SacI、BglII四种限制酶的识别序列均不相同），这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。（2）酶切获取HBsA9基因后，需用______________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，根据步骤②可知步骤①将重组质粒先导入大肠杆菌的目的是______________。（3）步骤3中应选用限制酶______________来切割从大肠杆菌分离的重组质粒从而获得图中所示的重组DNA片段，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入______________以便筛选。（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______________以维持其生活，同时诱导HBsA9基因表达。（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_______并分泌到细胞外，便于提取。（7）培育转化酵母细胞所利用的遗传学原理是______________。7．（11分）如图为制作奶山羊乳腺生物反应器生产某种蛋白质的流程图，请分析回答：(1)图中A、B分别表示：____、____。(2)①过程用激素对奶山羊a进行________处理，②过程中对奶山羊b产生的精子在体外受精前需用________法进行获能处理。对采集的卵母细胞要在体外培养至________期，才能与获能的精子受精。过程④常采用________法将目的基因导入受精卵内。为获得较多的相同的转基因奶山羊d的早期胚胎，⑤可采用________。在将早期胚胎移植入代孕奶山羊子宫内之前，需检测早期胚胎细胞是否已经导入目的基因，宜采用________技术。(3)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是__________________________________________________。8．2023年，屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低，价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。（1）提取了高产植株的全部DNA后，要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术，该技术的原理是。（2）如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段，用该双链cDNA进行PCR扩增，进行了30个循环后，理论上可以产生约为__________个DNA分子，该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的________________,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列___________（填“相同”或“不同”）。（3）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答：用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是___________，构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是__________识别结合位点。（4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取技术。目的基因导入组织细胞后，通过技术培育出青蒿幼苗。10．干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降，科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗，根据所学的知识，结合图中相关信息，回答以下问题：（1）上图中进行的是_________（填“体内”或“体外”）基因治疗，该过程中利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和_____________等。（2）ES细胞是由早期胚胎或_____________中分离出来的一类细胞,具有_____________性，可以将其培养成人体各种组织器官。（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的_________________，该结构除了复制原点外，至少包含_________________和干扰素基因等；为检测干扰素基因是否表达，可以采用_________________的方法。（4）为了快速获得更多的目的基因常常采用________技术进行扩增。11．慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，要对精子进行获能处理，对羊的精子常用化学诱导法，即用一定浓度的诱导精子获能。(2)若我们已知白蛋白基因的碱基序列，一般采用获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、、、标记基因等部分。(3)过程④需将重组质粒用方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是。(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的（性别）胚胎进行移植。（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行处理，使之与供体的生理状况保持相同。12．下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题：(1)过程①所用到的组织细胞是________________，过程④所用的酶是________。⑤过程常用________溶液处理大肠杆菌。(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时形成的DNA片段种类与用一种酶和两种酶分别切割时形成的DNA片段种类________(填“相同”或“不同”)。(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后(受体大肠杆菌不含Ampr、Tetr质粒)，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________________的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌体内导入的是______________________的质粒。含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是____________________。(4)将大肠杆菌培养在含青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的__________________________步骤。参考答案1．（1）获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定（2）载体小型环状DNA分子（3）DNA连接（4）扩增蛋白质转录和翻译【解析】（1）基因工程的操作步骤为：获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。（2）质粒是双链环状DNA分子，基因工程中常用的一种载体。（3）把图中甲与乙拼接起来需要采用DNA连接酶；（4）质粒为DNA分子，质粒由一个变成两个，两个变成四个…的增加方式在遗传学上称为DNA扩增。基因具有控制蛋白质合成的功能，且基因控制蛋白质的合成包括转录和翻译两个过程。2．(1)启动子和终止子EcoRⅠ、SmaⅠ(2)15(3)(4)获取大量重组质粒(让目的基因扩增)(5)Ca2＋抗原—抗体杂交(6)2【解析】试题分析：（1）由于目的基因的非编码区不转录形成mRNA，所以反转录获得的基因不含非编码区，即不含启动子和终止子。为了有利于质粒和目的基因定向连接，应选择双酶切，即选择EcoRⅠ、SmaⅠ。（2）目的基因扩增4代，共形成16个DNA，需引物15个。（3）黏性末端由两条链构成。（4）将重组质粒导入大肠杆菌的目的是让目的基因扩增，获取大量重组质粒。（5）将目的基因导入细菌的方法是用Ca2+处理，使之处于感受态，检测目的基因是否翻译出蛋白质，方法是抗原－抗体杂交法。（6）该转基因水稻中有一个基因D，联会时DNA已复制，此时有2个D基因。考点：本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构和能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容的能力。3．（1）单克隆抗体细胞融合（或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合）（2）逆转录限制酶和DNA连接酶（3）筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞（4）启动子、终止子、标记基因（5）土壤农杆菌植物组织培养【解析】试题分析：（1）分析图中细胞A是B淋巴细胞，Y细胞是骨髓瘤细胞，所以①细胞融合过程，②是筛选、培养杂交瘤细胞分泌获得单克隆抗体的过程。（2）图中④过程是利用mRNA为模板，反转录合成目的基因的过程该过程需要反转录酶。⑤过程是构建基因表达载体，需要对目的基因与质粒进行切割和连接，所以需要工具酶：限制酶和DNA连接酶。（3）②处筛选目的是淘汰不能增殖的细胞和不能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。（4）构建的基因表达载体必须包含的结构组成有目的基因、启动子、终止子、标记基因等。（5）农杆菌转化法必须先把基因表达载体转入受体细胞——土壤农杆菌中，再通过土壤农杆菌去侵染棉花体细胞，最后经植物组织培养技术得到能产生抗体的棉花植株。考点：本题考查选修三中细胞工程和基因过程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题。4．（除特殊标出外，每空2分，共15分）（1）人工合成（1分）密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同PCR热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）（2）农杆菌的Ti质粒T–DNA（3）DNA分子杂交组织培养【解析】⑴由题意可知，所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段拼接而成，所以本专利是采用人工合成方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同；体外扩增目的基因采用的技术是PCR，使用的酶是耐高温的DNA聚合酶。⑵利用农杆菌作为运载体时，需要将基因表达载体插入到农杆菌的T—DNA，因为其具有可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。⑶检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是DNA分子杂交；含有目的基因的受体细胞经过植物组织培养获得转基因个体。5．（1）反转录（2）a；a（3）基因枪法（花粉管通道法）（4）耐盐基因（目的基因）一定浓度的盐水浇灌（移裁到盐碱地中）（5）目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定【解析】试题分析：（1）若已知mRNA，可通过反转录法获取目的基因。（2）a是磷酸二酯键，b是氢键，限制性内切酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键。（3）植物作受体细胞是导入方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功可用放射性同位素标记的耐盐基因作探针进行ＤＮＡ分子杂交，又可用一定浓度的盐水浇灌（移裁到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。（5）基因工程的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。考点：基因工程6．（1）SnaBⅠAvrⅡ（2）DNA连接酶大量重组质粒（3）BglⅡ（4）DNA分子杂交（5）甲醇（6）加工（修饰）（7）基因重组【解析】（1）重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子．而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间，只要在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种内切酶对质粒和目的基因同时切割，便会各自出现相同的粘性末端，便于重组与表达，同时防止自身环化，因此在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列。（2）①用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒；②导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度，短时间内可获取大量的重组质粒。（3）重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除BglⅡ外，其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因。（4）用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因。（5）资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时诱导HBsAg基因表达。（6）酵母菌为真核生物，细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物，不具有内质网和高尔基体等细胞器。（7）培育转化酵母细胞所利用的遗传学原理是基因重组。【考点定位】基因工程的应用7．(1)推测应有的氨基酸序列基因表达载体(2)超数排卵化学诱导MⅡ显微注射胚胎分割技术DNA分子杂交(3)改造后的基因能够遗传（或改造基因易于操作）【解析】(1)蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质的功能出发一设计预期的蛋白质结构一推测应有的氨基酸序列一找到相应的脱氧核苷酸序列（基因）。(2)对供体母奶山羊进行超数排卵处理，对羊、牛等生物进行精子获能处理采用化学诱导法。采集的卵母细胞要在体外培养至MⅡ期，才能与获能的精子受精。将基因表达载体导人动物受精卵常采用显微注射法。获得多个相同胚胎用胚胎分割技术，检测目的基因是否导入受体细胞用DNA分子杂交技术。(3)蛋白质工程通过改造基因实现是因为基因能够遗传。【答案】（1）DNA双链复制（2）230cDNA文库（或部分基因文库）不同（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因（答对一个即得分）RNA聚合酶（4）抗原抗体杂交技术植物组织培养（1分）【解析】（1）PCR扩增原理是DNA双链复制。（2）DNA复制是指数级增加的，扩增了30次，理论上应有230个DNA分子。该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的cDNA文库。获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列不同，因为cDNA文库中没有基因的内含子。（3）由图分析可知用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，因为SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因。启动子是RNA聚合酶的识别和结合位点，是一段特殊的DNA序列。（4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取抗原-抗体杂交技术。目的基因导入组织细胞后应通过植物组织培养技术培养出青蒿幼苗，利用的原理是植物细胞的全能性。【考点定位】本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握和对图形分析能力。【名师点睛】易错警示规避与基因工程操作有关的7个失分点（1）目的基因的插入位点不是随意的：基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。（2）基因工程操作过程中只有第三步（将目的基因导入受体细胞）没有碱基互补配对现象。（3）原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。（4）转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。（5）一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。（6）不熟悉标记基因的种类和作用：标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗性基因、发光基因（表达产物为带颜色的物质）等。（7）还应注意的问题有：①基因表达载体中，启动子（DNA片段）≠起始密码子（RNA）；终止子（DNA片段）≠终止密码子（RNA）。②基因表达载体的构建是最核心、最关键的一步，在体外进行。9．（1）限制性核酸内切酶微生物能识别特定的脱氧核苷酸序列并在特定位点切断DNA（2）鸟枪法分别与运载体结合带有目的基因的DNA片段（3）提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达【解析】试题分析：⑴在基因工程中，获取目的基因使用的工具酶是限制酶，限制酶主要存在于微生物中，限制酶的特点是识别特定序列，并在特定位点切割DNA分子。⑵鸟枪法获得目的基因的过程中，将目的基因片段与运载体结合，然后选择出含有目的基因的DNA片段。⑶基因工程的四个步骤为获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和鉴定。考点：本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。10．体外核移植技术原始性腺发育的全能基因表达载体启动子、终止子、标记基因抗原一抗体杂交PCR【解析】试题分析：分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。（1）分析图解可知，上图中进行的是体外基因治疗，该过程利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和核移植技术等。

（2）ES细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，利用其具有（发育的）全能性，可以将其培养成人体各种组织器官。

（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体，基因表达载体除了复制原点外，至少包含启动子、终止子、标记基因和干扰素基因等；为检测目的基因的表达情况，可采用抗体-抗原杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。（4）可以利用PCR技术对体外基因进行大量复制。【点睛】本题结合利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程图，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记细胞工程的操作步骤及相关细节；识记核移植技术的过程